美国中华医学基金(98681)
- 作品数：3 被引量：21H指数：2
- 相关作者：王伯瑶吴琦黄宁冯云李明更多>>
- 相关机构：华西医科大学华西第二医院四川大学更多>>
- 发文基金：美国中华医学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卡介苗诱导人肺腺上皮细胞hBD-1mRNA的增强表达被引量：13
- 2000年
- 使用热灭活的卡介苗刺激培养的人肺腺上皮细胞(SPC－A－1)，利用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法和Northern杂交分析，证实了卡介苗能诱导SPC－A－1细胞β－防御素－1基因(hBD－1)的增强表达。卡介苗菌量和刺激时间与SPC－A－1细胞hBD－1基因表达量的关系曲线显示，hBD－1 mRNA 在人肺腺上皮细胞的增强表达在一定范围内表现为具刺激剂量和时间依赖关系。实验为开发增强粘膜抗菌肽基因表达的免疫增强剂以防治粘膜感染的研究打下了基础。
- 冯云黄宁吴琦王伯瑶
- 关键词：卡介苗
- 人气管粘膜上皮细胞抗菌多肽探讨被引量：1
- 2000年
- 目的 :探讨人支气管肺泡灌洗液和体外气液界面无血清培养的人气管上皮细胞分泌液对绿脓杆菌的抗菌作用。方法 :采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳 (AU PAGE)分析人支气管肺泡灌洗液阳离子蛋白成分 ;气液界面无血清培养人气管上皮细胞 ;电泳凝胶琼脂糖弥散法和琼脂糖弥散法检测支气管肺泡灌洗液及培养细胞分泌液的抗菌活性。结果 :人支气管肺泡灌洗液和培养气管上皮细胞分泌液对绿脓杆菌有很强的抗菌作用 ;随着盐浓度增加 ,抗菌作用减弱。AU PAGE发现一电泳迁徙率明显高于α 防御素和溶菌酶的阳离子抗菌多肽。结论 :提示人气管粘膜上皮细胞能合成和分泌与α 防御素或溶菌酶不同的抗菌多肽 ,可能是呼吸道抗感染的重要分子。
- 黄宁程德云潘小玲吴琦唐彬王伯瑶
- 关键词：气管上皮细胞抗菌多肽呼吸道感染
- 人子宫颈黏液抗菌多肽的分离和鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的 从人的子宫颈黏液分离和鉴定新抗菌多肽,探讨子宫颈黏液抗菌机制。方法 用5%乙酸提取人子宫颈黏液可溶物,应用电泳凝胶抗菌蛋白分析法分析其抗菌蛋白,制备酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳及反相高效液相色谱分离纯化抗菌多肽。凝胶琼脂糖弥散法抗菌检测抗菌活性。纯化的抗菌多肽进行氮端氨基酸序列测定,根据其序列设计简并引物,利用简并聚合酶链反应(PCR)技术扩增其全长cDNA。通过BLAST硷基比对程序分析比较与已知蛋白的同源性。进一步应用常规基因重组技术构建其原核表达质和制备重组多肽。采用最小抑菌浓度和最小杀菌浓度检测重组多肽的抗菌效能。结果 从子宫颈黏液中分离纯化到一个具抗菌活性的多肽,通过蛋白测序、简并PCR及BLAST等方法鉴定该蛋白为HMGN2高游动性蛋白。制备获得重组HMGN2多肽,重组HMGN2抗大肠杆菌和铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度分别为10 .42μg/ml±3. 13μg/ml和27. 78μg/ml±8 .33μg/ml,与人中性粒细胞防御素相当;最小杀菌浓度分别为20 .83μg/ml±6 .25μg/ml和55 .56μg/ml±16 .67μg/ml。结论 除已知的抗菌肽外,HMGN2亦可能是宫颈黏液含有的抗感染效应分子之一。
- 李明潘小玲王莉莉冯云黄宁吴琦李绚王伯瑶
- 关键词：宫颈黏液抗菌多肽基因重组技术最小杀菌浓度抗菌蛋白
