国家自然科学基金(81171748)
- 作品数:6 被引量:8H指数:2
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- 大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及鉴定被引量:3
- 2013年
- 目的建立一套简单易行有效的骨髓间充质干细胞(BMSCs)的培养、纯化、鉴定的方案,初步了解BMSCs的基本性状和功能特点。方法取4周龄雄性SD大鼠,全骨髓贴壁培养BMSCs,对细胞相关的性状进行观察及分析,流式鉴定表面抗原,诱导其成骨、成脂分化,并进行染色鉴定等。结果流式检测结果 CD29、CD90呈阳性反应,CD34、CD45呈阴性反应,成骨诱导分化后茜素红染色呈阳性反应,成脂诱导分化后油红染色呈阳性反应。结论全骨髓培养法是一种相对简单易行的BMSCs分离纯化的方法,可获得纯度高,活性好,性状均一的BMSCs。
- 姚灿郏舜杰陈海啸洪盾朱敏范厉龙吕海燕
- 关键词:骨髓间充质干细胞原代培养分化
- 双氯芬酸钠对大鼠骨髓间充质干细胞的影响
- 2014年
- 目的研究不同浓度双氯芬酸钠对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)形态、增殖、凋亡、分化等生物学特性的影响。方法采用全骨髓贴壁分离、培养BMSCs,选取第3代细胞,以不同浓度双氯芬酸钠进行干预,观察细胞形态变化,检测生长活性、凋亡率以及成骨分化能力等。结果成功分离培养BMSCs。随着加入双氯芬酸钠浓度的升高,BMSCs形态发生变化,生长活性逐渐受到抑制,细胞凋亡率升高,且成骨诱导21 d后,钙结节数随浓度的升高而减少。结论双氯芬酸钠可影响BMSCs的生长活性、凋亡及成骨分化能力,且呈浓度依赖性。
- 徐伟陈真陈海啸袁赤亭洪盾朱敏范厉龙吕海燕
- 关键词:双氯芬酸钠BMSCS增殖凋亡成骨分化
- 甲基强的松龙对SD大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性的影响被引量:2
- 2013年
- 目的观察不同浓度的甲基强的松龙(甲强龙)对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物学特性的影响。方法全骨髓培养法获得MSCs,通过表面抗原和多能分化能力鉴定。不同浓度的甲强龙分别处理MSCs,流式细胞仪分析各组细胞的凋亡率;MTS/PMS法检测各组细胞的增殖率;不同浓度的甲强龙加抗坏血酸和β-甘油磷酸诱导MSCs成骨分化,茜素红染色(AR-S)、ALP染色检测各组细胞的成骨分化能力。结果 10-6mol/L及以上浓度的甲强龙可明显促进MSCs的凋亡(P<0.01)并明显抑制MSCs的增殖(P<0.01),10-7mol/L及以下浓度的甲强龙对MSCs的凋亡率和增殖抑制作用的影响与对照组差别没有统计学意义(P>0.05);10-7及10-6mol/L甲强龙加抗坏血酸和β-甘油磷酸组茜素红染色和ALP染色阳性,10-8及10-5mol/L组茜素红染色和ALP染色阴性。结论高浓度的甲强龙(10-6mol/L及以上)能抑制MSCs的增殖并促进凋亡,而低浓度的与对照组差别不大。适当浓度(10-7及10-6mol/L)的甲强龙可以诱导MSCs的成骨分化,而过高或过低浓度(10-8及10-5mol/L)的甲强龙则没有这种作用。
- 郏舜杰姚灿范历龙朱敏洪盾陈海啸
- 关键词:甲强龙间充质干细胞成骨分化
- 糖皮质激素受体的生物学功能及其在骨代谢中作用的研究进展
- 2012年
- 骨质疏松(ostceporosis)是最常见的骨骼代谢性疾病,其特征包括正常骨密度的减少、骨质脆弱以及骨折的风险性增加。糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)治疗的病人容易并发糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoids-induced osteoporosis,GCOP)。糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)基因多态性能可改变其受体对糖皮质激素的敏感性,而激素高敏感病人极容易被临床医生所忽视而使用常规剂量糖皮质激素,所以存在更高的糖皮质激素性骨质疏松症风险,甚至出现病理性骨折。糖皮质激素性骨质疏松症最明显的表现为体内的骨代谢水平升高,体内骨代谢敏感性变化能反映骨质疏松的进展情况。然而,近来对糖皮质激素受体基因多态性与骨代谢敏感性的研究缺乏统一的认识。作者对文献进行检索分析发现,糖皮质激素受体基因的多态性可能增强或者减弱其对糖皮质激素敏感性,进而促进或抑制骨代谢,其作用结果和基因多态性位点、受体作用通路等有关。
- 郏舜杰洪盾陈海啸
- 关键词:糖皮质激素受体多态性骨代谢敏感性
- 确炎舒松对骨髓间充质干细胞的影响被引量:2
- 2013年
- 目的了解不同浓度确炎舒松对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)形态、增殖、凋亡、分化等生物学特性的影响。方法采用全骨髓贴壁培养BMSCs,选取第3代(P3)大鼠BMSCs,以不同浓度确炎舒松进行干预,观察细胞形态变化,检测生长活性、凋亡率以及成骨分化能力等的变化。结果本实验成功分离培养骨髓间充质干细胞,试验中随着药物浓度的升高,BMSCs形态发生变化,生长活性逐渐受到抑制,细胞凋亡比率升高,且确炎舒松成骨诱导21天后,茜素红染色呈阳性反应。结论确炎舒松对BMSCs生长活性及凋亡有明显影响,且其影响呈浓度依赖性,一定浓度确炎舒松可促进BMSCs成骨分化。
- 姚灿郏舜杰陈海啸洪盾朱敏范厉龙吕海燕
- 关键词:确炎舒松BMSCS增殖凋亡分化
- 双氯芬酸钠对大鼠骨髓间充质干细胞影响的浓度、时间效应被引量:1
- 2015年
- 目的 通过不同浓度的双氯芬酸钠干预体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),观察其对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、凋亡及成骨分化能力的影响;不同药物干预时间对细胞成骨分化能力的影响.方法 不同浓度的双氯芬酸钠(6.4、3.2、1.6、0.8、0.4mg/L)干预第4代(P4) BMSCs,通过MTS法检测细胞增殖活性;AnnexinV-FITC法检测细胞凋亡;根据茜素红染色钙结节的数量,初步检测细胞成骨能力.并选取1.6mg/L的药物浓度,不同时间点和时长进行干预,检测细胞成骨分化能力的变化.结果 随着双氯芬酸钠浓度的升高,BMSCs细胞增殖活性逐渐降低,细胞凋亡比率升高,钙结节数量减少.药物在第1 ~ 14天期间干预能够减少钙结节的形成,在第14 ~21天期间干预对钙结节的形成无明显影响.结论 双氯芬酸钠可影响BMSCs的增殖、凋亡及成骨分化能力,且呈浓度和时间依赖性,短期的作用效果是部分可逆的.
- 徐伟洪盾陈真袁赤亭陈海啸
- 关键词:双氯芬酸钠骨髓间充质干细胞