目的研究静水压作用下人膀胱平滑肌细胞(human bladder smooth muscle cells,hb-SMCs)内游离钙离子浓度(intracellular free calcium concentration,[Ca2+]i)的变化及香草型瞬时受体电位(transient receptor potential vanilloid,TRPV)基因的表达情况,初步探讨机械应力在介导hb-SMCs增殖中的分子机制。方法取第6～7代细胞进行实验,采用新型Ca2+荧光染色剂Fluo-3/AM负载hb-SMCs,应用倒置激光扫描共聚焦显微镜分别测定静水压加压0 cm H2O(1 cm H2O=0.098 kPa)(A组)、200 cm H2O作用30 min(B组)及撤销200 cm H2O静水压(C组)后hb-SMCs内[Ca2+]i。采用RT-PCR技术测定200 cm H2O静水压作用0、2、6、12、24 h时TRPV1、TRPV2及TRPV4基因mRNA的表达量。结果 A、B、C组hb-SMCs内[Ca2+]i分别为(100.808±1.724)、(122.008±1.575)、(99.918±0.887)U,B组[Ca2+]i明显高于A、C组(P<0.001),C组撤销200 cm H2O静水压力后[Ca2+]i下降至A组基线水平(t=0.919,P=0.394)。RT-PCR检测示,200 cm H2O静水压加压0 h组、2 h组、6 h组、12 h组及24 h组TRPV1、TRPV2及TRPV4在hb-SMCs中均有表达,随时间推移表达无明显变化;各组间TRPV1、TRPV2、TRPV4 mRNA表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论高水平静水压作用下hb-SMCs内[Ca2+]i明显升高。作为可能表达为机械敏感性阳离子通道的TRPV1、TRPV2及TRPV4基因在hb-SMCs中均有表达,机械应力可能通过调节其开放量而非上调其表达量使hb-SMCs内[Ca2+]i升高。
