国家自然科学基金(30872235) 作品数:8 被引量:74 H指数:3 相关作者: 周乙华 毕永春 潘金顺 庄辉 吴超 更多>> 相关机构: 南京大学医学院附属鼓楼医院 北京大学 南京市第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省医学重点人才培养基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体 被引量:3 2009年 目的:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽检测特异性IgM抗体。方法:采用戊型肝炎病毒主要免疫表位多肽,制备ELISA检测试剂,同时使用北京万泰生物药业公司生产的抗-HEV IgM抗体诊断试剂,分别检测33例戊型肝炎患者血清和344例普通人群血清抗-HEV IgM,并对部分阳性标本用免疫印迹法(Western blot,WB)确认。结果:用本室ELISA试剂检测33例戊型肝炎患者血清,抗-HEV IgM均阳性,符合率为100%;用万泰公司试剂检测阳性31例,符合率为93.9%。344例普通人血清中,本室试剂检测抗-HEV IgM阳性11例,而用万泰试剂检测仅其中6例显示阳性;对本室试剂阳性而万泰试剂阴性的5例进一步用WB检测,抗-HEV IgM均阳性。结论:本室制备的ELISA试剂可准确高效地检测血清抗-HEV IgM。 潘金顺 周镇先 毕永春 吴超 周乙华关键词:戊型肝炎 酶联免疫吸附测定 特异性IGM抗体 利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性 被引量:6 2009年 目的研究用戊型肝炎病毒4型(HEV-4)开放读码框架(ORF)2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性。方法用重组HEV-4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽(459—607位氨基酸)及其截短多肽(472~607位氨基酸)为抗原分别包被ELISA板,用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗.HEVIgM,并用免疫印迹法(Western blot,WB)确认,逆转录(RT).PCR检测HEVRNA加以比较。结果WB检测结果显示,戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV IgM仅与459—607多肽二聚体反应,而不与其单体及472~607多肽反应。间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗.HEV IgM均能与459~607多肽反应,而不与472~607多肽反应;69名健康人血清与2种多肽都不反应。117份可疑阳性血清中,5份能同时与2种多肽反应,但450nm吸光度(A450)值之差小于0.5。WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性;RT—PCR检测HEV RNA为阴性,说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性。结论ORF2 459~607多肽可有效检测抗-HEV IgM,根据血清与2种多肽反应的A450差异,能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性。 毕永春 潘金顺 庄辉 孙静 吴超 唐勤 周乙华关键词:戊型 免疫球蛋白M 病毒蛋白质类 假阳性反应 分娩及产后7个月~12个月母婴戊型肝炎病毒抗体的动态观察 被引量:3 2015年 目的调查江苏地区孕妇人群分娩时及产后7个月~12个月母婴戊型肝炎病毒(HEV)感染状况,并观察母源性抗-HEV Ig G抗体的胎盘通过以及在新生儿体内的衰减情况。方法纳入江苏省6个县市住院分娩的552例孕妇,采分娩时母血及脐血,并于产后平均为9.8个月(7个月~12个月)对母婴进行随访。