国家科技重大专项(2009ZX08008-001B)
- 作品数：7 被引量：17H指数：2
- 相关作者：石国庆贾斌刘怡孝管峰甘尚权更多>>
- 相关机构：石河子大学新疆农垦科学院新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 湖羊PRNP多态性及其对产羔数影响和抗痒病风险评价被引量：2
- 2012年
- 为了对湖羊的抗痒病选育提供实验依据,本研究采用PCR-RFLP和测序方法,对120只湖羊PRNP编码区136位、154位和171位密码子多样性进行检测,分析PRNP多样性和基因型对产羔数的影响,并对湖羊痒病易感性进行评估。结果表明,在湖羊中发现了之前研究报道的3个位点所有突变,其优势等位基因分别为A136(94.2%),R154(99.2%)和Q171(62.9%)。在检测的8种单倍型中,ARQ(56.6%)和ARR(21.3%)为主要单倍型。本研究还在湖羊中发现新的单倍型TRK(HM639758),但比例仅为0.4%。群体中ARQ/ARQ(29.2%)和ARR/ARQ(27.5%)为优势基因型,而抗病性基因型ARR/ARR仅占4.2%,未发现VRQ/VRQ基因型。湖羊主要隶属于抗病力较高的R1-2级(35.0%)和R3级(47.5%),推测湖羊对痒病具有中低度易感风险。PRNP不同基因型的选育对产羔数无显著影响。
- 朱庆丰刁俊超潘磊刘怡孝石国庆管峰
- 关键词：湖羊朊蛋白基因多样性产羔数抗病性
- 荷斯坦公牛PRNP多态性与精子活力相关性及抗病性评估
- 本研究以荷斯坦公牛为实验对象，研究PRNP基因三个片段的插入／缺失多样性、不同基因型群体mRNA表达水平以及与公牛的精子活力指标的关系，为牛的抗病性评估和抗病育种研究提供依据。
- 李杰张淑二刘怡孝石国庆管峰
- 关键词：荷斯坦公牛遗传育种朊蛋白基因精子活力抗病性
- 转基因克隆绵羊的亲子鉴定被引量：1
- 2010年
- 利用IASG上公布的绵/山羊的11个微卫星标记,鉴定转基因克隆羊与供体细胞系和代孕母羊间的亲子关系。结果表明转基因克隆羊与供体细胞系之间11个微卫星标记的基因型一致,而与代孕母羊基因型差异很大,由此确定转基因克隆羊来源于供体细胞系。
- 代蓉周平沈思军甘尚权李宁刘守仁
- 关键词：转基因克隆绵羊微卫星标记亲子鉴定
- 绵羊FGF5基因编码蛋白的生物信息学分析被引量：9
- 2011年
- 为了应用生物信息学分析绵羊FGF5基因编码蛋白的结构与抗原表位,预测该蛋白的免疫原性。根据牛的FGF5基因cDNA保守区序列设计引物对绵羊FGF5基因cDNA进行扩增,将扩增片段进行克隆和测序,并与牛的FGF5基因序列进行同源性比较,确定扩增的片段为绵羊FGF5基因片段。利用蛋白分析专家系统(ExPASy)提供的ProtParam、SOSUI、MotifScan、SWISS-MODEL等生物信息学在线分析程序,结合TMH-MM2.0、SignalP3.0、TargetP 1.1和PSORTⅡprediction、Gene Runner和DNAMAN等生物信息学软件,分析、预测FGF5蛋白的理化性质、可溶性、翻译后修饰位点、亲(疏)水性、跨膜区、信号肽序列、蛋白细胞定位区域、二级结构、抗原表位等。结果显示该蛋白由270个氨基酸组成,分子式C1315H2085N389O378S6,分子质量单位为29.5847 ku,理论等电点为10.59,波长280 nm时的吸光度(A)值为0.864,半衰期为30 h,22个翻译后修饰位点、多个亲水性高的区域、2个跨膜区域、11个潜在抗原表位,为可溶性和分泌型蛋白,具有免疫原性,可据此制备多克隆抗体。
- 刘伍限贾斌石国庆
- 关键词：绵羊蛋白质结构生物信息学抗原表位
- 绵羊KAP1.3基因与毛品质的关联分析
- 2012年
