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上海市“科技创新行动计划”(11431921400)

作品数:2 被引量:8H指数:1
相关作者:吴敏马恒东兰翀更多>>
相关机构:四川农业大学更多>>
发文基金:上海市“科技创新行动计划”更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇农业科学

主题

  • 2篇山羊
  • 2篇转基因
  • 2篇转基因山羊
  • 2篇基因
  • 1篇选择标记基因
  • 1篇人溶菌酶
  • 1篇溶菌酶
  • 1篇喷雾干燥
  • 1篇基因敲除
  • 1篇LOXP
  • 1篇标记基因
  • 1篇CRE

机构

  • 2篇四川农业大学

作者

  • 2篇马恒东
  • 2篇吴敏
  • 1篇兰翀

传媒

  • 1篇生物工程学报
  • 1篇四川农业大学...

年份

  • 2篇2013
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
利用Cre/LoxP系统删除转基因山羊体内的选择标记基因被引量:8
2013年
在制备转基因家畜过程中的一个关键步骤是使用选择标记基因(Selectablemarkergenes,SMGs)将转基因整合细胞从大量的正常细胞中筛选出来,这导致了SMGs整合入家畜的基因组内持续传递给后代。SMGs已被证明能够显著影响基因组内整合位点处的基因调控,也增加了对转基因动物安全评价的复杂性。为了确定转基因山羊制备过程中SMGs的删除时机和删除方法,在体细胞克隆前后两个时段内,利用Cre/LoxP系统删除SMGs的可行性,同时比较了蛋白转导和质粒共转染两种Cre导入方式的删除效率。结果表明:尽管在首次对山羊成纤维细胞进行遗传修饰后即可进行SMGs删除,但两次遗传修饰导致细胞严重老化,无法用于后续的体细胞克隆羊制备。在转基因山羊的成体细胞中删除SMGs不存在上述问题,成功率高,缺点是试验周期长、耗资增大。Cre表达质粒瞬时转染能够删除SMGs,但有超过30%的无SMGs细胞克隆中整合有质粒序列。TAT-CRE蛋白质转导方法可以避免引入的新外源基因,SMGs删除率达到43.9%~72.8%,是一种较佳的SMGs删除手段。
兰翀任丽娜吴敏刘思国刘国辉徐旭俊陈建泉马恒东成国祥
关键词:转基因山羊CRELOXP基因敲除标记基因
喷雾干燥对人溶菌酶转基因山羊乳汁的影响
2013年
【目的】揭示奶粉制备过程对转基因山羊乳汁中表达的重组人溶菌酶(recombinant human lysozyme,rhLYZ)的影响。【方法】对表达有2mg/mL rhLYZ的转基因山羊乳汁进行了喷雾干燥,对获得的奶粉样品进行了溶解性,乳汁成分,蛋白组分以及溶菌酶活性的测定,对测定结果进行统计分析。【结果】喷雾干燥引发非脂固形物的损失率为42.05%;整个热处理过程引发可溶性蛋白损失率为25.3%;乳汁中rhLYZ的损失为51.1%,扣除总干物质的损耗,喷雾干燥过程引发了约17.7%的rhLYZ生物学活性损失。【结论】制备奶粉过程对转基因山羊乳汁中表达的人溶菌酶影响较小,喷雾干燥是人溶菌酶羊奶的一种可行的保存和加工方式。
吴敏刘思国兰翀徐旭俊陈建泉马恒东成国祥
关键词:喷雾干燥人溶菌酶转基因山羊
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