河南省高校科技创新团队支持计划(2012HASTIT024)
- 作品数：10 被引量：25H指数：5
- 相关作者：王明永王凡平赵东方郭继强凌明智更多>>
- 相关机构：新乡医学院新乡医学院第一附属医院新乡医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金：河南省高校科技创新团队支持计划国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 豫北地区肺炎链球菌感染分布和耐药性分析被引量：5
- 2016年
- 目的了解肺炎链球菌（SP）的临床分布及其耐药情况,指导临床医师合理使用抗生素,以延缓多重耐药菌株的产生并有效预防医院获得性感染。方法收集2015年1～12月新乡医学院第一附属医院检验科分离出的641株SP,采用纸片扩散法进行鉴定及药物敏感试验。分析SP感染患者的年龄分布、标本来源、科室分布及药物敏感试验结果。结果 SP感染者年龄多分布在9岁以下,标本类型主要是痰液（587份,91.6%）。SP对14种抗生素的药物敏感试验结果显示,SP对氯霉素（0.8%）、万古霉素（0.8%）、左旋氧氟沙星（0.6%）及利奈唑胺（0.0%）的耐药率较低;而对克林霉素（99.8%）、复方磺胺甲唑（98.3%）、红霉素（99.8%）、四环素（99.5%）的耐药率较高。结论 SP感染者多为儿童,且对抗菌药物存在多重耐药性,临床医生应加强其耐药性检测,合理选择抗菌药物,以减少多重耐药菌株的出现。
- 张海涛张娜杜纪英胡东洋娄婷叶王明永
- 关键词：肺炎链球菌多重耐药性医院感染
- 幽门螺杆菌热休克蛋白A核酸疫苗的构建
- 2013年
- 目的构建幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A(HspA)亚单位核酸疫苗,为进一步研制Hp核酸多价疫苗提供技术平台。方法以PMD-HspA为模板,扩增、纯化Hp hspA基因,插入到真核表达载体PcDNA3中,转化大肠埃希菌DH5a,经氨苄西林抗性筛选阳性克隆,得到重组核酸疫苗pcDNA3-HspA,用特异性PCR方法和小提质粒酶切电泳鉴定重组质粒,同时将pcDNA3-HspA进行测序,进一步确定是否构建成功及鉴定构建过程中是否发生基因突变。结果 PCR鉴定结果显示,扩增产物为0.36kb的目的基因;酶切鉴定结果显示,得到5.45kb克隆载体片段和0.36kb的目的基因片段;重组质粒pcDNA3-HspA测序,得到基因全长357bp目的基因片段,与克隆质粒测序图比较,无基因变异。结论成功构建了Hp单价核酸疫苗pcDNA3-HspA,为研制Hp核酸多价疫苗奠定基础。
- 王凡平王明永杨建斌赵东方孙瑞利余文发郭庆合马淑君朱琳琳赵永新谭静
- 关键词：幽门螺杆菌核酸疫苗
- 模式抗原Mannan-TTC的制备及免疫原性分析
- 2013年
- 目的:制备高免疫原性的模式抗原Mannan-TTC,分析其免疫原性。方法:将甘露聚糖(Mannan)与破伤风毒素C片段(TTC)蛋白进行化学交联,SDS-PAGE分析交联产物。用混合淋巴细胞反应检测DC负载Mannan-TTC刺激同种异体T细胞增殖的能力;WST-1和ELISA检测TTC特异性CD4+T细胞的增殖和分泌IFN-γ的能力;小鼠免疫后,用ELISA检测TTC特异性抗体水平。结果:成功交联Mannan与TTC,获得模式抗原Mannan-TTC。该交联产物能通过活化树突状细胞(DC),不仅增强了对同种异体T细胞增殖的能力,而且显著增强TTC抗原特异性的CD4+T淋巴细胞增殖及分泌细胞因子IFN-γ。动物免疫实验则显示,该交联产物能刺激小鼠免疫细胞产生TTC抗原特异性的抗体,但与单纯TTC抗原刺激相比,无显著性差异。结论:所获Mannan-TTC抗原免疫原性好,能显著增强细胞免疫应答,为研究体内外抗原提呈、免疫应答提供了良好的模式抗原。
- 王凡平王明永赵东方马淑君余文发杜继英丁肖华朱琳琳谭静赵永新毛光兰申家辉
- 关键词：甘露聚糖免疫原性
- MBL调节白假丝酵母菌相态转化的作用及机制的初步分析被引量：5
- 2014年
- 目的：探讨甘露聚糖结合凝集素（Mannan-binding lectin,MBL）对白假丝酵母菌（Candida albicans,C.albicans）相态转化的调节作用及机制。方法：以人MBL处理C.albicans 2、4、8 h,37℃200 r/min震荡培养,倒置相差显微镜下观察C.albicans的菌丝形成情况;FACS分析MBL与C.albicans的结合情况;RT-PCR分析C.albicans相态转化调控基因HWP1、DDR48的表达。结果：倒置相差显微镜观察发现MBL在早期（2~4 h）能够抑制C.albicans酵母相（Yeast form,Y）向菌丝相（Hyphal form,H）转化;FACS分析表明MBL能够以Ca2＋浓度依赖关系与C.albicans细胞结合;RT-PCR结果表明MBL能够减少C.albicans相态转化调控基因HWP1的表达,而其对DDR48表达的影响尚无规律可循。结论：MBL能够通过调控HWP1的表达抑制C.albicans酵母相向菌丝相转化。
