国家自然科学基金(30371477)
- 作品数：12 被引量：74H指数：7
- 相关作者：魏丽惠赵丹孙蓬明高敏王建六更多>>
- 相关机构：北京大学Charite医科大学柏林洪堡大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都医学发展科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雌激素受体相关受体亚型在卵巢癌中的表达及其与预后的关系被引量：8
- 2005年
- 目的探讨雌激素受体相关受体(ERRs)亚型α、β、γ在卵巢癌中的表达及其与预后的关系。方法激光共聚焦显微镜观察ERRα蛋白在卵巢癌细胞株SKOV3和OVCAR3细胞内的定位。RT-PCR技术检测33份卵巢癌组织以及12份正常卵巢组织中3种ERRs亚型的mRNA表达,并结合临床病理指标分析其预后情况。结果ERRα蛋白主要分布于SKOV3和OVCAR3细胞的细胞核内。卵巢癌组织中ERRαmRNA的阳性表达率(58%)和ERRγmRNA的阳性表达率(48%)显著高于正常卵巢组织(分别为17%和33%,P<0.05);ERRβmRNA的阳性表达率在卵巢癌组织和正常卵巢组织中都很低(分别为9%和0),两者比较,差异无统计学意义(P=0.795)。ERRαmRNA的阳性表达与卵巢癌的手术病理分期(r=0.639,P=0.017)、病理分级(r=0.520,P=0.022)呈正相关。ERRαmRNA阳性表达的卵巢癌患者,其中位数整体生存时间(19.0个月)明显短于ERRαmRNA阴性表达患者(31.5个月,P=0.015),但两者间的无瘤生存时间(分别为12.6和14.5个月)比较,差异无统计学意义(P=0.820);ERRγmRNA阳性表达患者的中位数无瘤生存时间(18.0个月)显著长于ERRγmRNA阴性表达患者(13.5个月,P=0.020),但两者间中位数整体生存时间(分别为23.4和19.6个月)比较,差异无统计学意义(P=0.093)。结论ERRα蛋白主要表达于卵巢癌细胞核内。ERRαmRNA高表达与卵巢癌患者的预后差有关,而ERRγmRNA高表达可能提示患者预后较好。
- 孙蓬明魏丽惠Jalid SehouliCarsten Denkert赵丹高敏孙秀丽Werner Litchtenegger
- 关键词：卵巢癌细胞株雌激素受体受体亚型相关受体预后差
- 雌、孕激素对子宫内膜癌细胞孤儿受体ERRα的调控作用被引量：4
- 2005年
- 目的:探讨孤儿受体ERRα与雌激素(E)、孕激素(P)之间的相互关系及其在子宫内膜癌发病中的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法,检测不同浓度(10-10, 10-8, 10-6 mol/L)17β雌二醇(17βE2 )作用于Ishikawa细胞系不同时间(0min, 15min, 30min和24h)后ERRαmRNA的变化,并应用ER拮抗剂ICI182780同时作用细胞,观察是否可阻断E2 对ERRα的调控作用;检测不同浓度孕酮( 10-8, 10-7, 10-6, 10-5 mol/L)作用于Ishikawa细胞系24h后ERRαmRNA的变化。结果: 10-10 mol/L17βE2 作用于Ishikawa细胞系15min, 30min及24h后ERRαmRNA水平与未加E2 相比均稍有增加,而10-8, 10-6 mol/L17βE2 作用于细胞系15min, 30min及24h后ERRαmRNA明显减小,以10-8 mol/L作用后减少最明显。同时加入E2 和ICI182780作用于细胞系后,E2对ERRαmRNA的减小作用被阻断。10-8mol/L孕酮作用于细胞系24h后,ERRαmRNA与对照组相比无明显变化,但加入10-7, 10-6和10-5 mol/L孕酮后,ERRαmRNA表达均出现明显增加。结论: 17βE2 可减少子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞ERRαmRNA的表达,此减少作用是通过ER介导完成的。孕酮可增加ERRαmRNA的表达。
