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湖北省科技攻关计划(2007AA301844)
作品数:
1
被引量:3
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陈美
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2009
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FTY720诱导大鼠系膜细胞的凋亡
被引量:3
2009年
目的观察新型免疫抑制剂FTY720对体外培养的正常大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的促凋亡作用及其对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响,以探讨其作用机制。方法体外培养大鼠GMC,加入20μmol/LFTY720,分别作用6h、12h、24h、48h后,以MTT法检测GMC增殖情况;流式细胞术检测GMC凋亡;Hoechst33258和PI染色观察凋亡细胞形态变化;琼脂糖DNA凝胶电泳法观察凋亡细胞核小体DNA的断裂现象。并通过SuperArray实时定量PCR细胞周期基因芯片测定FTY720对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响。结果加入FTY720培养6h后,流式细胞术检测发现,GMC出现典型细胞凋亡的亚二倍体峰;12h后Hoechst33258和PI荧光染色观察发现亮蓝色的凋亡小体,且开始出现典型细胞凋亡形态改变;24h后DNA琼脂糖凝胶电泳可见凋亡梯度的出现。随FTY720作用时间延长,细胞凋亡明显增加,不同时间组间细胞凋亡率差异有统计学意义(P〈0.01)。SuperArray实时定量PCR细胞周期基因芯片发现FTY720分别显著上调系膜细胞Dnajc2、LOC688900、RGD1562436_predicted基因表达,分别达41.6、38和16倍。结论FTY720在体外可呈时间依赖诱导正常大鼠GMC凋亡,其机制与影响细胞周期调节蛋白及凋亡相关基因的表达有关。
陈美
江警予
张瑜
王奕
郝燕
周建华
关键词:
细胞增殖
细胞周期蛋白类
系膜细胞
寡核苷酸序列分析
FTY720
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