国家自然科学基金(39070670)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 融合表达HBsAg/HBcAg的重组质粒诱导的小鼠免疫应答被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨融合表达HBsAg/HBcAg的重组质粒的免疫诱生效果方法:从乙肝患者的血清中提取HBVDNA,采用PCR技术扩增HBV的S和C基因并拼接成SC片段.构建融合表达质粒pcDNA3.1-SC,以100μg肌肉接种BALB/c小鼠,2,4wk后各加强1次.采用ELISA法检测小鼠血清抗-HBs和抗-HBc,LDH释放法检测体外CTL活性.结果:接种后3,5,8,12wk,小鼠血清抗-HBs阳性率分别达到50%,75%,100%和50%,抗-HBs滴度在第8wk达到峰值.而抗-HBc阳转率低于25%,抗体最高滴度低于1:5.小鼠接种后5wk时的特异性CTL活性为46.9±1.8%(效/靶比100:1).结论:融合表达质粒pcDNA3.1-SC能够同时诱生针对HBsAg/HBcAg的特异性细胞免疫和体液免疫应答,提示研制乙肝的免疫预防和治疗性基因疫苗的可能性.
- 周陶友赵连三陈敏陈守春何芳刘丽唐红
- 关键词：重组质粒免疫应答
- 双重表达乙肝病毒前S_2抗原的重组质粒的疫苗效应
- 2006年
- 目的:乙肝病毒(HBV)的前S2抗原具有比S抗原更强的免疫原性,可以更有效地诱生特异性免疫应答。文中构建含有前S2抗原编码基因的3种重组质粒,观察接种后诱生特异性体液免疫应答的情况。方法:采用PCR技术扩增HBV的S2-S和S1-S2-S基因;同时串联拼接产生S2-S-S2片段。继而构建重组表达质粒pcDNA3.1/S2S、pcDNA3.1/S1S2S和pcDNA3.1/S2SS2。后者意在表达S抗原的同时,双重表达前S2抗原。然后将上述3种质粒分别以100μg肌肉接种BALB/c小鼠,于2、4周后各加强1次。初次接种后3、5、8和12周,分别采血检测小鼠的前S2抗体和抗-HBs。结果:初次接种后3周,S2SS2组小鼠血清的前S2抗体检出率为12.5%,低于S1S2S组(25%)和S2S组(37.5%);但5周时则达到87.5%,并持续到12周,优于S1S2S组和S2S组;并且S2SS2组的前S2抗体滴度达到1∶2000,高于S2S组(1∶500)和S1S2S组(1∶50)。不过,S2SS2组同期的抗-HBs检出率和抗-HBs滴度则低于S1S2S组和S2S组。结论:重组质粒pcDNA3.1/S2S-S2以串联拼接方式双重表达前S2抗原,能够诱生较高水平的特异性前S2抗体,但其诱生抗HBs的能力却明显降低,这是在设计改造基因疫苗时需要考虑的一个重要问题。
- 周陶友赵连三陈敏陈守春刘丽唐红
- 关键词：乙肝病毒前S2抗原基因疫苗