- 以702只中国美利奴羊(新疆军垦型)为试验材料,采用PCR-RFLP技术分析KAP1.3基因的多态性,并分析这些多态性位点与羊毛性状的相关性。结果显示:KAP1.3基因编码区存在2个单核苷酸多态性位点(c.240G>A和c.312G>A),均存在3种基因型,经最小二乘拟合线性模型分析,c.240G>A位点的3种基因型(GG、AG和AA)个体间平均毛纤维直径、卷曲度、毛长、污毛量、密度、净毛率和细度离散系数差异不显著(P>0.05);c.312G>A位点的3种基因型(GG、AG和AA)个体间的毛纤维直径、卷曲度、毛长、污毛量、密度、净毛率等性状差异不显著(P>0.05),但GG基因型与AA基因型间毛平均细度离散系数显著小于AG基因型(P<0.05)。因此KAP1.3基因可作为绵羊毛细度离散系数的候选基因之一,其生物学功能有待于进一步研究。
- 冯静宋天增杨华杨剑波石国庆马金英陈晓英杨永林
- 荷斯坦公牛PRNP多态性与精子活力相关性及抗病性评估被引量：1
- 2011年
- 为分析荷斯坦公牛朊蛋白基因(PRNP)多态性与精子活力的关系,并对其抗病性进行评估,选育抗病公牛,本实验以公牛精液为样品,研究PRNP基因中12 bp、23 bp和24 bp 3个片段的插入/缺失多样性、基因mRNA转录水平及其与精子活力等指标的关系。结果表明,12 bp和23 bp在群体中均得到3种基因型,24 bp只有2种基因型。不同基因型群体的mRNA转录水平存在显著差异,而基因型与精液产量和活力等指标存在相关性,抗病力和精子活力指标存在负相关。本研究中3个片段的插入-缺失多样性可以作为公牛选育的辅助标记。
- 李杰张淑二刘怡孝石国庆管峰
- 关键词：荷斯坦公牛PRNP多样性精子活力
- 用注射器直接对睾丸打点注射EGFP生产转基因兔的试验研究被引量：2
- 2010年
- 为探讨直接用1 mL注射器对睾丸打点注射pIRES2-EGFP建立操作方便、效率高、成本低、可批量生产转基因兔的可行性。选择4只成年新西兰雄兔,双侧睾丸内分别打点注射0.5～0.8 mg/mL浓度的质粒0.25 mL,第3周和第8周分别取4^#和3^#雄兔睾丸做冰冻切片,置荧光显微镜下观察是否发绿色荧光。其它雄兔于第3周开始参与配种,最后采新生仔兔耳组织提取其基因组进行PCR和Southern杂交检测阳性率。结果表明,雄兔睾丸冰冻切片于荧光显微镜下可见绿色荧光,PCR和Southern杂交检测表明在睾丸注射后的第6周和第7周进行配种所得后代阳性率最高。不同雄兔后代经PCR和Southern杂交检测平均阳性率存在差异（P〈0.05）,2^#雄兔后代平均阳性率达到56.46%,3^#雄兔的最低达36.96%的阳性率。表明用注射器直接对睾丸打点注射外源基因生产转基因的方法操作简便、高效,为大规模制备一些大型家畜的转基因后代奠定了基础。
- 宋天增冯静曾宪垠杨剑波杨华皮文辉张红琳贾斌赵宗胜郭延华石国庆
- 关键词：转基因兔转基因
- 湖羊PRNP多样性及其对产羔数影响和抗痒病风险评价
- 本研究通过分析湖羊PRNP多样性及其对产羔数的影响，并对其抗病力进行评估，旨在为湖羊的抗病选育提供参考。
- 朱庆丰刁俊超潘磊刘怡孝石国庆管峰
- 关键词：抗病育种朊蛋白基因繁殖性能
- 组织特异RNAi转基因小鼠模型的构建被引量：2
- 2011年
- RNAi是一种行之有效的基因沉默的新方法,被广泛地应用于基因功能的研究、疾病的治疗以及新型疫苗的研制等领域.本研究通过原核显微注射干扰载体的方法制备转基因小鼠.选用皮肤组织特异表达的人源角蛋白14(K14)基因启动子(2000bp)作为表达载体启动子,成功地驱动融合表达载体EGFP-shRNA进行干扰片段前体的转录,进而生成成熟的干扰片段,靶向小鼠BMP4基因使其发生沉默.所得到的转基因小鼠及其杂交后代经PCR和Southern杂交鉴定,结果表明外源基因准确无误地整合到小鼠基因组.Northern杂交结果证明,小干扰RNA在皮肤组织中有较高水平的表达,在肺和肠组织中有较低水平的表达.研究结果表明,利用PolⅡ型(K14)启动子驱动shRNA融合转录本的表达,在特定组织高表达siRNA,从而达到抑制特定组织目的基因表达的技术路线是可行的.同时为利用K14启动子进行毛囊相关基因干扰研究积累了基础数据,为制备组织特异抑制基因表达的转基因大家畜提供了一个参考方法.
- 代蓉沈思军甘尚权毛青青万鹏程郭洪孟庆勇刘守仁
- 关键词：RNAI转基因小鼠模型