- 翟晶晶王明永凌明智王凡平郭康宋士军段巨洪张娜李梦杰左萌洁赵雯瑕
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素白假丝酵母菌基因表达
- 豫北地区铜绿假单胞菌感染分布和耐药性的分析被引量：2
- 2015年
- 目的了解铜绿假单胞菌（PA）感染分布及其耐药情况，指导lI缶床医生合理使用抗生素，有效预防及控制院内感染。方法应用美国DadeMicmScall公司生产的AutoSCAN4半自动鉴定仪及配套的生化反应药敏板进行鉴定。参照2014版CLSI标准进行药敏结果判读。结果2014—2015年间共收集534株多重耐药铜绿假单胞菌菌株，其中男性感染者占71.35％（381／534），且年龄分布在60～69岁者最多。标本类型主要是痰液（413份，77.34％），其次为分泌物（47份，8.80％）和中段尿（24份，4.49％）。分离的铜绿假单胞菌主要分布在神经外科18.54％（99／534）、呼吸科16.10％（86／534）和重症监护室12.92％（69／534）三个科室。铜绿假单胞菌对16种抗生素的药敏试验显示耐药率较低的药物有阿米卡星（21.72％）、哌拉西林，他唑巴坦（26.78％），而头孢唑林、氨苄西林／舒巴坦则耐药率较高，均为99.63％。结论铜绿假单胞菌对抗菌药物存在多重耐药性且耐药率高，临床医生应根据其临床分布特点和药敏试验结果合理选择抗菌药物。
- 张海涛胡东洋杜纪英梁梦夏娄婷叶王明永
- 关键词：铜绿假单胞菌耐药性医院感染
- 甘露聚糖结合凝集素抑制肽聚糖刺激THP-1／CD14细胞产生的炎性反应及机制被引量：5
- 2012年
- 目的探讨甘露聚糖结合凝集素（mannan-bindinglectin，MBL）对肽聚糖（peptidogly—can，PGN）刺激佛波酯（PMA）活化的THP-1／CD14细胞产生TNF—α和IL-6影响。方法用PMA活化THP-1／CD14细胞，以不同浓度人MBL预处理2b后再用PGN刺激24h。收集培养上清，以ELISA从蛋白水平分析TNF-α和IL-6的产生。收集细胞提取总RNA，以RT—PCR从转录水平评估TNF—α和IL-6的表达。FACS分析MBL与THP-1／CD14细胞的结合，并进一步分析MBL对PGN结合THP-1／CD14细胞的影响，Western blot分析NF-κB的细胞核移位。结果ELISA检测发现，PGN可刺激PMA活化的各THP-1／CD14细胞分泌TNF-α和IL-6，高浓度MBL（10～20mg／L）可抑制PGN诱导细胞分泌TNF—α和IL-6；RT—PCR分析亦显示，MBL（20mg／L）对PGN诱导的TNF—α和IL-6的mRNA表达有不同程度的抑制作用；流式细胞术检测显示MBL能够与THP-1／CD14细胞以Ca^2＋依赖形式结合，PGN可竞争性抑制MBL结合THP-1／CD14细胞。MBL还可通过结合THP-1／CD14竞争性抑制PGN与THP-1／CD14的结合。Western blot分析显示，MBL对PGN诱导的NF—κB细胞核移位有显著的抑制作用。结论MBL通过配体结合抑制PGN诱导的THP-1／CD14细胞产生的细胞反应，提示MBL能够在PGN诱导的炎性反应中起免疫调控作用。
- 王凡平王明永杨建斌赵东方连荣徐素玲邵峰孙瑞利郭庆合李海斌郭继强宋志善
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素肽聚糖THP-1
- 甘露聚糖结合凝集素诱导DC成熟机制分析被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨甘露聚糖结合凝集素(Mannan-binding lectin,MBL)诱导人外周血单核细胞(Mo)来源树突状细胞(DC)成熟的机制。方法:从健康成人外周血分离Mo,常规方法体外诱导未成熟DC(imDC),FACS分析DC成熟过程中MBL对CD分子表达的影响,进一步分析MBL与imDC的结合情况;RT-PCR分析DC表面模式识别分子Toll样受体-2(TLR2)和Toll样受体-4(TLR4)的表达;凝胶电泳迁移率法(EMSA)和Western blot分析NF-κB的活性及细胞核移位。结果:FCM分析表明,MBL能够使DC表面CD83、CD86及MHC分子表达升高;MBL能够以Ca2+浓度依赖关系与imDC细胞结合;RT-PCR结果表明MBL能够减少DC表面TLR2和TLR4的表达。EMSA和Western blot分析结果显示,MBL能够增强NF-κB活性及细胞核移位。结论:MBL可通过直接结合imDC表面分子来影响DC模式识别分子的表达并调节信号分子NF-κB活性,提示MBL能够通过配体结合调控DC分化成熟,揭示了MBL调节DC分化成熟有关信号途径。
