陕西省科技攻关计划(2010ZDKG-50)
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
- 相关作者:黄辰宋土生郭波杨阳胡丽丽更多>>
- 相关机构:西安交通大学西安交通大学医学院第一附属医院山西中医学院更多>>
- 发文基金:陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- Hsa-miR-106a在胃癌组织中的表达及其临床意义被引量:4
- 2014年
- 目的分析hsa-miR-106a在胃癌组织中相对于正常组织的表达及其与病理分级及临床分期的关系。方法从石蜡组织包埋的19例胃癌及19例正常组织中提取总RNA,应用Real-time PCR方法检测miR-106a的表达情况,并分析其与胃癌病理分级及临床分期的关系。结果 miR-106a在胃癌组织中有14例高表达,5例低表达,在胃癌组织中的表达明显高于正常组织(P<0.01),其表达与胃癌的病理分级、临床分期密切相关。结论 miR-106a可能参与了胃癌的发生、发展过程。
- 郭波王文静赵凌宇常素娥童东东杨阳宋土生黄辰
- 关键词:微小RNA胃癌病理分级
- MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响被引量:2
- 2014年
- 目的构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变。结果测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖。结论成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖。
- 郭波王文静赵正豪赵凌宇汪鲁敏胡丽丽宋土生黄辰
- 关键词:胃癌细胞增殖
- miR-195表达载体构建及其对肝癌细胞株HepG2植瘤抑制效果的影响
- 2013年
- 目的研究miR-195对人肝癌细胞株HepG2肿瘤形成的影响。方法应用分子克隆技术构建miR-195表达载体;用脂质体转染以及克隆筛选技术,建立miR-195高表达HepG2细胞株,并通过测序及序列比对等进行鉴定;建立荷瘤小鼠模型,检测不同细胞系的肿瘤生长能力。结果通过测序及序列比对,证明miR-195表达载体构建成功;荧光显微镜观察结果显示,miR-195高表达HepG2细胞株成功构建,实时定量PCR鉴定结果表明,构建的miR-195高表达HepG2细胞株miR-195表达量为对照培养HepG2细胞株的2 000倍(P<0.01);植瘤实验证明,miR-195高表达可以抑制肿瘤的形成过程。结论作为抑癌的miRNA,miR-195有望成为肝癌基因治疗的效应分子。
- 胡晓岩姚嘉宜李梦鹤倪磊王爱英黄辰宋土生
- 关键词:HEPG2细胞株分子克隆技术转染肝癌基因治疗
- MiR-214表达载体的构建及其对肝癌细胞Hep3B增殖的影响
- 2015年
- 目的构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-214表达载体,并检测其对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。方法以人的基因组DNA为模板,利用PCR扩增miR-214前体序列,构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-214表达载体,序列比对及实时定量PCR验证miR-214表达载体是否构建成功,MTT实验检测miR-214对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。结果序列比对及实时定量PCR验证miR-214表达载体构建成功。将成功构建的miR-214表达载体导入肝癌细胞Hep3B,发现其对细胞增殖具有抑制作用。结论本研究成功构建miR-214表达载体并证明miR-214可能参与肝癌发展的过程。
- 杨阳常素娥胡丽丽高岭何康汪鲁敏童东东郭波蔡东晖宋土生黄辰
- 关键词:肝癌分子克隆技术
- HERG基因G572R突变体表达载体的构建及其稳定转染细胞系的建立被引量:1
- 2014年
- 目的构建HERG基因G572R突变体表达载体并建立其稳定转染HEK293的细胞系。方法应用重叠延伸PCR构建HERG-G572R突变体表达载体,经G418筛选稳定转染细胞系,通过Real-Time PCR,Western blot及测序鉴定稳定转染细胞系。结果经序列比对,证明HEK-HERG-G572R突变体表达载体构建成功,Real-Time PCR,Western blot及测序证明稳定转染细胞系构建成功。结论该方法可成功构建的HKE-HERG-G572R细胞株,为药物个体化治疗提供工具。
- 杨阳黄娜高岭常素娥郭波胡丽丽宋土生黄辰
- 关键词:HERG基因HEK293转染突变体