- 高敏魏丽惠孙蓬明王建六赵丹赵超王志启
- 关键词：孤儿受体ΑMRNA17Β-E2MRNA水平癌细胞系A细胞
- 子宫内膜癌组织中雌激素受体相关受体亚型的表达及其意义被引量：10
- 2005年
- 目的探讨雌激素受体相关受体(ERR)亚型在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法选取46例子宫内膜癌及24例正常子宫内膜新鲜组织,采用RT-PCR技术和免疫组化法检测ERR亚型α、β、γ在组织中的表达,并根据雌激素受体(ER)α的表达情况将其分为ERα(+)和ERα(-)者。结果ERRα、β、γ的mRNA和蛋白表达之间均呈明显正相关关系(r=0.462,P=0.009;r=0.689,P=0.016;r=0.673,P=0.001)。内膜癌组织ERα(+)者中,ERRαmRNA阳性表达率及表达水平(分别为42%,0.24±0.18)均明显低于正常内膜组织ERα(+)者(分别为78%,0.42±0.23;P=0.019,P=0.021);内膜癌组织中ERRβmRNA阳性表达率及表达水平(分别为23%,0.21±0.16)与正常内膜组织(分别为22%,0.27±0.15)相比,差异无统计学意义(P>0.05);ERRγmRNA在内膜癌及正常内膜组织中均呈现高表达,ERα(+)的内膜癌组织中ERRγmRNA的表达水平(0.93±0.24)明显高于正常内膜组织(0.72±0.21,P=0.023)。ERRαmRNA表达阳性的内膜癌患者中,手术病理分期为Ⅰ期患者所占百分比(30%)明显低于ERRαmRNA表达阴性者(70%,P=0.017),但其Ⅱ～Ⅳ期患者及深肌层浸润患者所占百分比(分别为70%和78%)均明显高于ERRαmRNA表达阴性者(分别为30%和43%;P=0.017,P=0.033);内膜癌组织中ERRβmRNA的表达与手术病理分期、病理分级、肌层浸润及淋巴结转移无关(P>0.05);ERRγmRNA表达阳性的内膜癌患者中,淋巴结有转移患者所占百分比(18%)明显低于ERRγmRNA表达阴性者(58%,P=0.021),但其与手术病理分期、病理分级及肌层浸润程度无关(P>0.05)。结论ERR亚型可能是ER以外与子宫内膜癌发生关系密切的又一受体。ERRα可能是子宫内膜癌预后不良的指标,而ERRγ高表达可能提示预后良好。
- 高敏魏丽惠孙蓬明赵丹王建六王志启赵超
- 关键词：子宫内膜肿瘤
- 孤儿受体-雌激素受体相关受体(ERRs)在雌激素信号途径中的研究进展被引量：3
- 2006年
- 孙蓬明Jalied SehouliWerne rlitchnegger魏丽惠
- 关键词：相关受体孤儿受体细胞有丝分裂受体超家族女性生殖
- 雌孕激素对子宫内膜癌细胞中IGFs表达的调控被引量：9
- 2004年
- 目的 通过体外研究雌、孕激素对IGF - 1、IGF -IR以及IGFBP - 1表达的影响 ;探讨糖尿病与子宫内膜癌的关系 ,并为激素依赖性子宫内膜癌的治疗提供思路。方法 运用蛋白免疫印迹技术分别检测雌激素 (E2 )和孕激素 (P)在不同浓度和不同时间作用后对子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa细胞中IGF - 1、IGF -IR以及IGFBP - 1表达的影响。结果 ①在Ishikawa细胞中IGF - 1、IGF -IR和IGFBP - 1蛋白表达均为阳性。②E2可使癌细胞中IGF - 1和IGF -IR表达增强 ,在E2 浓度为 1 0 -8M时作用最强 ,IGF - 1和IGF -IR表达量约可达刺激前 2 5倍 (2 2 5± 0 1 0 ,1 89± 0 0 2 )。