国家自然科学基金(21176229)
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 相关作者：毛多斌贾春晓魏涛黄申白冰更多>>
- 相关机构：郑州轻工业学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国烟草总公司科技项目郑州市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程理学更多>>
- α-胡萝卜素降解产香菌株的分离、鉴定及发酵条件优化被引量：12
- 2015年
- 采取稀释涂布平板法以及平板划线法从烟叶中分离得到1株高效降解α-胡萝卜素菌株ULI3,该菌株在含有α-胡萝卜素(15 mg/L)发酵培养基中进行培养,底物降解率达到89.74%,并且主要降解产物是5,6-环氧-β-紫罗兰酮(6.15%)、β-紫罗兰酮(5.1%)、二氢猕猴桃内酯(3.12%)等香味物质。根据形态特征和ITS系统进化树分析,初步鉴定菌株ULI3为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。在单因素实验基础上采用正交实验得出菌株ULI3发酵降解α-胡萝卜素最佳培养条件:蔗糖30 g/L,Na NO34 g/L,酵母粉3 g/L和初始p H值为8。采用该培养条件,α-胡萝卜素降解率达到97.13%。
- 贾蓓蕾魏涛黄申贾春晓杨靖张改红白冰毛多斌
- 关键词：香料物质降解率
- 超声萃取-气相色谱-质谱法测定烟叶中的葡萄糖四酯被引量：6
- 2013年
- 采用超声波辅助溶剂萃取技术和气相色谱-质谱（GC—MS）法，建立了烟叶中葡萄糖四酯（GTEs）类化合物的定性与定量分析方法。以甲醇为萃取溶剂，超声萃取条件经过响应面法（RSM）优化，在料液比1：28、温度32c（=时，超声萃取16min，所得萃取液经硅胶柱层析法分离并用N，O-双-三甲基三氟乙酰胺（BSTFA）-三甲基氯硅烷（TMCS）衍生后，用HP-5MS毛细管柱分离，电子轰击源质谱检测，以全扫描模式定性分析，选择离子扫描模式定量分析。各种烟叶中共鉴定出4种GTE，分别是6-O-乙酰基-2，3，4-三-O-（3-甲基-戊酰基）-吡喃葡萄糖、6-O-乙酰基-2，3，4-三-O-戊酰基-吡喃葡萄糖、6．O-乙酰基-2，3，4-三-O-（2-甲基-丁酰基）-吡喃葡萄糖和6．O-乙酰基-2，3，4-三-O-异戊酰基-吡喃葡萄糖；4种GTE平均回收率为86．2％～97．4％，相对标准偏差为1．3％～4．0％，检出限为1．72—2．93μg/L。方法可用于11种不同类型烟叶中GTE类化合物的测定。
- 贾春晓王瑞玲王莹莹毛多斌
- 关键词：烟叶超声萃取响应面法气相色谱-质谱
- 嗜热细菌莱廷格热袍菌TMO普鲁兰酶TMP在大肠杆菌中的原核表达与酶学性质被引量：2
- 2016年
- 利用PCR技术从嗜热细菌莱廷格热袍菌TMO中扩增得到普鲁兰酶TMP的基因(Tlet_1262),将该基因克隆至表达载体p ET15b,并经IPTG诱导在大肠杆菌BL21-Coden Plus(DE3)-RIL中实现可溶性表达。通过80℃热处理和镍柱亲和层析两步纯化,得到纯化重组酶。SDS-PAGE分析表明:该酶分子质量为97.0 ku。酶学性质研究表明,该酶最适反应温度90℃,最适p H 5.4。在最适反应温度90℃处理150 min,酶活力稳定在80%以上。普鲁兰酶TMP具有较强的耐酸性,在90℃高温和p H 5.0的酸性条件处理20 h,仍保持50%以上的活性。该酶对金属离子和变性剂SDS、尿素、Tween80和Trtion-X100具有一定抗性。还原剂DTT(0.5,5 mmol/L)对该酶活性具有明显激活作用,分别提高酶活18%和28%。在此基础上,利用重叠PCR构建普鲁兰酶TMP点突变体C501S、C649S和C704S。通过动力学分析,点突变体C649S催化普鲁兰糖和可溶性淀粉底物的效率(kcat/Km)相对于野生型分别提高37.8%和40.8%。由此推测C649位点可能与普鲁兰酶TMP催化功能密切相关。
- 魏涛迟雷余轩张建华刘坤毛多斌
- 关键词：普鲁兰酶克隆表达酶学性质