采用ELISA法初筛血清抗-HEV Ig G和Ig M抗体,初筛阳性血清进一步采用Western blotting确认。结果所有孕妇抗-HEV Ig M均阴性,60例(10.9%)抗-HEV Ig G阳性。分娩时抗-HEV Ig G阳性的36例孕妇产后随访时仍阳性;分娩时抗-HEV Ig G阴性的212例孕妇产后随访时抗-HEV Ig M均阴性,3例(1.4%)抗-HEV Ig G转阳。60例抗-HEV Ig G阳性孕妇的新生儿脐血抗-HEV Ig G阳性57例(95.0%),33例产后随访均转为阴性。随访215例脐血抗-HEV Ig G阴性新生儿,抗-HEV Ig G及Ig M均阴性。结论江苏省孕妇人群抗-HEV Ig G血清流行率为10.9%,孕期新发感染极低。母源性抗-HEV Ig G抗体可高效通过胎盘,在10月龄前转阴。婴儿几乎不发生HEV感染。 周璇 徐飚 徐陈瑜 陈珊珊 周乙华 胡娅莉关键词:流行率 江苏地区孕中期孕妇抗-HEV阳性率及分娩后6年随访观察 被引量:3 2015年 目的调查江苏省孕妇人群戊型肝炎病毒(HEV)感染情况,并观察孕妇产后及其子女的血清学标志变化。方法纳入497例2002年8月~2004年7月采集血清的孕中期孕妇,并于2009年10月~2010年3月进行随访,同时对其子女随访。用重组4型HEV ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽及其截短多肽为包被抗原的ELISA法,初筛血清抗-HEV IgM和IgG,初筛阳性样本用Western blotting确认;RT-PCR检测血清HEV RNA。结果 497例孕中期孕妇平均年龄(25.0±3.0)岁,产后随访年龄(31.7±3.5)岁。孕中期抗-HEV IgM阳性3例(0.60%),抗-HEV IgG阳性55例(11.07%)。产后随访时分别有2例抗-HEV IgM和18例抗-HEV IgG由阳性转为阴性,另外各有2例抗-HEV IgM和18例抗-HEV IgG由阴性转为阳性,故产后随访时抗-HEV IgM阳性仍为3例(0.60%),抗-HEV IgG阳性仍为55例(11.07%),该人群6年累计抗-HEV IgG阳性73例(14.69%)。随访的497例儿童平均年龄(6.0±0.6)岁,抗-HEV IgM阳性1例(0.20%),抗-HEV IgG阳性2例(0.40%)。3例孕中期抗-HEV IgM和IgG同时阳性孕妇未发生妊娠或新生儿不良事件,随访时其子女抗-HEV IgM和IgG均为阴性;18例随访期间抗-HEV由阴性转为阳性母亲的子女抗-HEV均为阴性。抗-HEV IgM阳性血清均未检测到HEV RNA。结论与我国报道的普通人群抗-HEV IgG阳性率(20%~40%)相比,江苏地区孕妇HEV既往感染率较低。母亲与子女间发生家庭内病毒传播的可能性较小。 张乐 黄红玉 顾光煜 毕永春 胡娅莉 周乙华关键词:戊型肝炎病毒 流行率 孕妇 抗-HEV IgA在急性戊型肝炎诊断中的评价 被引量:4 2010年 目的:探讨检测血清戊型肝炎病毒(HEV)特异性IgA抗体(抗-HEV IgA)诊断急性HEV感染的意义。方法:采用4型HEV ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽及其截短多肽制备ELISA检测试剂,检测92例可疑急性戊型肝炎患者血清,203例合格献血员血清中的抗-HEV IgA,IgM和IgG,并对部分阳性标本用免疫印迹法确认。结果:在92例可疑急性戊型肝炎患者血清中,抗-HEV IgA的阳性率(91.3%)低于抗-HEV IgM的阳性率(96.7%),两者联合检测的阳性率为98.9%,抗-HEV IgG阳性率为100%。在203例合格献血员血清中,抗-HEV IgA的阳性率与抗-HEV IgM的阳性率相同(3%),两者联合检测的阳性率为4.4%,抗-HEV IgG阳性率为14.8%。有4例抗-HEV IgM阴性而抗-HEVIgA阳性标本,且经免疫印迹实验确认阳性。结论:抗-HEV IgA检测急性戊型肝炎的灵敏度不高于抗-HEV IgM,但可作为抗-HEV IgM的补充,同时检测抗-HEV IgA和抗-HEV IgM可以提高急性戊型肝炎诊断的灵敏度。 