河北省自然科学基金(C2006000438)
- 作品数：8 被引量：31H指数：4
- 相关作者：刘大群杨文香高士刚闫红飞陈云芳更多>>
- 相关机构：河北农业大学苏州出入境检验检疫局上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 小麦抗叶锈病近等基因系TcLr19的差异表达分析被引量：5
- 2011年
- 由小麦叶锈菌（Puccinia triticina）引起的小麦叶锈病是影响小麦生产的重要病害之一,利用抗病品种是控制小麦叶锈病的主要措施。研究不同抗叶锈病基因与小麦叶锈菌互作后基因表达的特异性,对于探明小麦抗叶锈病机制具有重要作用,同时为抗病基因的克隆及优秀抗病小麦品种的选育提供理论依据。cDNA-AFLP已经成为目前筛选差异表达基因最有效的方法之一。
- 陈玉婷陈云芳李淑凤高士刚闫红飞杨文香刘大群
- 关键词：抗叶锈病基因小麦叶锈菌差异表达分析近等基因系小麦叶锈病
- 紫外线诱导小麦叶锈菌突变体的选育
- ＜正＞由小麦叶锈菌（Puccinia triticina）引起的小麦叶锈病,是世界小麦生产上主要病害之一,也是影响我国小麦生产的重要因素,严重时可造成5％～15％,甚至更大的产量损失。利用抗病品种成为控制小麦叶锈病的经济...
- 鹿巍杨文香孟庆芳刘大群
- 文献传递
- 叶锈菌诱导的小麦叶片cDNA文库的构建及其质量评价被引量：6
- 2009年
- 由小麦叶锈菌(Puccinia triticina)引起的小麦叶锈病在世界各地产麦区均有发生,利用抗病品种是防治该病害最经济、安全、有效的方法。小麦抗叶锈基因Lr19是一个十分有效的抗叶锈基因,自1966年首次将该基因从长穗偃麦草转到普通小麦中,至今仍是一个应用潜力很大的抗病基因。本研究以小麦抗叶锈病近等基因系TcLr19和叶锈菌04-15-8①(生理小种类型THTS)为材料,构建叶锈病菌诱导的小麦叶片cDNA文库。研究结果表明文库的克隆数为4.1×106,插入片段大小在0.5～3.0kb,平均插入片段大小1.0kb。因此该文库可用于基因克隆与分析,为研究小麦抗叶锈病相关基因提供条件。
- 陈云芳杨文香刘大群
- 关键词：CDNA文库
- 小麦抗叶锈近等基因系TcLr38中NBS-LRR类抗病基因同源序列的分离
- ＜正＞目前从不同植物中已分离、克隆出的抗病基因,分别是针对不同的病原物,如细菌、真菌、病毒和线虫等,但它们编码的蛋白质氨基酸的序列在结构上存在一些保守的结构域, 其中以NBS-LRR类的抗病基因最多,这些抗病基因所编码的...
- 褚栋闫红飞杨文香陈云芳刘大群
- 文献传递
- 小麦抗叶锈病基因Lr38的SSR分子标记
- ＜正＞由小麦叶锈菌（Puccinia triticina）引起的小麦锈病是影响世界小麦稳产高产的重要病害之一,也是影响我国小麦生产的重要因素。利用包括DNA分子标记技术在内的多种分子生物学手段提高抗病基因和抗病类型的丰富...
- 闫红飞褚栋陈莹杨文香刘大群
- 文献传递
- 小麦叶锈菌与TcLr19非亲和互作cDNA文库的EST分析被引量：1
- 2010年
- 【目的】建立小麦叶锈菌与小麦非亲和互作的基因表达数据库,为从分子水平阐明小麦抗叶锈病机制奠定基础。【方法】对叶锈菌诱导的TcLr19小麦叶片cDNA文库随机测序,利用BLASTx对所得序列进行功能注释,按照Bevan的植物基因功能分类标准进行分类。采用RT-PCR技术,以Actin为参照,对2条信号转导相关基因和3条抗病与防御相关基因进行表达分析。【结果】随机对cDNA文库中756个阳性克隆测序,获得649条高质量EST。对EST序列聚类拼接获得472条非重复序列(Unisequence)。功能分类结果表明,25.2%为未知功能蛋白,21.0%与能量代谢基因相关,17.8%与抗病防御基因及信号转导基因相关,其余EST分别与转录、转运、蛋白代谢等功能基因相关。RT-PCR分析结果表明同一基因在叶锈菌侵染后不同时间点的小麦叶片中表达量不一致,且各基因有不同的表达模式。【结论】推测钙转运ATP酶,谷胱甘肽-S-转移酶,蛋白激酶Pti1,NBS-LRR抗病蛋白和分子伴侣DnaJ等参与了小麦与叶锈菌的非亲和互作过程。该cDNA文库可用于了解小麦与叶锈菌非亲和互作过程中的功能基因,为建立研究病原菌基因及小麦抗病基因数据库奠定基础。
- 陈玉婷陈云芳李淑凤杨文香刘大群
- 关键词：小麦叶锈菌CDNA文库表达序列标签
- 小麦抗叶锈近等基因系TcLr38的cDNA-AFLP分析被引量：4
- 2010年
