国家科技支撑计划(2006BAD04A09)
- 作品数:26 被引量:315H指数:10
- 相关作者:于力张兰威苗树君马文戈王伟东更多>>
- 相关机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江八一农垦大学东北农业大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划黑龙江省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程环境科学与工程医药卫生更多>>
- 携带非典型cpb2基因牛源A型产气荚膜梭菌重组α毒素的免疫保护性研究被引量:4
- 2012年
- 为验证重组α毒素对携带非典型cpb2基因的A型产气荚膜梭菌的免疫保护性,本研究应用PCR技术,从某牛场牛源A型产气荚膜梭菌G1分离株中扩增出1 194 bp的α毒素编码基因(cpa)和795 bp的β2毒素编码基因(cpb2)。经BLAST分析显示,G1分离株携带的cpb2基因与14个菌株的非典型cpb2基因的氨基酸序列同源性为95.1%~98.9%,与典型cpb2基因(L77695)的氨基酸序列同源性为61.7%。这表明,G1的cpb2基因为非典型cpb2基因。同时分别将cpa和cpb2基因扩增产物克隆于原核表达载体中,构建重组表达质粒pET-a和pET-b2,重组菌经IPTG诱导表达重组蛋白,将其纯化后单独及联合免疫小鼠进行免疫保护试验。结果显示,单独免疫重组α毒素蛋白组以及联合免疫重组β2毒素蛋白组的小鼠,均可以抵抗至少6倍最小致死量(MLD)的G1外毒素(包含α毒素和非典型β2毒素)的攻击,也可以完全抵抗至少6 MLD的G2外毒素(不包含β2毒素)的攻击。表明,重组α毒素蛋白对含有及不含有非典型β2毒素的A型产气荚膜梭菌均具有良好的免疫保护作用。
- 德艳艳姜志刚牛思博孙刚于力
- 关键词:A型产气荚膜梭菌
- 中温木质纤维素降解复合菌系BYND-8的筛选及培养条件优化被引量:9
- 2008年
- 利用限制性培养技术,从沼液中筛选出1组木质纤维素降解复合菌系。采用木质纤维素失重法,对复合菌系的培养条件进行研究。单因素试验结果表明,稻秆经碱液浸泡后降解率最高,最佳氮源为"蛋白胨+酵母浸粉+硝酸铵"的复合氮源。采用五因素二次通用旋转组合设计进行培养条件的优化组合试验及分析,建立了碳源添加量、氮源添加量、pH、温度、接种量与秸秆降解率间的数学模型,确定最佳的碳、氮源添加量和培养条件为:稻秆3.0g·L-1、蛋白胨4.0g·L-1、酵母浸粉0.8g·L-1、硝酸铵1.2g·L-1,初始pH7.5~8.0,接种量7%(体积比),培养温度30℃,在此条件下,稻秆的降解率可达到64.98%。
- 宋亚彬戚桂娜邓伟陈文浩王伟东
- 关键词:复合菌系二次通用旋转组合设计
- 完全氧化型硫酸盐还原菌的富集及群落特征
- 为富集完全氧化型硫酸盐还原菌群(ASRB)并揭示其群落特征,以乙酸梯级置换进水中乳酸的方式,对厌氧折流板反应器(ABR)中功能群落进行了压力驯化,并应用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)对群落结构进行了跟踪监测。在约100...
- 王俊彩赵阳国李新伟刘茹张健王爱杰
- 关键词:乙酸群落结构变性梯度凝胶电泳
- 文献传递
- 碱度对硫酸盐还原效率及微生物群落动态的影响
- 为阐明碱度在硫酸盐还原过程中的重要作用,应用常规监测和分子生物学技术相结合探讨进水碱度改变时,厌氧折流板反应器(ABR)的处理效能和相应的微生物群落的响应特征。反应器在进水碱度从500mg/L提高至1000mg/L和20...
