广西研究生教育创新计划(2009105981007D25)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 相关作者：廖柳凤欧贤红陆游刘华钢徐恒更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西中医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- P53 shRNA对肝癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察用RNA干扰(RNAi)下调SMMC-7721人肝癌细胞系P53表达后对细胞增殖及P21蛋白表达的影响。方法设计合成P53基因的短发夹RNA(shRNA),并构建pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA重组质粒。重组质粒转染SMMC-7721细胞,经G418抗性筛选获得阳性克隆。克隆形成实验观察细胞的增殖,RT-PCR法及Western blot法分别检测P53、P21的mRNA及蛋白表达。BALB/c裸鼠皮下注射SMMC-7721细胞,建立移植瘤模型,瘤部位多点注射pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA,观察瘤体积变化和瘤重。结果 P1、P2、P3 3条P53 shRNA均可明显降低P53mRNA水平(P<0.05,P<0.05,P<0.01);干扰P53表达明显升高SMMC-7721细胞克隆形成率(P<0.05),P21mRNA和蛋白的表达均随着P53的沉默而显著降低(P<0.05)。P53 shRNA明显增加裸鼠移植瘤的体积和重量(P<0.05)。结论 shRNA干扰P53基因可抑制P53和P21蛋白表达,使癌细胞恶性增殖。
- 欧贤红廖柳凤陆游徐恒刘华钢
- 关键词：RNA干扰P53P21肝癌
- p53途径在氯化两面针碱抑制SMMC-7721细胞增殖中的作用被引量：9
- 2011年
- 目的研究氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)处理后p53通路的分子水平变化,以说明p53途径在NC抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖中的作用。方法应用MTT比色法测定NC对SMMC-7721细胞存活率的影响,细胞克隆集落形成实验测定NC对细胞增殖的抑制作用;实时荧光定量PCR检测不同剂量NC对p53、p21mRNA表达的影响;酶联免疫吸附法测定p53、p21蛋白含量的变化。结果 NC(0.15,0.30,0.60,1.20,2.40,4.80 mg.L-1)浓度依赖性地降低SMMC-7721的存活率,作用48 h时IC50值为(1.03±0.18)mg.L-1;NC可明显抑制细胞集落形成,剂量为0.15,0.30 mg.L-1时,抑制率分别是74.65%、88.48%,剂量为0.60 mg.L-1时,抑制率达到了100%;NC可明显提高癌细胞中p53、p21 mRNA和蛋白的表达,并呈浓度依赖性。结论 p53通路可能在NC诱导的SMMC-7721细胞增殖抑制中起重要作用。
- 廖柳凤欧贤红陆游刘华钢
- 关键词：氯化两面针碱SMMC-7721细胞P53P21
