山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2005BS02003)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：夏伟赵翠芬王荣王丽娟王玉玮更多>>
- 相关机构：山东大学山东省医药生物技术研究中心济南安康医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- ADM、ADT对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响
- 2010年
- 目的:研究肾上腺髓质素ADM和肾上腺加压素ADT对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法:原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC),加入不同浓度的ADM、ADT培养72小时,固定前3小时掺入Brdu(5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷),用免疫荧光染色,观察对培养的PASMC增殖的影响。结果:10-7ADM对PASMC增殖的抑制作用最强,10-7ADT对PASMC增殖的促进作用最强。
- 张磊张磊赵翠芬
- 关键词：BRDU
- ADM和ADT对肺动脉平滑肌细胞胶原合成及磷酸化ERK1/2表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:检测不同浓度的肾上腺髓质素(ADM)和肾上腺加压素(ADT)对培养的Wistar大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)表达的影响,探讨PASMCs增殖过程中ERK途径是否被激活。方法:取健康雄性Wistar大鼠,行大鼠远端PASMCs分离并进行原代培养,采用小鼠抗人平滑肌α-actin单克隆抗体对培养细胞进行鉴定;在培养基内分别加入10-7 mol/L ADM或ADT培养72h后加入兔抗大鼠Ⅰ型、Ⅲ型胶原抗体和兔抗大鼠p-ERK1/2抗体,0.01 mol/L PBS作阴性对照,FITC标记山羊抗兔IgG为Ⅱ抗,免疫荧光法观察PASMCs内Ⅰ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达。Western blotting检测10-7mol/L、10-8mol/L和10-9 mol/L ADM或ADT对p-ERK1/2蛋白表达的影响。结果:经平滑肌α-actin单克隆抗体对培养细胞进行鉴定,其纯度达97%。10-7 mol/L ADM可抑制PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2的表达(P<0.05,P<0.01);10-7 mol/L的ADT刺激后大鼠PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2的表达增强(P<0.05,P<0.01)。West-ern blotting结果显示ADM可呈剂量依赖性抑制p-ERK1/2蛋白表达(P<0.01,P<0.05);而ADT也可呈剂量依赖性促进p-ERK1/2蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:ADM可抑制大鼠PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达,而ADT可促进PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达,提示PASMCs增殖过程中ERK通路被激活,ADM和ADT可能通过ERK1/2信号通路来调节PASMCs增殖。
- 张磊赵翠芬李福海王荣夏伟
- 关键词：细胞外信号调节激酶类肺动脉平滑肌细胞胶原合成
- ADM和PAMP在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径研究
- 2010年
- 目的探讨来自同一前体的肾上腺髓质素(ADM)及肾上腺髓质素N末端20肽(PAMP)在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径。方法健康雄性Wistar大鼠21只,随机分为2组。将实验组(n=9)大鼠的左侧颈总动脉与颈外静脉用套管进行连接,对照组大鼠仅切开颈部皮肤分别分离颈总动脉和颈外静脉后缝合皮肤,不进行血管连接术。术后12周,经右心导管测取大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心室/(室间隔+左心室)(RV/(LV+SP))重量比、中等肺动脉壁厚度所占管径百分比(MT%)。免疫组化法和Western blotting测定ADM、PAMP在大鼠肺组织中的分布及其相对含量变化。RT-PCR法检测大鼠肺组织中ADM、应力活化蛋白激酶(SAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK1)基因表达量。结果实验组大鼠术后mPAP与对照组比较明显升高(P<0.001);RV/(LV+SP)和MT%比例明显增加(P<0.001和P<0.01)。免疫组化结果显示ADM和PAMP棕色颗粒主要分布于血管平滑肌层;累积光密度(OD)及Western blotting结果显示实验组大鼠肺内ADM及PAMP蛋白表达量增加。RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织ADM、SAPK、ERK1mRNA与对照组比较表达增强(P<0.01,P<0.001)。结论高肺血流肺动脉高压形成中存在来自同一前体的ADM与PAMP之间的分子内调控现象;丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路可能参与了高肺血流肺动脉高压形成过程。
- 王丽娟赵翠芬常萍夏伟王荣孙若鹏
- 关键词：肾上腺髓质素高肺血流肺动脉高压
- 肾上腺髓质素前体不同活性肽段在肺动脉高压大鼠肺内的变化被引量：4
- 2008年
- 目的:检测肾上腺髓质素前体不同活性肽段在左向右分流肺动脉高压中肺内的分布和变化,探讨左向右分流肺动脉高压的发病机制。方法:选择30只雄性Wistar大鼠,随机分为实验组(n=15),对照组(n=15)。用自制套管将实验组大鼠左侧颈外静脉和颈总动脉连接,术后8周测定大鼠肺动脉收缩压(sPAP,用右心室收缩压来代替)、右心室与(左心室+室间隔)重量比[RV/(LV+SP)]、肺组织中等血管中膜厚度占血管直径百分比(MT%)。免疫组化法测定肺组织ADM、ADT、PAMP的分布,RT-PCR法测定肺组织PAMP、ADM、ADT、proADM45-92mRNA的表达。结果:①实验组大鼠肺动脉压高于对照组(P<0.05)。②ADM与ADT在肺内的分布较一致,但是2者相对含量的变化却相反。PAMP在大鼠肺内的分布与前2者差异显著。③左向右分流大鼠肺组织ADMmRNA表达水平高于对照组(P<0.01),ADTmRNA表达低于对照组(P<0.01)。结论:肾上腺髓质素前体不同活性肽段在左向右分流肺动脉高压大鼠肺组织中的变化为其分子内调控学说提供了有力的证据。
- 赵翠芬王丽娟王志宇夏伟王玉玮王荣
- 关键词：肺动脉高压
