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乳腺上皮细胞特异性敲除Scrib基因杂合子小鼠的制作与鉴定被引量：2: 2013年; 目的利用Cre-LoxP重组酶系统构建乳腺上皮细胞特异性敲除Scrib基因杂合子小鼠,并进行鉴定,为进一步在动物整体水平研究Scrib基因在乳腺癌中的作用提供研究平台。方法将Scrib条件敲除杂合子小鼠(Scrib+/fl小鼠)进行繁殖并鉴定,然后将鉴定结果为阳性的子代Scrib+/fl小鼠与乳腺上皮细胞特异性表达Cre重组酶的MMTV-Cre纯合子小鼠进行杂交,鉴定其子代小鼠的基因型。结果成功繁育Scrib条件敲除小鼠和MMTV-Cre小鼠,并通过鉴定得到Scrib+/fl小鼠,与MMTV-Cre小鼠杂交并繁殖,获得基因型为Scrib+/fl;MMTV-Cre+/-小鼠5只。结论本研究利用Cre-LoxP重组酶系统成功构建了乳腺上皮细胞特异性敲除Scrib基因杂合子小鼠,为进一步研究极性蛋白Scrib表达下调在乳腺癌发生中的作用提供了良好的动物模型。; 何晓东李江超兰天亓翠玲章倩倩王丽京; 关键词：小鼠 LOXP

格列吡嗪对小鼠结直肠癌肝转移的作用及机制被引量：4: 2016年; 目的探讨格列吡嗪对小鼠结直肠癌肝转移的作用及机制。方法对BALB/C小鼠注射CT26细胞建立结直肠癌肝转移模型,建模后小鼠随机分为对照组15只和实验组14只,对照组和实验组术后隔天分别腹腔注射生理盐水和格列吡嗪,18 d后称量肝脏重量,计数肿瘤数量,利用免疫组化进行Ki67和CD31染色,观察肿瘤的增殖和血管形成情况。提取肿瘤组织RNA,进行qPCR-array实验,筛选格列吡嗪作用的靶点。结果实验组小鼠肝脏重量和肝转移肿瘤数目均明显低于对照组(P<0.05),且肿瘤微血管密度和肿瘤的增殖率也明显低于对照组(P<0.05),qPCR-array筛选出格列吡嗪的作用靶点为血管内皮生长因子(VEGF)。结论格列吡嗪可以通过抑制VEGF的表达抑制肿瘤的增殖和血管新生,从而抑制肿瘤细胞的迁移,进而抑制小鼠结直肠癌肝转移的发生、发展。; 李斌何晓东李嘉琳李媛媛杨扬亓翠玲王丽京; 关键词：格列吡嗪结直肠癌肝转移血管内皮生长因子

DMPP对于鸡胚血管形成的抑制作用被引量：2: 2013年; 目的研究1,1-二甲基-4-苯基哌嗪(1,1-dimethyl-4-phenyl piperazinium,DMPP)对于鸡胚发育期血管新生的作用。方法采用质量浓度为50μg/mL的DMPP溶液局部处理鸡胚绒毛尿囊膜(chickenchorioallantoic membrane,CAM)和鸡胚卵黄囊膜(yolk sac membrane,YSM)表面,分别用肉眼和显微镜观察与被测物作用后CAM膜上血管生成情况和YSM膜血管密度和生长率的变化。结果 DMPP能明显抑制CAM模型血管的生成和YSM模型的血管面积和密度的增长。结论 DMPP可抑制鸡胚血管的形成。; 周秦何晓东亓翠玲李江超郭四美叶杰韩露王丽京; 关键词：DMPP 鸡胚绒毛尿囊膜血管形成

