国家自然科学基金(30872280)
- 作品数：10 被引量：25H指数：3
- 相关作者：许爱娥关翠萍洪为松周妙妮林福全更多>>
- 相关机构：杭州市第三人民医院安徽医科大学浙江理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 用于黑素细胞培养和移植的壳聚糖/明胶复合交联膜的制备与表征被引量：3
- 2012年
- 利用生物相容膜材料培养黑素细胞可用于白癜风移植治疗并提高移植成功率。本文通过物理交联方法制备了厚度约50微米的壳聚糖/明胶复合交联膜(CCGM),对CCGM的物理、机械性能及其用于黑素细胞的培养进行了研究。研究表明CCGM具有较高的吸水率和良好的水蒸气透过率,符合伤口敷料的要求。动态机械性能和拉伸实验结果显示该交联复合膜有良好的湿强度,能满足细胞培养、转移和移植的使用要求。此外,CCGM支持黑素细胞的生长和增殖,有望用于白癜风的移植治疗。
- 许思原王文俊董东傅丽芳许爱娥
- 关键词：交联壳聚糖明胶复合膜黑素细胞
- 外用1％吡美莫司乳膏治疗白癜风临床疗效观察被引量：3
- 2010年
- 白癜风是一种常见的色素脱失性疾病，临床治疗手段不一，但仍没有一种有效的治愈方法。吡美莫司是一种新型的外用免疫抑制剂，有文献表明，其治疗白癜风的疗效显著^[1]。我们于2008年8月至2009年3月采用1％吡美莫司乳膏治疗49例白癜风患者，治疗情况报道如下。
- 罗显雁许爱娥李金超
- 关键词：吡美莫司白癜风乳膏外用色素脱失性疾病
- 自体表皮移植治疗白癜风疗效评价及相关因素分析被引量：10
- 2009年
- 目的评估自体表皮移植治疗白癜风的长期疗效及其相关影响因素。方法通过问卷调查、电话随访、临床复诊的方式，观察负压吸疱自体表皮移植治疗白癜风的长期疗效，并分析其与移植后时间的长短、是否联合照射窄波UVB、以及与患者性别、年龄、治疗部位和是否伴发供皮区同形反应的相关性。结果接受自体表皮移植资料完整的白癜风患者310例，病期稳定至少半年以上，男161例，女149例，平均年龄（26．69±11．76）岁。局限型98例，节段型123例，散在型62例，泛发型27例。共移植皮片1266片，随访1～5年后发现，痊愈815片，显效167片，好转117片，无效167片，治愈率64．38％，总有效率86．81％。另外，发现移植处色素沉着过度76例，占24．52％；色素减退66例，占21．29％，供皮区色素沉着过度34例，占10．97％，移植部位复发30例，占9．677％；其他部位新发12例，占3．871％，供皮区发生同形反应25例，占8．064％。对可能影响疗效的相关因素分析显示，自体表皮移植治疗白癜风后2年内尚稳定，随着时间的延长，疗效稍降低；活动较少、容易固定的部位疗效较好，其中腿部和手臂的效果最好，手足部、胸背部、面颈部次之，腰腹部效果最差（P〈0．01）。术后窄波UVB照射可以促进皮肤色素生成，供皮区发生同形反应对移植后疗效有一定影响（P〈0．05），移植疗效与性别及年龄无关（P〉0．05）。结论白体表皮移植治疗白癜风的长期疗效较好，移植部位是影响疗效的主要因素。
- 金永红许爱娥
- 关键词：白癜风皮肤移植
- 三种表达肽检测进展期白癜风患者血清酪氨酸酶抗体的比较被引量：3
- 2009年
- 目的应用三种表达肽TYR240—300，TYR240—479和TYR检测进展期白癜风患者血清酪氨酸酶IgG抗体，比较三者的抗体检测差异，筛选优势抗原。方法原核表达、纯化三种表达肽TYR240—300，TYR240—479和TYR，Western印迹鉴定纯化蛋白；以纯化的三种表达肽作为抗原，以提取的黑素细胞总蛋白作为阻断抗原，进行阻断ELISA分析；以纯化的三种表达肽作为抗原，检测100例进展期白癜风患者血清中酪氨酸酶IgG抗体，比较三种表达肽的抗体检测阳性率及滴度差异。结果三种表达肽均能被天然的黑素细胞抗原所阻断，100例进展期白癜风患者血清中，抗TYR240—300IgG抗体与抗TYR240—479IgG抗体阳性率分别为32．0％和62．0％，不同型别患者两种抗体检出阳性率差异较大，泛发性（8例）分别为4例和7例，局限性（8例）分别为3例和4例，散在性（48例）分别为31．3％和60．4％，肢端性（19例）分别为20．0％和52．6％，节段型（17例）分别为47．1％和82．4％。40例进展期白癜风患者血清中抗TYR240—479IgG抗体与抗TYRIgG抗体的阳性率相近，分别为62．5％和60．0％。表达肽TYR240—479和TYR检测的进展期白癜风患者血清中IgG抗体最高滴度均为1：320，而表达肽TYR240—300检测的进展期白癜风患者血清中IgG抗体最高滴度均为1：160。结论TYR240—479是用于白癜风患者中酪氨酸酶抗体检测的优势抗原。
