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山东省自然科学基金(Y2006C12)

作品数：1 被引量：3H指数：1
相关作者：王海波代明营杨堃刘相萍隋爱华更多>>
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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇荧光
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  • 1篇直肠
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  • 1篇癌细胞
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  • 1篇肠癌
  • 1篇肠癌细胞
  • 1篇SHRNA

机构

  • 1篇青岛大学医学...

作者

  • 1篇赵萍
  • 1篇隋爱华
  • 1篇刘相萍
  • 1篇杨堃
  • 1篇代明营
  • 1篇王海波

传媒

  • 1篇中华实验外科...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
RhoA、RhoC串联RNA干扰载体的构建及在结直肠癌细胞中的表达被引量：3
2011年
目的探讨RhoA、RhoC串联RNA干扰载体的构建及在结直肠癌细胞中的表达。方法设计合成4对靶向RhoA与RhoC基因的各两对寡核苷酸序列，退火后分别克隆人shRNA表达载体；通过一系列的酶切与连接，将该4段干扰片段串联起来，构建一个同时表达4个shRNA的重组质粒。经酶切和测序鉴定重组质粒。脂质体法转染HCTll6，荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测各细胞中RhoA、RhoCmRNA的表达，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞的增殖活性。结果经酶切和测序证实重组质粒pGenesil2．7-A1＋A2＋C1＋C2构建成功。转染该重组质粒后细胞中RhoA、RhoCmRNA的表达水平分别为（0．78±0．11）和（0．90±0．21），明显低于空白对照组（0±0．15、0±0．09）和阴性对照组（一0．05±0．12、0．11±0．10，P〈0．05），且细胞的生长增殖率（63．8±12．5）％也显著低于对照组和质粒对照组（101．6±13．7）％（P〈0．05）。结论成功构建4个shRNA串联的重组表达载体，该载体可在体外高效表达。
王海波隋爱华赵萍杨堃代明营刘相萍
关键词：SHRNA结直肠癌细胞荧光定量PCR
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