E2 浓度为 1 0 -8M时 ,作用 2 4h后IGF - 1表达最高 (2 4 9± 0 0 3) ;作用4 8h后IGF -IR表达最高 (2 2 9± 0 0 3)。③P可使癌细胞中IGFBP - 1表达增强。当P的浓度为 1 0 -6M时IGFBP- 1表达最强 :IGFBP - 1表达强度可达刺激前的 1 8倍 (2 6 6± 0 0 4 ) ,此浓度作用 2 4h后IGFBP - 1表达最强(2 98± 0 0 3)。结论 雌激素可促进子宫内膜癌细胞分泌IGF - 1和IGF - 1R ,孕激素可上调子宫内膜癌细胞的IGFBP - 1 。
- 刘颖张晓红孙蓬明赵丹周蓉王建六魏丽惠
- 关键词：孕激素IGFS
- 子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞雌激素受体表达被引量：18
- 2005年
- 目的研究子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A雌激素受体(ER)的表达情况。方法应用免疫细胞化学和逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)技术,检测Ishikawa和HEC-1A细胞中ERα、ERβ蛋白和mRNA表达水平。结果Ishikawa细胞中,ERα、ERβ蛋白均呈阳性表达,而在HEC-1A细胞中ERα呈弱阳性表达,ERβ阴性表达;Ishikawa细胞中ERα、ERβmRNA表达水平均显著高于HEC-1A细胞;(P<0.01)。结论Ishikawa细胞是ER阳性子宫内膜癌细胞系,而HEC-1A细胞则为ER低表达细胞系。
- 郭瑞霞王建六赵丹王志启魏丽惠
- 关键词：子宫内膜癌雌激素受体ISHIKAWAHEC-1A
- 人雌激素受体相关受体逆转录病毒载体的构建及鉴定
- 2005年
- 目的构建人雌激素受体相关受体α(hERRα)逆转录病毒载体。方法用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pSG-hERRα质粒和pLXSN空白质粒,采用凝胶DNA回收方法回收纯化hERRα片段,用T4连接酶进行连接反应,构建成PLXSN-neo-hERRα重组体。结果经PCR、酶切鉴定、测序等对重组体进行鉴定,证实构建的重组体方向、序列正确。结论已成功构建hERRα逆转录病毒载体,为研究hERRα的功能奠定了基础。
- 高敏孙蓬明赵丹王建六魏丽惠
- 关键词：逆转录病毒载体基因重组
- 17β-雌二醇调控子宫内膜癌细胞孤儿核受体ERRα表达的研究被引量：10
- 2006年
- 背景与目的:雌激素受体相关受体α(estrogenreceptor-relatedreceptorα,ERRα)是孤儿核受体亚家族成员之一,可与雌激素受体α(estrogenreceptorα,ERα)竞争结合同一靶基因位点,从而干扰雌激素-雌激素受体核内信号通路的转导,因而可能在子宫内膜癌的发生方面发挥一定作用。本研究旨在探讨17β-雌二醇(E2)对子宫内膜癌细胞孤儿核受体ERRα的调控作用,明确ERRα在子宫内膜癌发生中的作用及与ER信号通路的关系。方法:采用RT-PCR和Westernblot方法,检测不同浓度17β-E(210-10、10-8、10-6mol/L)作用于ERα阳性的子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞和ERα阴性的子宫内膜癌细胞系HEC-IA细胞24h、48h后ERRαmRNA水平和蛋白水平的变化,并应用完全性ER拮抗剂ICI182780同时作用细胞,观察是否可阻断E2对ERRα的调控作用。结果:不同浓度的17β-E2作用于Ishikawa细胞24h、48h后ERRαmRNA水平及蛋白水平均有不同程度的下调,以10-8mol/L作用后下调最明显。