国家自然科学基金(81171491)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：宋智琦王楠高鹤丽骆铁波单路娟更多>>
- 相关机构：大连医科大学附属第一医院大连医科大学辽宁师范大学更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省教育厅课题基金更多>>
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- 谷氨酸信号通路在人外周血淋巴细胞活化及白癜风免疫发病机制中的作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨谷氨酸信号通路在人外周血淋巴细胞活化及白癜风免疫发病机制中的作用。方法流式细胞仪测定离子型谷氨酸受体NMDAR的非竞争性拮抗剂MK801对健康对照外周血淋巴细胞CD25表达及IFN-γ水平的影响；NMDAR的激动剂NMDA和拮抗剂MK801对淋巴细胞内活性氧簇水平的影响。实时定量PCR和流式细胞仪测定白癜风患者和健康对照外周血淋巴细胞中NMDAR亚型NMDAR1和NMDAR2A表达差异。免疫组化方法观察白癜风患者皮损和健康对照皮肤组织中NMDAR1和NM—DAR2A的表达。结果MK801组外周血淋巴细胞CD25表达（7．2±0．18）％较阴性对照组（16．02±0．42）％明显下降（P〈0．01）；MK801组淋巴细胞中CD25＋IFN-γ^＋比例（1．79±0．09）％较阴性对照组（0．78±0．06）％明显增高（P〈0．01）。NMDA组淋巴细胞内ROS水平（101．1±3．50）明显高于阴性对照组（69．80±2．08）（P〈0．01）。白癜风患者外周血淋巴细胞NMDARI的表达（3．85±2．17）较健康组（0．97±0．55）明显增高（P〈0．05）。结论谷氨酸信号通路对活化淋巴细胞的IFN-γ分泌及ROS水平的影响有可能是白癜风的免疫发病机制之一。
- 杨丽颖骆铁波单路娟刘越坚高鹤丽宋智琦
- 关键词：白癜风淋巴细胞谷氨酸信号传导
- 谷氨酸受体非竞争性拮抗剂及激动剂调节表皮细胞伪足形成及黑素小体转运的观察
- 2013年
- 目的探讨谷氨酸信号通路在黑素细胞及角质形成细胞伪足形成及黑素小体转运中的作用机制。方法原代培养并纯化黑素细胞、角质形成细胞，建立黑素细胞与角质形成细胞体外共培养体系。扫描电镜观察离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体非竞争性拮抗剂MK801及激动剂NMDA作用下黑素细胞、角质形成细胞的伪足形态变化，以311nm中波紫外线（UVB）照射为阳性对照。免疫荧光双染色激光共聚焦显微镜下观察MK801及NMDA对黑素小体转运的调节。结果扫描电镜观察发现，100μmol，LMK801作用24h后黑素细胞树突末端明显变细，树突变长，树突数量无明显变化而细胞表面的丝状伪足数量明显变少，且伪足长度变短；100μmol／LNMDA作用24h后黑素细胞树突的末端明显变宽、树突变短，树突数量无明显变化而细胞表面丝状伪足数量明显增多，丝状伪足长度增加。黑素细胞与角质形成细胞共培养体系中，未用药组黑素细胞与角质形成细胞间有丝状伪足相连接，黑素细胞的角质形成细胞侧丝状伪足数量多于对侧。100μmol／LMK801作用于共培养体系24h后，黑素细胞与角质形成细胞之间的丝状伪足数量及黑素细胞伸向角质形成细胞的丝状伪足数量减少；100μmol／LNMDA作用于共培养体系24h后，黑素细胞与角质形成细胞之间的丝状伪足数量及黑素细胞伸向角质形成细胞的丝状伪足数量增多。激光共聚焦显微镜观察显示，共培养体系下，未用药组角质形成细胞中存在黑素小体；100μmol／LMK801作用24h后角质形成细胞中的黑素小体数量减少；100μmol／LNMDA作用24h后角质形成细胞中的黑素小体数量增多，且与黑素细胞不相邻的角质形成细胞中也发现黑素小体存在。结论谷氨酸信号通路可能通过调节黑素细胞树突的形态及丝状伪足的形成参与调节黑素小体自黑素细胞至角
