国家自然科学基金(81070042)
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 相关作者：王军刘杰王辰李晶国桓更多>>
- 相关机构：首都医科大学首都医科大学附属北京朝阳医院北京医院更多>>
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- 凝血酶对大鼠离体胸主动脉和肺动脉的收缩作用及其可能机制被引量：2
- 2011年
- 目的观察凝血酶对离体大鼠胸主动脉与肺动脉血管张力的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法采用Powerlab生物信号采集放大系统记录离体大鼠肺动脉与胸主动脉的张力信号,利用RT-PCR技术检测血管壁凝血酶受体的表达。结果凝血酶对离体大鼠肺动脉及胸主动脉具有明显的收缩作用,且该收缩作用与凝血酶受体-1激动剂的作用相似,不依赖于细胞外钙离子的存在。大鼠肺动脉及胸主动脉血管壁中均有凝血酶受体-1的表达。结论凝血酶对大鼠离体血管具有收缩作用并且可能是通过凝血酶受体-1而起作用,该作用不依赖于细胞外钙离子的存在。
- 张倩刘杰张知非林媛王军王军
- 关键词：凝血酶胸主动脉肺动脉血管收缩
- 瘦素与呼吸系统疾病发生发展的关系被引量：4
- 2013年
- 瘦素(leptin)是一种由脂肪组织肥胖基因编码的多肽激素,通过与其特异性受体结合,在中枢神经系统和周围组织发挥生物学效应。它的主要功能为抑制食欲、调节能量代谢、促进脂肪分解及降低体重。近年来研究发现瘦素除上述作用外,还参与了慢性阻塞性肺疾病、肺癌、哮喘等呼吸系统疾病的发生发展过程。因此,阐释瘦素与上述疾病的关系和可能机制,对疾病的防治和预后具有重要意义。本文综述了瘦素及其受体的分布、瘦素在肺组织中的生理作用以及瘦素与呼吸系统疾病发生发展关系的研究进展。
- 柴三葆王军唐朝枢
- 关键词：瘦素肺动脉高压慢性阻塞性肺疾病肺癌哮喘
- 大鼠不同级别肺动脉平滑肌细胞对血小板源性生长因子的反应性及其意义被引量：1
- 2014年
- 目的分离培养并鉴定大鼠不同分支级别肺动脉平滑肌细胞（PASMC），观察其对血小板源性生长因子（PDGF）反应性的差异，探讨相同刺激因素下，不同级别肺血管病理改变不同的细胞学机制。方法分离SD大鼠肺动脉并按解剖学分支分为3组：大动脉组，包括肺动脉干及肺内一级主干；中动脉组，指肺内主干二、三级分支；小动脉组，包括肺内动脉四级及以上分支。分离培养不同分支PASMC并用平滑肌细胞抗体进行免疫荧光染色鉴定。给予PDGF刺激，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性；Western blot方法测定增殖细胞核抗原表达水平变化以反映细胞增殖能力；伤口愈合实验检测细胞迁移能力的变化。结果不同分支PASMC在光学显微镜下观察无明显差别；免疫荧光染色结果显示，三种常用的平滑肌细胞标志物即平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、钙结合蛋白（S100A4）和平滑肌调宁蛋白（calponin）抗体染色均呈阳性，各组间荧光强度无明显差异。正常培养条件下3组细胞增殖率分别为（137．0±12．1）％、（166．1±23．6）％、（156．8±2．5）％，Western blot检测PCNA表达灰度值分别为（0．41±0．10）、（0．55±0．18）和（0．48±0．28），迁移到空白区域的细胞个数分别为（49±14）、（68±13）和（71±7），组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。给予10ug/L PDGF干预48h后，中、小动脉组PASMC的增殖率分别为（215．7±17．8）％、（195．2±6．6）％，均高于大动脉组[（167．0±14．4）％，均P〈0．01]，干预后3组细胞内PCNA蛋白表达灰度值分别为（0．93±0．11）、（1．21±0．14）和（0．62±0．03），迁移到空白区域的细胞个数分别为（194±46）、（171±16）和（68±21），中、小肺动脉组与大动脉组相比差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论尽管不同分支PASMC通常无明显差异，但
- 国桓杨汀王望刘杰孙然王军王辰
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子增殖迁移
- 雷帕霉素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨雷帕霉素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的干预作用。方法雄性SD大鼠采用抽签法随机分为3组:对照组、野百合碱组和雷帕霉素干预组。采用经颈外静脉右心导管插管术检测右心室收缩压;计算右心室肥厚指数;采用HE染色,观察肺细小动脉结构改变情况。结果与对照组相比,野百合碱组大鼠体质量明显减轻,右心室收缩压显著升高,右心室肥厚指数明显增加,肺动脉重构显著。与野百合碱组相比,雷帕霉素干预组大鼠虽然体质量显著减轻,但右心室收缩压明显改善;右心室肥厚指数显著降低;肺动脉重构程度明显减轻。结论雷帕霉素有效干预了野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压及肺血管重构的形成。提示雷帕霉素有可能作为临床上预防和治疗肺动脉高压的新药。
- 刘杰杜雨轩王望国桓王军王辰
- 关键词：雷帕霉素野百合碱肺动脉高压肺血管重构