同时加入10-8mol/LE2和10-6mol/LICI182780作用于Ishikawa细胞后,E2对ERRα的下调作用被阻断。不同浓度的17β-E2作用于HEC-IA细胞24h后ERRαmRNA水平出现不同程度上调,但蛋白水平未见明显变化。当17β-E2作用细胞48h后,ERRα蛋白水平出现明显上调,以10-8mol/L作用后上调最明显。同时加入10-8mol/LE2和10-6mol/LICI182780作用于HEC-IA细胞后,E2对ERRα的上调作用无明显变化。结论:17β-E2可下调Ishikawa细胞ERRα的表达,且这种降调作用是通过ER介导完成的;17β-E2可上调HEC-IA细胞ERRα的表达,且这种上调作用不被完全性ER拮抗剂ICI182780所阻断。
- 高敏孙蓬明赵丹王建六李小平魏丽惠
- 关键词：孤儿核受体雌二醇子宫肿瘤
- 基质细胞衍生因子1α对子宫内膜癌细胞信号传导通路的激活作用被引量：2
- 2005年
- 目的 探讨基质细胞衍生因子1α(SDF - 1α)对子宫内膜癌细胞系HEC - 1A和Ishikawa磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI- 3K/Akt)及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的激活作用。方法 应用蛋白免疫印迹杂交技术,检测SDF - 1α作用于HEC - 1A和Ishikawa细胞后Akt及ERK的活化情况。结果 2 0ng/mlSDF - 1α作用于HEC - 1A细胞15min时,ERK1/ 2活化最明显,且持续至少达2h ,随着SDF - 1α浓度的增加,ERK1/ 2活化逐渐增强;SDF - 1α作用HEC - 1A细胞后Akt的活化水平无明显改变。2 0ng/mlSDF - 1α作用于Ishikawa细胞15min时,Akt活化最明显,且持续至少达2h ,随着SDF - 1α浓度的增加,Akt活化逐渐增强;SDF - 1α作用Ishikawa细胞后ERK1/ 2的活化水平无明显改变。结论 SDF - 1α作用于雌激素受体阴性的HEC - 1A细胞和雌激素受体阳性Ishikawa细胞,激活的信号传导通路不同。
- 赵丹李小平王志启高敏赵超魏丽惠
- 关键词：基质细胞衍生因子信号传导通路HEC-1A雌激素受体阳性雌激素受体阴性A细胞A细胞
- 子宫内膜癌腺体及间质细胞中基质细胞衍生因子1及其受体CXCR4的表达被引量：4
- 2006年
- 目的:检测基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4mRNA和蛋白在子宫内膜癌细胞系及组织中的表达。方法:应用免疫组织化学和RT-PCR技术,检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞,44例子宫内膜癌组织,26例非典型增生子宫内膜、单纯增生子宫内膜和正常子宫内膜组织中SDF-1和CXCR4mRNA和蛋白表达水平。结果:HEC-1A和Ishikawa细胞均表达CXCR4mRNA;Ishikawa细胞中SDF-1mRNA弱表达,而HEC-1A细胞中SDF-1mRNA未见表达。CXCR4和SDF-1在正常和良性病变的子宫内膜组织腺体细胞中的阳性表达率为100%,在子宫内膜癌组织的腺体细胞中的阳性表达率分别为90.9%和93.2%。各种子宫内膜组织中间质细胞CXCR4和SDF-1的表达均显著弱于腺体细胞。在子宫内膜癌腺体细胞和间质细胞中CXCR4和SDF-1的表达均显著弱于正常及良性病变者。在低分化的子宫内膜癌腺体细胞中CXCR4和SDF-1的表达弱于高分化者。结论:CXCR4和SDF-1在子宫内膜癌细胞系、子宫内膜组织及内膜癌组织中的表达存在差异,在内膜癌组织中其表达均显著弱于正常及良性病变者。
- 李小平赵丹高敏王建六魏丽惠
- 关键词：子宫内膜肿瘤CXCCXCR4