张乐 潘金顺 周锦勇 毕永春 周乙华关键词:戊型肝炎 抗-HEV IGA 抗-HEV IGM 免疫印迹法 2型糖尿病患者戊型肝炎病毒感染状况调查 被引量:3 2017年 目的调查2型糖尿病患者戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)感染状况,并分析糖尿病合并肝功能异常与HEV感染的关系。方法纳入住院治疗的2型糖尿病患者413例,其中病程小于6个月的新确诊病例78例。采用ELISA法初筛血清抗-HEV IgG和IgM抗体,阳性血清进一步采用Western blot法确认。结果男性230例,女性183例,平均年龄58.3±14.8岁(14~90岁)。抗-HEV IgG阳性145例(35.1%),男性与女性阳性率分别为35.2%和35.0%(P=0.959);抗-HEV IgG阳性率随年龄而升高,至40岁后稳定在35%左右。新确诊与非新确诊糖尿病患者抗-HEV IgG阳性率基本相同(35.9%和34.9%,P=0.871)。各项肝功能指标异常者与正常者的抗-HEV IgG阳性率相似,抗-HEV IgG阳性和阴性两组患者的肝功能异常率基本相同。此外,3例(0.7%)患者抗-HEV IgG和IgM同时阳性,均为非新确诊病例,肝功能正常。结论本组2型糖尿病患者抗-HEV IgG血清流行率为35.1%,近期感染率0.7%,为亚临床感染。本研究结果提示,糖尿病发病与HEV感染无关,抗-HEV IgG阳性对糖尿病患者的肝功能无不良影响。 程艳冬 黄红玉 陈姗姗 许碧云 毕艳 朱大龙 周乙华关键词:2型糖尿病 肝功能异常 戊型肝炎病毒 IGG抗体 IGM抗体 中国戊型肝炎流行病学研究进展 被引量:61 2010年 戊型肝炎(戊肝)既往称肠道传播的非甲非乙肝炎.1983年Balayan等用免疫电镜技术首次从实验感染的患者粪便中观察到病毒颗粒.1986-1988年新疆地区曾发生大规模流行,我国学者利用患者粪便中分离的病毒,建立了检测相应抗体的方法,但未能推广.1990年美国学者用分子克隆技术获得了该病原体全序列,并命名为戊肝病毒(hepatitis E virus,HEV).现将有关戊肝流行病学研究进展综述如下. 周乙华 庄辉关键词:戊型肝炎 流行病学 新型ELISA检测戊型肝炎病毒IgM抗体的敏感度与特异度评价 被引量:2 2014年 目的 评估基于戊型肝炎病毒(HEV)主要免疫表位多肽及其截短多肽的新型ELISA检测抗HEV IgM的敏感度与特异度.方法 根据抗HEV抗体与主要免疫表位多肽的高反应性以及与截短多肽的不反应性,分别以两种多肽为包被抗原,建立新型ELISA法,检测2007-2012年收集的612例可疑HEV感染者血清抗HEV IgM,并与万泰HEV IgM抗体诊断试剂盒检测结果比较,结果不一致血清用免疫印迹法(Western blotting)确认,χ^2检验比较两种试剂灵敏度和特异度.结果 抗HEV IgM检测中,新型ELISA阳性326例,阴性286例;万泰试剂阳性370例,阴性242例;两种试剂同时阳性320例,同时阴性236例.在万泰试剂阳性而新型ELISA阴性的50例中,Western blotting证实阳性21例,阴性29例;在万泰试剂阴性而新型ELISA阳性的6例中,Western blotting显示阳性与阴性各3例.以两种试剂同时阳性或Western blotting阳性为标准,万泰试剂与新型ELISA灵敏度分别为99.1%(95% CI:0.972-0.998)和93.8%(95% CI:0.907-0.961),差异有统计学意义(χ^2=13.988,P<0.001);特异度分别为89.2%(95% CI:0.847-0.925)和98.9%(95% CI:0.965-0.997),差异有统计学意义(χ^2=22.466,P<0.001).结论 与万泰试剂相比,新型ELISA检测抗HEV IgM敏感度略低,但特异度较好,可减少抗HEV IgM检测中的假阳性. 陈珊珊 毕永春 胡伟 潘金顺 冯振华 周乙华关键词:戊型肝炎病毒 抗-HEV IGM