- 关翠萍陈斐斐周妙妮洪为松尉晓冬许爱娥
- 关键词：白癜风一元酚单氧酶免疫显性表位
- PI3K／Akt／mTOR信号通路与皮肤肿瘤靶向治疗被引量：3
- 2009年
- PI3K／Akt／mTOR信号转导通路是促存活通路，在很多肿瘤中组成性激活。该通路激活的机制是肿瘤抑制基因PTEN功能缺失、PI3K扩增或突变、Akt扩增或突变。近年研究发现，该通路失常可促进肿瘤细胞的存活和生长，持续活化在皮肤肿瘤发病中起着重要的作用，已经发现抑制该通路中的信号分子可以治疗多种肿瘤，目前，针对该通路的抑制药物也在研究中，主要集中于mTOR抑制剂。
- 李金超许爱娥
- 关键词：PI3K/AKT/MTOR皮肤肿瘤
- InnVit／FBXO11在白癜风中的表达及其对酪氨酸酶输出内质网的影响被引量：1
- 2010年
- 目的通过检测InnVit（即FBXO11）在白癜风患者中的表达及其对内质网形态和酪氨酸酶输出内质网的影响，探讨InnVit基因对黑素细胞功能的影响。方法收集10例表皮片移植白癜风患者皮损区与正常供皮区组织，免疫组化检测InnVit蛋白的表达情况。化学合成InnVit基因特异性siRNA片段及构建过表达质粒载体P3XF-P120，npofectamine^TM 2000脂质体方法转染B10Br细胞，电镜观察不同处理组细胞的内质网形态变化；激光共聚焦显微镜观察酪氨酸酶蛋白及钙网蛋白在内质网中的共定位情况；Western印迹检测转染细胞中InnVit蛋白、酪氨酸酶及钙网蛋白的表达水平。结果10例白癜风患者皮损区InnVit蛋白表达明显低于正常供皮区。未处理组与质粒转染组的黑素细胞内质网形态正常，而siRNA转染组的细胞内质网有明显膨胀，且其相对膨胀率（1．97±0．48）与未处理组（1．28±0．09，P=0．001）和质粒转染组间（1．24±0．13，P=0．001）比较，差异均有统计学意义。未处理组与质粒转染组细胞中酪氨酸酶的表达范围部分地超出了钙网蛋白的标记范围，而siRNA转染组细胞中酪氨酸酶几乎与钙网蛋白共定位于内质网中。siRNA转染组InnVit蛋白的相对表达量（0．030±0．004）低于未处理组（0．320±0．020）和质粒转染组（0．710±0．040），质粒转染组高于未处理组（均P〈0．01）；钙网蛋白3组间差异无统计学意义（P〉0．05）；siRNA转染组酪氨酸酶（1．040±0．060）高于质粒转染组（0．720±0．030）和未处理组（0．350±0．030），质粒转染组高于未处理组（均P〈0．01）。结论白癜风患者皮损区InnVit蛋白表达下降；InnVit基因的表达影响了黑素细胞内质网的形态，并可以调控酪氨酸酶在内质网中的输出，进而影响黑素细胞的功能。
- 关翠萍林福全洪为松傅丽芳周妙妮许文许爱娥
- 关键词：白癜风一元酚单氧酶内质网
- Akt/mTOR活化抗UVB诱导HaCaT细胞凋亡的研究被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨Akt/mTOR信号通路活化抗中波紫外线（UVB）诱导的HaCaT细胞凋亡.方法 UVB照射角质形成细胞,Western印迹检测Akt/mTOR通路中相关信号分子的动态水平变化.免疫荧光Hoechst 33342染色观察HaCaT细胞凋亡率.结果 UVB能活化Akt/mTOR信号通路,并在一定范围内（5～30 mJ/cm2）成剂量依赖性,在一定范围内（5～30 min）成时间依赖性.EGFR抑制剂PD 153035、PI3K抑制剂LY 294002和mTOR抑制剂雷帕霉素能显著抑制UVB对Akt/mnTOR信号通路的活化作用.UVB照射前加入雷帕霉素、LY 294002预处理,HaCaT细胞凋亡率增加.结论 Akt/mTOR活化抗UVB诱导的HaCaT细胞凋亡.
