天津市科技支撑计划重点项目(07ZCQYSFP0320)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:张文岚赵军韩瑞发洪泉傅耀文更多>>
- 相关机构:天津市泌尿外科研究所吉林大学第一医院空军总医院更多>>
- 发文基金:天津市卫生局科技基金天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- siRNA沉默E2F3基因对人膀胱癌细胞的增殖抑制作用被引量:2
- 2010年
- 目的:探讨siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌细胞(5637细胞)增殖的抑制作用,阐明E2F3基因沉默对5637细胞增殖抑制作用的生物学机制。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F3基因的寡核苷酸链,经BamHⅠ、HindⅢ双酶切克隆至pRNAT-U6.1/Neo系统,重组构建E2F3siRNA的RNAi质粒,以质粒转染DH5α菌株筛选得到稳定表达siRNA的细胞,转染5637细胞E2F3基因沉默,RT-PCR及Western blotting检测E2F3表达,流式细胞术检测5637细胞周期,采用Annexin-V/PS双染法检测细胞凋亡率。结果:RT-PCR及Western blotting检测干扰后5637细胞E2F3基因表达抑制,3条干扰序列对5637细胞周期抑制且G1期细胞比例增高,与阴性转染对照组比较差异有显著性(P<0.05和P<0.001);细胞凋亡率增加,与空白对照组及阴性转染对照组比较差异有显著性(P<0.001)。结论:siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌5637细胞具有明显增殖抑制和促进凋亡的作用。
- 洪泉张文岚赵军傅耀文胡海龙韩瑞发
- 关键词:RNA干扰小分子干扰E2F3膀胱肿瘤细胞增殖抑制