- 【目的】分析经叶锈菌诱导小麦抗叶锈近等基因系TcLr38的基因表达情况,寻找与抗病基因表达相关的片段。【方法】应用cDNA-AFLP技术从mRNA表达水平研究TcLr38和感病对照Thatcher与小麦叶锈菌05-22-65(THTS)互作时基因表达的差异。【结果】76对引物组合检测到约3800条条带,平均每一对选择性引物可以获得50条条带,其中28对能够在小麦近等基因系TcLr38和感病对照Thatcher之间扩增出特异性条带。多态性条带划分为8种类型,其中3种类型可能与抗病基因相关。最终得到95条小麦抗叶锈近等基因系TcLr38的特异性表达的转录衍生片段(TDF),其中19条差异TDFs只在接种叶锈菌的TcLr38中出现,为上调表达,而8条差异TDFs为下调表达。对可能与抗病相关的特异TDFs中的21条片段进行序列测定与分析,经BLASTx比较,17个TDFs所推导的蛋白质序列在数据库中找到其所对应的同源序列,15个TDFs为已知功能的基因。【结论】通过对功能已知的基因分析,推测决定蛋白激酶C、ATP结合蛋白、类受体激酶、信号传导组氨酸激酶(HPK)、肽酶家族M23、Dnak抑制蛋白DksA、甲硫氨酸tRNA合成酶、RanGTP酶激活蛋白1、烯酰辅酶A水合酶的TDFs可能与抗病或防御过程相关。
- 王文霞褚栋高士刚闫红飞缑丽倩杨文香刘大群
- 关键词：小麦叶锈病LR38CDNA-AFLP
- 小麦抗叶锈近等基因系TcLr38 RGAs分析被引量：3
- 2009年
- 为获得Lr38的抗病类似物质,寻找与抗病基因表达相关的目的片段。根据已知植物抗病基因的NBS-LRR(核苷酸结合位点-富含亮氨酸重复)类保守区域设计简并引物,应用RGA技术在小麦的未知基因cDNA中扩增和分离抗病基因同源序列。从小麦抗叶锈近等基因系TcLr38中获得了9个小麦抗病基因同源片段D-8、A-5、B-20、C-6、F-16、A-4、B-9、C-4和D-12。经BLASTp分析,9个片段都含有NB-ARC保守结构域,其中D-8、A-5、B-20、C-6、A-4、B-9、C-4和D-12与已知抗病基因的相应区域相一致,具有抗病基因NBS特征结构域激酶2a(Kinase-2a)、激酶3a(Kinase-3a)和疏水结构域(HD)。片段D-8、A-5、B-20、C-6、A-4、B-9、C-4和D-12可能与抗病基因表达相关。
- 王文霞宋志强杨文香刘大群
- 关键词：小麦叶锈抗病基因同源序列
- 6个小麦抗叶锈病近等基因系的cDNA-AFLP差异表达分析被引量：4
- 2008年
- 应用cDNA-AFLP技术对小麦抗叶锈病近等基因系TcLr9、TcLr15、TcLr19、TcLr25、TcLr38、TcLr45和感病亲本Thatcher间的表达差异进行分析,共选用226对引物组合对其进行筛选,检测出7 554条条带,平均每对引物可获得33条扩增条带。筛选出68对引物能够在小麦抗叶锈病近等基因系TcLr9、TcLr15、TcLr19、TcLr25、TcLr38、TcLr45和感病亲本Thatcher之间扩增出特异表达条带,特异表达检出率为30.1%。68对引物共扩增出84条特异表达条带,并根据基因表达与否及表达量划分为9种不同的特异表达类型(I^IX)。其中,I、V和VII型特异表达类型为组成型表达,共49条;II、IV、VI和VIII型特异表达类型表达上调,共21条;III和IX型特异表达类型表达下调,共14条。有5种特异表达类型(IV、V、VI、VII、VIII型)可能与小麦的抗病反应相关,并且这5种特异表达类型又分为两类亚型,第一类亚型是小麦抗叶锈病近等基因系与小麦叶锈菌互作时特异表达(I V型)或者表达量明显增加(VI、VIII型),为诱导性特异表达类型;第二类亚型为组成型特异表达类型(V、VII型)。
- 高士刚闫红飞陈会娜杨文香刘大群
- 关键词：小麦叶锈近等基因系
- 小麦NBS-LRR类抗病基因同源cDNA序列的克隆与表达分析被引量：9
- 2013年
- 为获得小麦抗叶锈病相关基因,以小麦近等基因系TcLr19所构建的非亲和cDNA文库中获得的EST序列(Contig 914)为靶序列,用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增技术,分离克隆到片段为3 042bp的全长cDNA序列。序列分析表明该序列符合典型单子叶植物的CC-NBS-LRR结构模式,命名为TaNLR。该基因包含一个完整的2 739bp的开放阅读框(ORF),具有连续的Poly A尾和典型的加尾信号AATTAA。ProtParam程序预测表明该基因编码912个氨基酸。发育树分析显示该氨基酸序列与大麦的NBS-LRR类抗病基因蛋白同源性最高达89%。荧光定量PCR分析表明,在小麦与叶锈菌互作中,TaNLR基因受叶锈菌诱导下调表达。本研究在TcLr19小麦中成功获得了抗病同源基因,这为明确NBS-LRR在小麦抗叶锈病中的作用奠定了基础。
- 任晓娣刘彦慧李建嫄张娜彭巧慧杨文香刘大群
- 关键词：小麦