- 王楠宋智琦
- 关键词：角蛋白细胞黑素细胞谷氨酸伪足树突
- 谷氨酸信号通路对黑素细胞黑素转运的作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨谷氨酸信号通路在黑素转运中的作用。方法原代培养并纯化黑素细胞及角质形成细胞，免疫荧光显微镜观察离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1（NMDARl）和N-甲基-D-天冬氨酸受体2A（NMDAR2A）在黑素细胞内的分布，共聚焦显微镜观察100μmo]／LNMDAR激动剂NMDA和100μmol／L拈抗剂地卓西平马来酸盐（dizocilpinemaleate，MK801）作用5min和1h后黑素细胞内钙离子浓度的变化以及100μmol／LMK801对黑素细胞内微管蛋白的影响。结果100μmol／LNMDA可使黑素细胞内瞬时钙离子浓度升高，但100μm01]LMK801可使其降低；MK801先作用于黑素细胞5min或1h阻断NMDA受体后，NMDA均不能再次诱导瞬时钙离子浓度升高。共聚焦显微镜观察发现MKS01作用24h后，胞内微管蛋白重新分布聚集于核周。扫描电镜观察发现100μmol／LMK801作用于黑素细胞一角质形成细胞共培养体系48h后，黑素细胞和角质形成细胞之间以及两种细胞表面的丝状伪足数量明显减少。共培养体系下，100μmol/LMK801作用后，角质形成细胞中的黑素含量明显降低，即从黑素细胞向角质形成细胞转移的黑素数量明显减少。结论谷氨酸信号通路对黑素细胞胞内钙离子浓度、微管蛋白分布、黑素细胞伪足形成以及黑素细胞及角质形成细胞间的黑素转运具有一定调节作用。
- 高丽丽刘晶邹伟刘鹏张媛高船舟王楠宋智琦
- 关键词：黑素细胞伪足角蛋白细胞微管蛋白
- 姜黄素对人黑素瘤细胞株A375和C8161细胞AKT/mTOR信号通路的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨姜黄素对恶性黑素瘤体外抗癌作用的分子机制.方法 体外培养的人黑素瘤细胞株A375和C8161分为实验组和对照组.实验组经不同浓度姜黄素处理一定时间,对照组采用二甲基亚砜处理.采用噻唑蓝法检测姜黄素对A375和C8161细胞增殖的影响,体外侵袭实验检测姜黄素对A375和C8161细胞侵袭的影响,流式细胞仪检测姜黄素对A375和C8161细胞周期的影响,Western印迹检测姜黄素对A375和C8161细胞AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响.结果 噻唑蓝法显示,姜黄素分别在5～ 15 mg/L和5 ～ 10 mg/L浓度时,对A375和C8161细胞抑制作用呈量效关系;在0～48h呈时效关系,与对照组相比差异有统计学意义（P＜ 0.001）.其24 h的IC50分别为10 mg/L和5 mg/L.体外侵袭试验显示,10 mg/L和5 mg/L姜黄素分别作用于A375和C8161细胞72 h,可明显抑制细胞侵袭（P＜ 0.001）.流式细胞仪检测显示,10 mg/L和5 mg/L姜黄素分别作用于A375和C8161细胞24 h,细胞周期阻滞于G2/M期;A375细胞G2/M期比例为35.00％±3.54％,与对照组120.80％±7.46％相比,差异有统计学意义（P＜ 0.001）;C8161细胞G2/M期比例为19.33％±4.04％,与对照组85.00％±9.53％相比,差异有统计学意义（P＜ 0.001）.Western印迹检测显示,分别经10 mg/L和5 mg/L姜黄素作用于后,A375和C8161细胞AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平下降.结论 姜黄素抑制人黑素瘤细胞株A375和C8161增殖及侵袭机制可能与其诱导细胞周期阻滞及抑制AKT/mTOR信号通路活化有关.
- 韩晓东周优优郑斯文李贞宋智琦
- 关键词：姜黄素信号传导