Combinational electroporation and transplantation approach to studying gene functions in avian embryos: 2014年; Gene transfection is an indispensable approach for studying gene function since it provides important information on gain-and/or loss-of-function.Chick embryos are also extensively employed for studying biological function since they are easily accessible and can be maintained alive after manipulation.The combination of both techniques presents a powerful approach to understanding how genes regulate embryo development.Furthermore,combining these approaches with tissue transplant techniques make even more attractive for elucidate gene function.Electroporation,employing parallelly fashioned electrodes,has been widely used in chick embryos.However,experimenters have been frustrated by unsuccessfully transfection in some embryonic tissue of interest because the electrodes were improperly positioned.We presently demonstrated the different patterns of organizing and positioning the electrodes,in combination with tissue transplantation,to efficiently and specifically transfect the chick embryonic head,trunk neural tube,heart tube,somites and neural crest cells with the GFP reporter gene.; Xiaoyu WangYan LiGuang WangAndrea MnsterbergManli ChuaiKaHo Kenneth LeeLijing WangXuesong Yang; 关键词：胚胎组织电穿孔鸡胚胎逻辑功能

快速高效从石蜡包埋肿瘤组织中提取micro-RNA方法的研究: 2014年; 目的探索一种从石蜡包埋组织标本中快速、便捷、低成本的提取miRNAs的方法。方法收集2年内石蜡包埋的人乳腺癌组织和保存6个月的MMTV基因工程小鼠乳腺癌组织石蜡样本，同时选用进口A公司生产的提取石蜡组织miRNAs试剂盒作为对照；通过2种方法提取人和鼠的石蜡切片中miRNAs做对比分析，包括采用凝胶电泳验证，检测miRNA纯度、浓度分析。为了进一步验证其提取效果，采用定量PCR对所提取的总miRNAs进行miRNA-375和miR-218检测。结果①采用本实验方法从石蜡包埋乳腺癌组织中提取的miRNAs其纯度在1．86—2．210D之间，其浓度可以满足常规实验要求（最低38．50mg／L）；②荧光定量PCR能够检测到miRNA-375和miRNA-218，其拷贝数与对照组比较，2种方法差异无统计学意义（P〉0．05）。③该方法提取时间短、成本低，成本是试剂盒法的1／10，提取时间至少节省1／3。结论从石蜡包埋组织标本中提取miRNAs方法切实可行，为从石蜡组织样本提取miRNA进行分子诊断和肿瘤相关的研究提供了便利，对采用回顾性石蜡标本研究miRNAs提供了有力的帮助。; 李江超杨扬郝卓芳周晓明章倩倩王丽京; 关键词：石蜡包埋组织 MICRORNAS

ANP基因敲除小鼠的饲养繁育及基因型鉴定被引量：1: 2013年; 目的繁殖和鉴定心房钠尿肽(ANP)基因敲除小鼠。方法将引进的ANP敲除杂合子小鼠进行饲养并繁殖,提取子代小鼠尾部DNA,用PCR方法检测子代小鼠基因型。结果获得子代小鼠,基因型分别为杂合子(ANP+/-)、纯合子(ANP-/-)和野生型(ANP+/+),子代小鼠纯合率为9.09%。结论 ANP基因敲除小鼠的繁育和鉴定均获得成功,为进一步研究ANP缺失对肿瘤发生发展的影响提供了理想的动物模型。; 何晓东杨扬周秦亓翠玲王丽京; 关键词：心房钠尿肽基因敲除小鼠肿瘤

荧光原位杂交探针应用于平衡易位t(1,6)(q42;p23)胚胎植入前诊断的研究被引量：1: 2014年; 背景:染色体相互易位在人群中比较常见,下一代常常产生相同或不同的易位,易导致容易流产,而植入前诊断方法之一的CGH难以检测到相互易位,因此原位杂交(FISH)依然是解决诊断相互易位的有力手段。目的:通过设计个体化的FISH探针,制备探针,并在卵裂球单细胞水平进一步验证探针的准确性,为筛选正常核型的囊胚进行植入奠定技术基础,为个体化的FISH探针植入前诊断提供应用研究基础。方法:通过设计1q和6p平衡易位探针,进行探针标记,再采用患者和正常人核型验证探针质量,通过荧光原位杂交技术进一步检测正常人受精后的卵裂球中1q和6p平衡易位对易位染色体状态。结果:3个卵接球裂均呈现单个完整细胞核,荧光原位杂交中各细胞核均有清晰明亮的杂交信号。信号数分别为2。均为正常胚胎,可以考虑进一步对该易位患者进行卵裂球进行诊断,上述研究对个体化的易位探针的应用研究提供了研究基础。; 李江超张仁礼张丽丽陈金娜石庆荣熊丽关新元王丽京; 关键词：平衡易位荧光原位杂交植入前诊断