- 西地那非抑制低氧对人肺动脉平滑肌细胞电压依赖性钾通道的下调作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨西地那非对低氧下调人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)电压依赖性钾通道(voltage-dependent potassium channels,Kv)的干预作用。方法应用膜片钳技术记录PASMCs K+电流;观察低氧刺激前后钾离子(K+)电流的变化以及西地那非(sildenafil)的干预作用;通过特异性Kv1.5抗体透析,分析西地那非作用于人PASMCs Kv分子靶点即通道亚单位;运用Real-time PCR及Western blotting技术检测低氧刺激前后及西地那非对人PASMCs上的Kv1.5通道基因转录水平和蛋白表达水平的影响。结果低氧明显抑制了人PASMCs细胞膜上的全细胞K+电流;而西地那非则可以对抗低氧对全细胞K+电流的抑制作用;而且西地那非对低氧下人PASMCs Kv的调控作用靶点主要是Kv1.5;同时西地那非部分恢复了低氧抑制的细胞上的Kv1.5 mRNA和蛋白表达。结论西地那非能够抑制低氧对人肺动脉平滑肌细胞电压依赖性钾通道功能与表达的下调作用。
- 毛婷王跃秀刘杰李晶王军
- 关键词：西地那非电压依赖性钾通道人肺动脉平滑肌细胞
- 小鼠急性肺血栓栓塞症模型的建立与比较被引量：4
- 2012年
- 目的通过评估不同方法诱导的肺血栓栓塞症小鼠模型效果,筛选建立操作简便、使用经济、成功率高的小鼠急性肺血栓栓塞症模型方法。方法制作全血血栓及白色血栓自体栓子,穿刺并注入小鼠右侧颈静脉,造成急性肺血栓栓塞症模型,分别于不同时间点检测相应生理、生化指标。结果经Mallory磷钨酸苏木精及HE染色证明,两种栓子制备肺血栓栓塞症模型的造模成功率为100%,栓子多处于肺动脉段及亚段水平,栓塞切实可靠;白色血栓栓塞组栓子较全血血栓组稳定性明显增高,自溶时间明显延长。结论白色血栓诱导的肺栓塞小鼠的病理状态更加稳定,且该急性肺血栓栓塞模型可以较好地模拟病理情况下这一疾病的病理、生理过程,为今后进一步研究肺血栓栓塞症的病理机制与筛选药物提供了一定的实验基础。
- 郑睿刘杰万钧姚建民徐洪涛
- 关键词：肺栓塞小鼠自体血栓
- 慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者肺血管平滑肌细胞膜电位的改变被引量：1
- 2011年
- 目的探讨分离培养的慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者肺血管平滑肌细胞的方法,观察其电生理学特性。方法分离慢性血栓栓塞性肺动脉高压(chronic thromboembolic pulmonary hypertension,CTEPH)患者内膜剥脱术后的肺组织标本(CTEPH患者组)和肺癌或肺大泡患者正常肺组织标本(正常对照组)的肺血管平滑肌细胞,并进行体外培养,用特异性抗体(smoothmuscle-α-actin,SM-α-actin)进行免疫荧光鉴定。膜片钳记录两组肺血管平滑肌细胞的静息膜电位和动作电位,分析比较两者的异同。结果①酶解法成功分离肺血管平滑肌细胞,经鉴定SM-α-actin阳性细胞达90%以上;②CTEPH患者组肺血管平滑肌细胞静息膜电位(-21.05 mV±2.20 mV,n=11)明显低于正常对照组(-38.12 mV±2.28 mV,n=10),细胞膜电位降低了约45%,处于明显去极化状态(P<0.001);③CTEPH患者组肺血管平滑肌细胞动作电位时程(action potential duration,APD):APD50(0.185 s±0.035 s),APD75(0.277 s±0.053 s),APD90(0.333 s±0.064 s)与正常对照组APD50(0.100 s±0.016 s),APD75(0.150 s±0.024 s),APD90(0.180 s±0.028 s)相比,均明显延长(P<0.05)。结论 CTEPH患者肺血管平滑肌细胞静息膜电位明显减小,动作电位时程延长,提示CTEPH患者肺血管平滑肌细胞存在明显的电生理学特性改变,该变化可能是细胞膜上电压依赖性钙离子通道激活、钙离子浓度增加、肺血管重构发生的重要因素。
- 李晶王辰刘杰李积凤刘岩顾松杨媛华翟振国甘辉立王军
- 关键词：慢性血栓栓塞性肺动脉高压膜片钳动作电位
- Bβ448野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 目的构建野生型(BβArg448)和突变型(BβLys448)纤维蛋白原稳定表达细胞系,为进一步研究BβArg448Lys基因多态性的病理生理学意义及相关蛋白功能研究提供实验基础。方法以含纤维蛋白原野生型Bβ链cDNA全长的表达载体pMLP-FGB(448G)为模板,采用PCR定点突变技术构建BβLys448表达载体,即突变型质粒pMLP-FGB(448A)。应用脂质体转染及药物加压筛选的方法,将纤维蛋白原Aα链、野生型/突变型Bβ链、γ链表达载体共同转染至CHO-K1细胞,RT-PCR检测各条链mRNA的表达。结果野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系在转录水平构建成功。结论野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞等在转录水平构建成功,为进一步体外研究BβArg448Lys所致纤维蛋白原的结构与功能异常奠定了基础。
- 林媛李积凤刘杰牛梦林孙然王军刘岩王辰
- 关键词：纤维蛋白原定点突变
- 电压依赖性钾离子通道在肺动脉高压发病过程中的作用被引量：1
- 2011年
- 肺动脉高压是一种肺血流受限引起肺血管阻力和压力持续性增高，最终导致右心衰竭甚至死亡的综合征。病理生理学改变主要为肺血管收缩、重塑及原位血栓形成。研究表明，钾离子通道尤其电压依赖性钾离子通道功能与表达水平的降低是引起肺血管平滑肌细胞增殖和凋亡异常、肺血管重塑的关键因素。本文着重论述近年来有关电压依赖性钾离子通道与肺动脉高压肺血管重塑发生相关机制的研究进展。
- 李晶王军
- 关键词：肺血管平滑肌细胞细胞增殖和凋亡肺血管重塑肺动脉高压