- 王凡平王明永杨建斌赵东方王红坡邵峰孙瑞利郭庆合凌明智赵永新宋士军郭继强
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素树突状细胞TOLL样受体NF-ΚB免疫调节
- MBL抑制LPS诱导DC成熟机制的研究被引量：8
- 2013年
- 本研究探讨甘露聚糖结合凝集素(MBL)对细菌脂多糖(LPS)诱导的人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)成熟的机制。从健康成人外周血分离单核细胞(Mo),用常规方法体外诱导未成熟DC(imDC),FACS分析MBL与imDC的结合,并进一步分析MBL对LPS结合imDC的影响;ELISA和Western blot分析MBL与可溶性的TLR4胞外段蛋白(sTLR4)结合;Western blot分析NF-κB的细胞核移位。结果表明,在钙离子存在下,MBL能够直接与imDC结合,sTLR4和LPS可竞争性抑制MBL与imDC的结合。Western blot与ELISA分析结果显示,MBL能够以浓度依赖的方式结合sTLR4蛋白。FACS分析结果进一步表明,MBL通过结合imDC竞争性抑制LPS与imDC的结合。Western blot分析结果亦显示,MBL对LPS诱导的NF-κB细胞核移位有显著的抑制作用。结论:MBL可通过结合表达在imDC的TLR4分子竞争性抑制LPS结合imDC,从而抑制LPS诱导imDC成熟,提示MBL能够通过配体结合调控DC分化成熟。本研究为阐明MBL抑制LPS诱导DC成熟的机制提供了较好的实验依据。
- 王凡平王明永郭晓芳石如玲徐素玲马淑君李海斌郭继强杨秀丽
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素细菌脂多糖树突状细胞TOLL样受体-4
- 白色假丝酵母菌对氟康唑耐药性及Erg11基因突变分析被引量：7
- 2015年
- 目的分析白色假丝酵母菌临床分离株对氟康唑的耐药性,阐明耐氟康唑白色假丝酵母菌Erg11基因突变。方法回顾性分析2011年6月-2012年12月医院患者送检各类标本分离的287株假丝酵母菌属,采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)M27-A3推荐的微量稀释法进行体外药敏试验,从177株白色假丝酵母菌中筛选出7株对氟康唑耐药株,对氟康唑靶酶基因Erg11进行PCR扩增、测序,与Genbank上标准序列(X13296)比对分析。结果在7株白色假丝酵母菌氟康唑耐药株和1株敏感株中共发现25个点突变,其中15个同义突变,10个错义突变,10个错义突变分别为V51G、Y53H、C75W、Y79D、V94G、D116E、K119N、K128T、D153E、E266D,其中V51G、Y53H、C75W、Y79D、V94G是新发现的。结论成功分析了白色假丝酵母菌对氟康唑耐药性及Erg11基因突变。
- 王明永翟晶晶左萌洁薛宁刘萌萌凌明智高继娟邢骏田文倩胡亚会于凤婷谭耀鹏王凡平
- 关键词：白色假丝酵母菌氟康唑耐药性ERG11基因突变
- MBL抑制白假丝酵母菌诱导DC成熟和细胞因子分泌被引量：6
- 2015年
- 目的:探讨甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌(candida albicans,C.albicans)诱导的树突状细胞(dendritic cells,DC)成熟及分泌细胞因子的影响。方法:从健康成人外周血分离能粘附塑料的单核细胞(MNC),应用常规方法体外诱导未成熟DC(im DC),然后在有或无C.albicans和不同浓度(1-20mg/L)天然人MBL条件下继续培养2 d;用倒置显微镜观察DC的形态,以FACS分析DC的表型,用ELISA检测DC培养上清中TNF-α和IL-6的含量;FACS分析MBL与C.albicans及im DC的结合,Western blot分析IκBα磷酸化及p65/NF-κB细胞核移位。结果:ELISA检测发现,高浓度MBL(10-20 mg/L)能够下调C.albicans诱导人DC表面分子CD83和CD86表达,并抑制C.albicans诱导的TNF-α和IL-6分泌;FACS检测显示,MBL不仅能够与C.albicans结合而且能够与im DC结合;Western blot分析显示,MBL对C.albicans诱导的IκBα磷酸化及p65/NF-κB细胞核移位均有显著的抑制作用。结论:MBL能够以配体结合形式通过调节NF-κB信号途径抑制C.albicans诱导的DC成熟及细胞因子分泌,提示MBL能够在C.albicans诱导的免疫反应中起调控作用。
- 王明永王凡平翟晶晶李俊鹏张娜李昊典郭康宋士军于海川赵雯瑕李梦杰
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素白假丝酵母菌树突状细胞细胞因子免疫调节
