福建省卫生厅科研基金(97030)
- 作品数:3 被引量:21H指数:3
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- RT-PCR半定量法检测人脐静脉内皮细胞t-PA和PAI-1 mRNA表达被引量:8
- 1999年
- 目的 建立一种敏感的检测组织型纤溶酶原激活物 ( t- PA)及其抑制剂 ( PAI- 1)基因表达的方法。 方法 用异硫氰酸胍一步法提取细胞总 RNA,用单管 RT- PCR法逆转录 -扩增 t- PA、PAI- 1和内参照三磷酸甘油醛脱氢酶 ( GAPDH) m RNA,扩增产物经电泳分离后 ,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析 ,测定各条带分子量和光密度值。 结果 PCR产物均与预期长度相吻合 ,且PCR产物量与扩增初始模板量之间存在良好的量 -效关系。 结论 本实验建立的单管 RT- PCR半定量法是检测 t- PA、PAI- 1m RNA表达的有效手段 ,具有灵敏、快速、简便、可靠等优点。
- 黄春陈晓春蓝玉福
- 关键词:脐静脉内皮细胞T-PAPAI-1RT-PCR
- 血管紧张素Ⅱ对脐静脉内皮细胞分泌t-PA和PAI-1的影响被引量:3
- 2005年
- 目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对内皮细胞(EC)纤溶活性的影响。方法:用ELISA法测定人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养上清液中的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及1型纤溶酶原抑制剂(PAI-1)抗原,观察不同浓度AngⅡ对EC分泌t-PA,PAI-1抗原的影响。结果:不同浓度AngⅡ(0、10-10、10-9、10-8、10-7和10-6mol/L)与EC共孵育4 h,培养上清液中PAI-1抗原含量分别为(94.00±18.62)、(136.10±19.20)、(164.22±25.60)、(188.00±22.36)、(140.50±25.31)和(124.48±24.20)ng/3×105EC,t-PA抗原含量无明显变化;10-8mol/L AngⅡ与EC共孵育1-24 h,从2 h开始培养上清液中PAI-1抗原含量明显高于同时点的对照组,4 h组升幅最大(3.5倍)。结论:一定浓度的AngⅡ可刺激HUVEC分泌PAI-1抗原。
- 黄春陈晓春蓝玉福
- 关键词:PAI培养上清液HUVEC脐静脉内皮细胞
- MPTP诱导小鼠黑质神经元凋亡被引量:10
- 2001年
- 目的 探讨 1-甲基 - 4苯基 - 1,2 ,3,6 -四氢吡啶 (MPTP)的神经毒性及其作用机制。 方法 C5 7BL小鼠腹腔注射 MPTP,总量为 15 0 mg/kg,取中脑黑质 Nissl染色 ,TH免疫组织化学 ,TUNEL法和电镜观察黑质致密带的神经元改变。 结果 MPTP处理后 ,黑质致密带的存活神经元和 TH阳性神经元的数目明显减少 (P<0 .0 1) ,TUNEL结果表明黑质神经元出现明显的 DNA断裂的特征性凋亡改变 (P<0 .0 1) ,黑质致密带神经元的超微结构出现早期凋亡改变。 结论 C5 7BL小鼠腹腔注射 MPTP,可诱导黑质神经元凋亡 ,细胞凋亡是 MPTP的毒性作用方式之一。
- 陈滢陈晓春
- 关键词:苯基帕金森病神经元MPTP