浙江省重点科技创新团队项目(2011R09042-03)
- 作品数:4 被引量:23H指数:4
- 相关作者:丁兴红丁志山范永升胡金波谷恒存更多>>
- 相关机构:浙江中医药大学更多>>
- 发文基金:浙江省重点科技创新团队项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白的提取和鉴定表征被引量:11
- 2013年
- 该研究通过限制性胃蛋白酶酶解法提取蕲蛇中Ⅱ型胶原蛋白(type Ⅱ collagen,CⅡ),并采用离子交换色谱法对其进行纯化,所得蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳、紫外分光光度法、红外吸收光谱法和质谱法进行表征鉴定,结果显示,蕲蛇CⅡ相对分子质量约为130 kDa,其紫外吸收峰约为223 nm;红外图谱中在1 200~1 450 cm-1具有特征吸收,表明蕲蛇CⅡ中有特征序列Gly-X-Y肽段,存在三股螺旋结构。通过对蕲蛇CⅡ与牛CⅡ进行蛋白质肽段质谱图分析对照后发现,两者具有相似肽段和CⅡ结构特征。以上鉴定表征结果证明采用酶解法提取蛋白为蕲蛇CⅡ,可为蕲蛇药材CⅡ的进一步药理研究提供实验基础。
- 谷恒存胡金波丁志山范永升丁兴红
- 关键词:蕲蛇胃蛋白酶
- HPLC法测定蕲蛇中核苷类成分的研究被引量:13
- 2011年
- [目的]探讨高效液相色谱法(HPLC)法测定蕲蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷的分析方法。[方法]采用HPLC法,色谱条件为Dionex C18(3μm,150 mm×4.6 mm),以0.05 mol.L-1磷酸氢二钾水溶液为流动相;检测波长为254 nm;流速为0.8 mL.min-1。[结果]尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷分别在0.0088~0.220μg、0.0352~0.880μg、0.0344~0.860μg、0.0176~0.440μg范围内具有良好线性关系;平均加样回收率分别为99.0%、98.6%、100.4%、103.0%;RSD分别为2.69%、2.25%、2.90%、2.88%。[结论]HPLC法可以测定蕲蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷含量,从而控制蕲蛇药材品质。
- 丁兴红
- 关键词:蕲蛇尿嘧啶黄嘌呤次黄嘌呤尿苷
- 人工饲养蕲蛇与野生蕲蛇中重金属元素及氨基酸含量的比较研究被引量:9
- 2012年
- 目的:对人工饲养蕲蛇与野生蕲蛇中重金属元素及氨基酸含量进行测定和比较分析研究。方法:采用原子吸收法对蕲蛇中Cu、Hg、Cd、Pb、As含量进行测定;全自动氨基酸分析仪测定蕲蛇中氨基酸含量并进行相关性分析。结果:人工饲养蕲蛇与野生蕲蛇中重金属元素含量为均低于《中国药典》2010版限定值。人工饲养蕲蛇与野生蕲蛇中的氨基酸含量丰富,种类构成完整,均含有17种人体所需要的氨基酸,两者氨基酸含量的相关系数r=0.9991。结论:人工饲养蕲蛇与野生蕲蛇氨基酸含量和组成相似,两者存在线性正相关关系,且蕲蛇中重金属含量符合《中国药典》2010版标准,人工饲养蕲蛇可以作为野生蕲蛇的优良替代品。
- 丁兴红丁志山范永升
- 关键词:蕲蛇重金属离子氨基酸
- 蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白对CIA大鼠的治疗作用被引量:10
- 2013年
- 目的:研究蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型大鼠的治疗作用,观察其治疗效果并探讨其作用机制。方法:90只Wistar大鼠除空白组外均采用牛CⅡ建立CIA模型并进行随机性分组,分为模型组、牛CⅡ组、蕲蛇水提液高、中、低剂量组、蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组,每组10只。造模后第11 d开始给药,期间采用容积法测量关节肿胀程度,连续给药20 d后观察大鼠踝关节病理改变并采用流式细胞术检测大鼠外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞亚群水平。结果:与模型组相比,蕲蛇高、中剂量组、蕲蛇CⅡ高、中剂量组和牛CⅡ组均能显著降低CIA大鼠右后足跖肿胀程度、CD4+T细胞水平,改善大鼠踝关节病理形态,其中蕲蛇CⅡ中剂量组和牛CⅡ组还能显著降低CD4+/CD8+比值(P<0.05)。结论:蕲蛇水提液及蕲蛇CⅡ提取物对CIA大鼠关节炎症均有一定的治疗作用,其治疗机理可能是通过主动免疫抑制降低机体亢进的免疫应答实现的。
- 谷恒存胡金波丁志山陈建真范永升丁兴红
- 关键词:蕲蛇类风湿关节炎T细胞亚群胶原诱导性关节炎