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拟杆菌属细菌的分子生物学鉴定被引量：1: 2007年; 目的用聚合酶链反应（PCR）技术鉴定拟杆菌.方法以该属细菌的标准16S Rrna基因序列为靶基因设计通用引物,对该属标准菌株及不同来源的临床株进行PCR扩增,然后对扩增产物进行基因测序验证引物的特异性和敏感性.结果设计的引物能扩增13株拟杆菌,而40株肠杆菌科细菌、本实验室分离和保存的其他非拟杆菌不能被扩增;13株拟杆菌所得的PCR产物经基因测序、比对相应标准菌的16S Rrna,同源性在81%～100%.结论建立的方法可特异的鉴定拟杆菌,敏感性为100个细菌的基因组.; 王国戗罗予; 关键词：RRNA

脆弱类杆菌荧光定量PCR法检测: 脆弱类杆菌是G-性无芽孢厌氧菌中最常见临床分离株,常规厌氧培养分离常需2-7天。近年来,国内外文献报道用荧光定量PCR技术、电泳图谱分析、序列分析等检测大肠埃希菌、葡萄球菌、肺炎链球菌、丙酸杆菌、双歧杆菌、类杆菌和芽孢杆...; 罗予卞广林; 关键词：类杆菌大肠埃希菌 PCR; 文献传递

两种方法制备标准品的荧光定量PCR法检测细菌结果分析被引量：2: 2007年; 目的目前细菌定量检测提取细菌基因组多采用裂解法,此方法在提取基因组过程中部分基因组丢失。荧光定量PCR定量检测细菌常采用纯化的PCR产物制备标准品,但用这种标准品制备标准曲线没有考虑基因组提取过程中基因组丢失问题,检测结果偏低。本研究使用细菌直接计数法制备标准品,力争减少提取基因组过程中部分基因组丢失造成的误差。方法脆弱类杆菌作为试验菌株,用细菌直接计数法和纯化PCR产物制备标准品,检测用细菌计数法获得的细菌基因组,用统计学软件分析两种方法得到的检测结果。结果用两种不同的标准品作荧光定量PCR检测1000个细菌基因组μL-1的标本,细菌计数法制作标准品测得的结果是763.8个细菌基因组μL-1,普通PCR产物制作标准品测得的结果是112.9个细菌基因组μL-1,统计软件SPSS10.0分析结果表明,使用两种不同的标准品,荧光定量PCR检测结果差别显著(p<0.05)。结论使用细菌直接计数法制备标准品比用PCR产物制备标准品作荧光定量PCR检测细菌标本的结果更接近实际结果。; 王国戗罗予; 关键词：荧光定量PCR 标准品

脆弱类杆菌荧光定量PCR法检测被引量：7: 2007年; 目的探讨荧光定量PCR技术检测脆弱类杆菌。方法用特异性引物和荧光染料实时PCR扩增并检测产物。结果脆弱类杆菌标准株(ATCC 25285)和4株分离株均有特异扩增曲线,灵敏度达102个菌;而大肠埃希菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌无特异扩增曲线。; 罗予卞广林; 关键词：脆弱类杆菌荧光定量PCR SYBR

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