河北省自然科学基金(C2011202112)
- 作品数:8 被引量:18H指数:2
- 相关作者:金红星成文玉周亚欣张舟杨希寅更多>>
- 相关机构:河北工业大学更多>>
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- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 提取明串珠菌质粒方法的优化被引量:1
- 2013年
- 明串珠菌的基因操作在食品发酵工业和改善食品产品研发中具有很多潜在的应用价值。明串珠菌质粒可以构建成为乳酸细菌的载体。采用普通的方法提取明串珠菌质粒效果不佳,因此以O'sullivan的方法为基础,对提取明串珠菌质粒的流程进行了优化。结果表明,采用6mL菌液和分别为800,1600,1200μL的3种提取液,用STE去除杂质,用试剂盒离心柱纯化,从而获得的质粒DNA的量较大,纯度较高。
- 金红星成文玉周亚欣
- 关键词:明串珠菌质粒
- 魏斯氏菌质粒的初步研究
- 为了探讨魏斯氏菌在辣白菜中起的作用和获得与明串珠菌相关乳酸细菌的质粒,从辣白菜中分离了魏斯氏菌。辣白菜是朝鲜民族的传统食品,在低温下大白菜经过乳酸细菌发酵而成的。辣白菜进行二段发酵,首先将洗净的大白菜用盐水浸泡,然后腌渍...
- 金红星
- 关键词:辣白菜质粒
- 文献传递
- 牛乳中添加不同果汁对明串珠菌发酵产双乙酰的影响被引量:1
- 2013年
- 双乙酰是一种对发酵乳口感有较大影响的风味化合物,但目前市售的发酵乳制品双乙酰含量都比较低.为提高乳制品中双乙酰的含量,改善风味乳制品的口感和品质,本研究以牛乳为原料,分别加入不同配比的苹果、小西红柿、西瓜、草莓和菠萝汁,并添加0.2%柠檬酸进行明串珠菌发酵,测定了发酵液中双乙酰的含量.结果表明,牛乳中加入5种果汁发酵明串珠菌,都能产生双乙酰;产双乙酰最高的是菠萝汁,可达到20mg/L;其次是草莓汁,达到12.45 mg/L;牛乳-西瓜汁混合液双乙酰最高可达到4.83 mg/L;牛乳-苹果汁和牛乳-小西红柿汁两种混合液双乙酰的产量较低.
- 李自强成文玉金红星
- 关键词:明串珠菌牛乳果汁发酵双乙酰
- 肠膜明串珠菌基因失活体系的建立
- 2014年
- 构建肠膜明串珠菌的基因失活体系。四环素抗性基因表达盒连接到pTA2 T载体上,在T载体的左右多克隆位点上分别定向插入ack(乙酸激酶)的上、下游同源臂,构建成自杀性同源重组载体,转化明串珠菌,使染色体的ack失活,得到突变型。检测突变型产乙酸的量并利用PCR验证ack失活。与原始菌株相比,突变型的乙酸产量减少49.1%;突变型的ack PCR扩增产物比原始菌株的大1200 bp左右。成功地使ack基因失活,说明肠膜明串珠菌基因失活体系的构建成功。
- 莒晓艳张舟成文玉金红星
- 关键词:明串珠菌基因失活同源重组
- 明串珠菌的稳定高效电转化被引量:2
- 2014年
- 明串珠菌电转化的再现性差、效率稍低,因此重新优化了电转化方法。以pCW4为载体,明串珠菌为受体菌,固定接菌量和氨苄浓度,优化了PBS溶液的pH值、LiAc-DTT孵育时间、溶菌酶的量和孵育液中蔗糖浓度。利用MRS(含质量浓度0.48 mg·L-1氨苄)培养明串珠菌(初始OD600为0.048),OD600为0.5左右时收集菌体,用LiAc-DTT溶液(含100 U·mL-1溶菌酶、浓度0.5 mol·L-1蔗糖)孵育20 min,再用pH值为6.9的PBS洗涤和电转化,得到较高的转化率,为2.47×105μg-1DNA。
- 张舟成文玉金红星
- 关键词:明串珠菌电转化稳定性
- 辣白菜中分离含内源性质粒的魏斯氏菌及其鉴定被引量:10
- 2012年
- 为了探讨魏斯氏菌在辣白菜中起的作用和获得与明串珠菌相关乳酸细菌的质粒,从辣白菜中分离了魏斯氏菌。辣白菜是朝鲜民族的传统食品,在低温条件下大白菜经过乳酸细菌发酵而成的。将辣白菜汁液均匀涂布在含2%(m/v)CaCO3的MRS平板上,30℃恒温培养箱中培养24h~36h,在中国内地首次分离获得了魏斯氏菌。通过对该菌进行镜检、生理生化特性检测以及16S rDNA序列的系统发育树分析确定其分类地位。结果表明其属于Weissella cibaria,命名为kimshi006,在NCBI上的登录号为HM369807。这一魏斯氏菌菌株含有2条内源性质粒,其大小分别为大约3000bp和8000bp。
- 金红星杨希寅成文玉
- 关键词:辣白菜
- 明串珠菌的碳代谢调控研究进展被引量:2
- 2012年
- 明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有它的应用,因此近年来在内地对其的研究开始活跃。为明串珠菌的碳代谢调控研究提供第一手资料,该文综述了明串珠菌的碳代谢途径、发酵调控和基因表达调控。
- 成文玉金红星金正焕
- 关键词:明串珠菌碳代谢
- 明串珠菌电转化的优化被引量:2
- 2013年
- 为了构建食品级基因工程受体菌,课题对明串珠菌的电转化条件进行了优化。以大肠杆菌-明串珠菌穿梭质粒pCW4为载体,以明串珠菌为受体,文章优化了细胞壁处理方式、电击参数、复苏时间等与电转化相关的因素。结果表明:用氨苄浓度0.7μg/mL的MRS培养基培养明串珠菌至OD600为0.5左右,以PBS作缓冲液,收获制成感受态细胞,与1μg DNA混合,在电场强度12kV/cm、电阻200Ω、电容25μF下电击转化,以含80mmol/L MgCl2的MRS培养基复苏培养3h,得到最高的转化效率为1.75×105 cfu/μg DNA。
- 金红星周亚欣成文玉
- 关键词:明串珠菌电转化
- 明串珠菌发酵产甘露醇的研究进展被引量:6
- 2012年
- 明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有其的应用,因此近年来在内地对其的研究开始活跃。明串珠菌的发酵产甘露醇实现大规模工业化的潜力非常大,因此主要论述了明串珠菌的甘露醇转化及相关代谢、发酵产甘露醇的研究。
- 金红星成文玉
- 关键词:明串珠菌甘露醇发酵