FGF4在肺癌细胞体内和体外中表达差异的研究被引量：6: 2014年; FGF4已经被证明是癌基因,它涉及肿瘤的生长和转移,为了解FGF4的表达与肿瘤微环境的关系。我们利用FGF4抗体通过免疫组化对一名肺癌患者癌旁,癌组织,癌组织小鼠移植瘤,二次移植瘤以及原代培养的细胞爬片进行FGF4检测,探究其表达差异。通过对比癌组织与对照组(癌旁组织),FGF4在癌巢中高表达;同样,移植瘤与二次移植瘤的癌巢中与癌旁组织比较,FGF4表达相对较高;但是将癌组织进行原代培养后,免疫组化检测细胞爬片FGF4,发现仅有5%±0.21%的肿瘤细胞表达FGF4,对照蛋白Cytokine作为肿瘤标记物,则在100%的肿瘤细胞中表达。研究提示免疫组化检测到FGF4在体内和体外表达不同,提示肿瘤细胞FGF4的表达与肿瘤微环境调控密切相关,肿瘤微环境对肿瘤细胞的FGF4的调控有着重要作用。; 李江超袁俏冰陈卉黎帅周泽启叶宇翔韩露王丽京; 关键词：小鼠移植瘤肺癌肿瘤微环境

穿心莲内酯对口腔癌生长的影响被引量：5: 2014年; 目的:探讨穿心莲内酯对口腔癌的作用及其机制。方法:用穿心莲内酯及其对照药物治疗金黄地鼠颊囊癌,通过测量肿瘤体积观察治疗效果。用免疫组化检测穿心莲内酯对肿瘤血管和肿瘤细胞增殖的作用,用TUNEL法检测穿心莲内酯对肿瘤细胞凋亡的作用,用免疫组化检测凋亡信号分子caspase-3的表达情况。结果:穿心莲内酯治疗组颊囊癌的肿瘤体积明显比对照组小,肿瘤微血管密度和增殖的肿瘤细胞也明显低于对照组,肿瘤细胞的凋亡率明显高于对照组,而且治疗组中caspase-3明显被活化。结论:穿心莲内酯通过抑制肿瘤血管生成和肿瘤细胞增殖以及促进肿瘤细胞凋亡,抑制了金黄地鼠颊囊癌的生长。穿心莲内酯通过caspase-3途径诱导了肿瘤细胞的凋亡。; 亓翠玲周鑫磊叶杰杨扬章倩倩李江超兰天何晓东王丽京; 关键词：穿心莲内酯细胞凋亡血管生成口腔肿瘤

PSGL-1基因敲除小鼠血中MIP-1γ和TNF-α的表达被引量：2: 2014年; 目的研究PSGL-1缺失对遗传基因工程小鼠外周血血常规的影响,并检测外周血中炎症因子IGFBP-6、TNF-α和MIP-1γmRNA表达水平。方法用血常规检测方法检测正常C57/BL/6小鼠和PSGL-1基因缺失的基因工程小鼠(PSGL-1-/-小鼠)的外周血中血常规的差异;其次,提取两种鼠的血液的mRNA,逆转录为cDNA,采用real-time PCR方法,检测C57小鼠与PSGL-1-/-小鼠外周血中炎症因子TNF-α和MIP-1γmRNA的差异。结果与对照组C57小鼠相比,PSGL-1-/-基因工程小鼠在12周龄时外周血中中性粒细胞(*P<0.05)、淋巴细胞(**P<0.01)和白细胞细胞(***P<0.001)总数显著增加炎症因子TNF-α以及MIP-1γ表达增加(P<0.05)。结论 PSGL-1的缺失改变了小鼠细胞因子并影响了外周血的血细胞组成,MIP-1γ和TNF-α炎症因子上调,有可能影响了小鼠的免疫功能。; 李江超周泽启叶杰韩露叶宇翔刘影何晓东陈卉袁俏冰黎帅张静丽王丽京; 关键词：TNF-Α

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