- 李新伟赵阳国王俊彩刘茹张健王爱杰
- 关键词:碱度硫酸盐还原菌变性梯度凝胶电泳
- 文献传递
- 基于PDA奶牛管理信息服务平台的研究与实现被引量:2
- 2011年
- 阐述了运用信息化手段和人工智能决策方法,设计并实现专门为奶农量身定制的基于PDA奶牛管理信息服务平台。实现奶牛饲养管理与疾病防治基本信息检索,根据通径理论对奶牛近交系数进行估算,对近交系数最小、预增产奶量最高的种公牛进行预测,防止奶牛群体近交,达到优良繁育和实现现场移动办公的目的。
- 秦续彦戚国强魏晓莉王立舒
- 关键词:奶牛管理PDA近交系数
- 牛荚膜血清A型巴氏杆菌病的分子流行病学调查被引量:18
- 2010年
- 本研究针对多杀性巴氏杆菌(Pm)特异性基因kmt1,进化保守基因16S rRNA基因,以及荚膜血清型A、B、D、E和F型对应的荚膜生物合成基因hayD-hayC、bcbD、dcbF、ecbJ和fcbD,设计特异性PCR扩增引物,采用PCR方法扩增相应基因和进行序列测定,并对分离菌株进行分子鉴定和同源性分析。结果显示,来自不同地区的分离菌株均含有Pm种特异性基因kmt1、A型荚膜生物合成基因hayD-hayC和16S rRNA基因。不同地区的分离株,kmt1基因的同源性为100%;A型荚膜生物合成基因hayD-hayC同源性大于99.9%;与国外牛源分离株的hayD-hayC基因的同源性大于98%;不同地区分离株的16S rRNA基因的同源性为100%,而与英国牛源分离株Pm338的16S rRNA基因的同源性高达99.93%。这些结果表明,在我国6个省市流行的牛出血性败血症由同一来源的荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌所致,与英国牛源A型分离株Pm338具有共同的进化来源。
- 马文戈姜志刚于力
- 关键词:RRNA进化分析
- 混合异位酸适宜配比对奶牛瘤胃发酵的影响被引量:7
- 2009年
- 试验采用L8正交试验设计,用体外培养法研究异丁酸、异戊酸和2-甲基丁酸不同配比对奶牛瘤胃发酵的影响,并且筛选适合瘤胃发酵的异位酸适宜配比。结果表明,异位酸不同配比对瘤胃pH没有显著影响(P>0.05);异位酸配比1组(45∶33∶22)与未添加组相比,瘤胃液氨态氮浓度显著降低了18.36%(P<0.05),而瘤胃液的菌体蛋白浓度和培养残留物有机干物质消化分别显著提高了13.43%、10.97%(P<0.05)。因此,异丁酸、异戊酸和2-甲基丁酸3者按45∶33∶22比例混合,可以缓解瘤胃蛋白质降解速度,提高菌体蛋白质含量和有机物的消化率。配比1组多项指标综合指数正效应明显,因此确定混合异位酸的适宜混合比例为45∶33∶22。
- 邵广苗树君沈冰蕾
- 关键词:奶牛瘤胃发酵异位酸体外培养
- 酶法生产共轭亚油酸的研究进展被引量:2
- 2011年
- 共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)具有抗癌、抗动脉粥样硬化、减肥和免疫调节等生理活性。共轭亚油酸可以通过酶法异构化获得,将底物亚油酸异构形成具有生物活性物质-共轭亚油酸的异构酶称为亚油酸异构酶。因此,通过介绍亚油酸异构酶的来源、作用机制、酶学性质和基因工程菌生产等方面的研究进展,结合不断发展的基因工程技术,旨在提高亚油酸异构酶的活性、产量和异构化效率,以扩大反应底物范围,降低生产成本,从而推进共轭亚油酸的规模化、可持续性的工业生产。
- 张艳禾王春来刘思国张兰威
- 关键词:共轭亚油酸亚油酸异构酶
- 混合异位酸添加水平对奶牛瘤胃发酵的影响研究被引量:8
- 2009年
- [目的]为了探讨不同水平混合异位酸添加水平对奶牛瘤胃发酵的影响,[方法]本试验将异丁酸、异戊酸、2-甲基丁酸按45%:33%:22%混合构成混合异位酸。试验采用体外培养法,研究其对瘤胃pH、NH3-N浓度、菌体蛋白含量和培养残留物有机干物质消化率的影响。[结果]表明,添加不同水平混合异位酸对瘤胃pH值没有显著性影响(P>0.05);添加0.6%DM混合异位酸与未添加组比较显著降低瘤胃液NH3-N浓度20.93%(P<0.05),也显著提高瘤胃液的菌体蛋白浓度31.48%(P<0.05)。添加0.6%DM混合异位酸多项指标综合指数(MFAEI)正效应明显。[结论]混合异位酸添加量为0.6%DM可以缓解瘤胃蛋白质降解速度,提高菌体蛋白质浓度和有机物的消化率。
- 沈冰蕾邵广苗树君巩和秋王凤强
- 关键词:奶牛瘤胃发酵体外培养异位酸
- 大口径毛细管气相色谱法快速测定MRS肉汤培养基中水溶性胆固醇被引量:2
- 2011年
- 建立了MRS肉汤培养基中水溶性胆固醇的气相色谱测定法。1 mL样品(含水溶性胆固醇的MRS肉汤培养基)与5 mL 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液混合,然后于60℃水浴皂化30 min。产物游离胆固醇经5 mL甲苯萃取后,采用HP-5大口径石英毛细管柱(30 m×0.53 mm i.d.×1.5μm)进行分离、FID检测器进行检测、外标法进行定量分析。本方法分析一个样品仅需45 min;在5~250 mg/L浓度范围内线性关系良好;回收率为95.6%~98.0%;日内与日间相对标准偏差分别为1.6%和1.9%。本方法具有快速、简便、准确等优点。
- 郭春锋张兰威李婧妍张英春易华西杜明韩雪
- 关键词:气相色谱