国家自然科学基金(81171657)
- 作品数:10 被引量:40H指数:3
- 相关作者:姜晓峰梁红艳张婉莹杨春高光强更多>>
- 相关机构:哈尔滨医科大学附属第四医院哈尔滨医科大学佳木斯大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 哮喘患者血清中循环lncRNA差异性表达的初步筛查被引量:5
- 2016年
- 目的对哮喘患者血清中差异性表达的lnc RNA进行初步筛选,找到可以对哮喘诊断提供临床意义的潜在新型分子标志物。方法收集哮喘患者血清50例,健康体检者血清32例,选择17种循环lnc RNA,包括HULC、PRNCR1、TUSC7、PCGEM1、PCA3、TUC338、MEG3、UCA1、PTENP1、SNHG16、MALAT1、THRIL、NAET1、lnc-IL7R、GAS5、MIR155HG、TUG1。利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)技术检测lnc RNA在血清中的差异性表达。结果对17种lnc RNA进行筛查表明,lnc RNA PCGEM1在哮喘患者血清中表达水平显著低于体检者血清(P<0.01)。另外,GAPDH作为内参,在筛选lnc RNA的过程中表达稳定,其不受样本年龄、性别、发病情况的影响。结论 lnc RNA PCGEM1在哮喘患者血清中显著低表达,可能成为临床诊断哮喘潜在的新型分子标志物。GAPDH可以作为本实验的循环lnc RNA筛选的内参。
- 李博文高卓梁红艳姜晓峰
- 关键词:哮喘分子标志物
- IL-13在支气管哮喘中的作用机制及治疗靶位被引量:14
- 2017年
- 支气管哮喘是由多种细胞包括气道炎性细胞、结构细胞和多种细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。其发病原因复杂,以反复发作的呼吸困难、气道的高反应性和慢性炎症为特点。细胞因子作为免疫活性细胞中的效应分子,具有的免疫调节作用,诸多学者认为白介素-13(interleukin-13,IL-13)在哮喘发病中扮演重要角色,其拮抗剂有望成为哮喘治疗的新方法,本文欲将IL-13的生物学功能、IL-13在支气管哮喘中的作用机制及干预治疗靶位加以综述,为制定哮喘防治策略、开发新治疗技术提供新思路。
- 李晓霞杨春高光强梁红艳付冰冰姜晓峰
- 关键词:支气管哮喘IL-13治疗靶位
- pPET-SUMF2各亚型的原核质粒构建及蛋白表达被引量:1
- 2014年
- 构建人硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)基因各亚型的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达pPET-SUMF2各亚型的融合蛋白。用EcoRI和XhoI双酶切人SUMF2各种亚型基因及质粒pPET-30a;将2种酶切产物按常规方法连接、转化至大肠杆菌DH5α。挑取菌落培养,提取质粒进行验证。将构建成功的pPET-SUMF2各亚型重组表达质粒转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳分析以及Western blot检测SUMF2各亚型的融合蛋白表达。成功构建了pPET-SUMF2各亚型的重组表达质粒,并成功诱导SUMF2各亚型融合蛋白的表达,Western blot结果显示在预期位置有特异蛋白条带表达,并在BL21(DE3)内表达了SUMF2各亚型的融合蛋白,为进一步研究SUMF2的功能以及SUMF2与哮喘发病的关系奠定了基础。
- 张录梁红艳张婉莹姜晓峰
- 关键词:原核表达载体融合蛋白
- SUMF2基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定
- 2015年