- 李金超许爱娥宋秀祖关翠萍洪为松
- 关键词：紫外线AKT/MTOR信号传导细胞凋亡
- 蛋白激酶B和丝裂原活化蛋白激酶在烟酸保护的HaCaT细胞抵抗中波紫外线损伤中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨烟酸保护由UVB诱导的角质形成细胞损伤的胞内信号传导分子机制。方法UVB照射和烟酸处理HaCaT细胞，TUNEL法检测细胞凋亡，Western印迹检测蛋白激酶B（Akt）／丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路相关蛋白Akt、P38、JNK、ERK1／2的磷酸化水平变化。ELISA检测细胞分泌内皮素1（ET-1）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的水平。结果Western印迹结果表明，UVB照射和烟酸处理HaCaT细胞后，p-Akt、P—P38、p-JNK、P—ERK1／2蛋白在60rain内都显著激活（P〈0．01）。烟酸预处理后的HaCaT细胞再经UVB照射，可以发现p-Akt、P—P38、p-ERK1／2信号分子在2h内激活更显著（P〈0．01）。3个抑制剂加UVB照射组较3个单独抑制剂组ET-1、bFGF表达降低，差异均有统计学意义，其中LY294002组、SB203580组ET-1、bFGF水平最低；烟酸预保护的抑制剂处理组HaCaT细胞在UVB照射后，LY294002和U0126组没有出现ET-1、bFGF水平回升，SB203580组bFGF水平出现回升。结论Akt{~号分子在烟酸保护的HaCaT细胞抵抗UVB损伤中起一定的调控作用。
- 林福全许文关翠萍周妙妮洪为松刘东银许爱娥
- 关键词：尼克酸角质形成细胞紫外线丝裂原激活蛋白激酶
- 人黑素浓集素受体1抗原表位肽的表达、纯化及其在白癜风患者中的检测
- 2010年
- 目的 表达及纯化人黑素浓集素受体1抗原表位肽,探讨其在白癜风患者自身抗体检测中的应用.方法 人黑素浓集素受体1抗原表位肽编码基因合成后克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析和Western印迹鉴定目的 蛋白表达.以提取的黑素细胞膜蛋白作为阻断抗原,进行阻断ELISA分析.以目的 蛋白为抗原,检测100例进展期白癜风患者和30例正常人血清IgG抗体情况.结果 成功构建重组表达载体,重组蛋白成功表达并纯化,上样量低于0.0625μg时纯化率达100%.目的 蛋白与白癜风患者血清IgG抗体间的结合能被天然黑素细胞膜抗原抑制.100例进展期白癜风患者血清中有36例与目的蛋白结合反应呈阳性.结论 成功表达并纯化了人黑素浓集素受体1抗原表位肽,该目的蛋白能够结合白癜风患者血清中IgG抗体,可以用于抗人黑素浓集素受体1抗体的检测.
- 关翠萍周妙妮林福全许文洪为松傅丽芳许爱娥
- 关键词：白癜风
- InnVit基因对BIOBR细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响
- 2010年
- 目的分析InnVit基因的抑制和过表达对永生化黑素细胞株BIOBR细胞增殖、周期及凋亡的影响，探讨InnVit基因的生物学功能及其对白癜风中黑素细胞缺失的影响。方法化学合成InnVit基因特异性siRNA片段以及构建过表达质粒载体P3XF—P120，lipofectamineTM2000脂质体方法转染B10BR细胞。半定量RT—PCR法检测InnVit基因mRNA水平；Western印迹检测该蛋白水平变化；M．rr法测定细胞增殖情况；流式细胞技术分析细胞周期和凋亡的变化。结果InnVit基因抑制后mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组，InnVit基因过表达质粒组mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组；转染后24、48、72h抑制组的细胞存活量极显著下降（P〈0．01），过表达质粒组的细胞存活量在48和72h极显著增加（P〈0．01）。转染后48h基因抑制组的早期凋亡率从（10．24±1．00）％升至（37．34±3．26）％，过表达质粒组早期凋亡率从（14．58±1．49）％降至（8．43±0．86）％，与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；转染48h基因抑制组的G。期细胞南（56．11±5．46）％增至（69．76±6．08）％（P〈0．05），过表达质粒组的G．期细胞由（55．14±5．65）％降至（29．33±3．01）％（P〈0．01）。结论InnVit基因抑制使细胞增殖能力下降，促进细胞凋亡；InnVit基因的过表达增强了细胞的增殖能力，抑制细胞凋亡。其增殖能力的改变可能是通过细胞周期的调控调节的。
- 林福全关翠萍刘东银洪为松周妙妮许爱娥
- 关键词：白癜风细胞增殖细胞凋亡细胞周期细胞