- 目的构建硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)基因过表达慢病毒载体,以便进一步研究SUMF2功能。方法针对人SUMF2 DNA序列设计带酶切位点的引物,PCR法获得目的基因片段;用AgeⅠ和NheⅠ酶双酶切SUMF2基因片段及PLJM1-EGFP载体。用T4连接酶对两种酶切产物进行连接、PCR鉴定、测序。将阳性克隆质粒与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染293T细胞,并荧光显微镜观察EGFP的表达。结果 PCR和测序证实成功构建了SUMF2的慢病毒表达载体,病毒效价为1×108TU/ml。结论成功构建SUMF2-PLJM1-EGFP慢病毒载体,并在293T细胞中得到表达。
- 那春鑫薛丽梁红艳姜晓峰
- 关键词:慢病毒过表达
- 支气管哮喘的细胞因子治疗进展被引量:17
- 2012年
- 哮喘是一种慢性气道炎症性疾病,它的发生和发展与多种细胞因子密切相关。目前哮喘还没有有效的预防和治愈方法,细胞因子抑制剂已经作为潜在的治疗手段而被广泛研究。其中IL-4、IL-5、TNF-α抑制剂的临床研究已经取得了突破性的进展。IL-13和IL-9的临床试验正在研究中。对哮喘动物模型的大量研究发现了胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP),IL-17等新的相关细胞因子,这为哮喘细胞因子治疗提供了新的思路。而多种细胞因子抑制剂的联合使用也为治愈哮喘提供了可能。同时,哮喘个体化医疗的研究为逆转哮喘提供了有力保障。
- 张婉莹姜晓峰梁红艳
- 关键词:支气管哮喘细胞因子
- SUMF1及SUMF2对硫酸酯酶功能的影响被引量:1
- 2015年
- 硫酸酯酶作为硫酸酯类分解代谢酶在人体内起着重要的作用,若其活性出现异常会导致多种疾病。硫酸酯酶的活性需要一个独立的翻译后调节,这个调节由硫酸酯酶的一种调控因子硫酸酯酶调控因子1(SUMF1)来完成。研究发现,硫酸酯酶具有另一种调控因子SUMF2。其中SUMF1既存在于原核生物中又存在于真核生物中,SUMF2只存在于脊椎动物体内,两者对硫酸酯酶的活性调节对生物体内硫酸酯类代谢有着深远的影响。该文对硫酸酯酶、SUMF1和SUMF2的结构、功能及它们之间的相互作用进行综述。
- 刘蕾梁红艳姜晓峰
- 关键词:硫酸酯酶
- pEGFP-C3/SUMF2重组真核表达载体的构建及在人支气管上皮细胞中的表达被引量:3
- 2012年
- 目的构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合的人硫酸酯酶修饰因子2(SUMF2)真核表达载体。方法用RT-PCR技术从人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBEC)获得SUMF2的cDNA模板,PCR方法扩增人SUMF2基因。用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切扩增人SUMF2基因及质粒pEGFP-C3;将2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10;挑取菌落培养,提取质粒,酶切鉴定,测序;将测序正确的重组载体用脂质体法转染HBEC,荧光倒置显微镜观察。提取转染细胞的总蛋白进行Western blot检测。结果扩增出1条约857bp的片段,与预期的SUMF2大小相符。酶切结果显示重组质粒pEGFP-C3/SUMF2被切成2条片段,其中1条为pEGFP-C3载体,另1条为目的片段。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_015411.2)中的序列高度同源。荧光倒置显微镜观察显示,人SUMF2基因主要在内质网表达。Western blot结果显示在相对分子质量为37×103处有一蛋白条带,与预期大小相符。结论成功构建重组表达载体pEGFP-C3/SUMF2,为进一步研究SUMF2对IL-13的作用奠定了实验基础。
- 杨春张婉莹梁红艳姜晓峰
- 关键词:真核表达载体人支气管上皮细胞
- SUMF2对炎症的影响
- 2019年
- 炎症是机体的一种适应性反应,失调时将会对自身机体造成损伤。研究表明许多疾病的发生发展均与炎症的失调有关。硫酸酯酶作为人体不可或缺的蛋白质家族与炎症之间有着密切关联。发热是炎症最主要的表现形式,硫酸酯酶修饰因子2(sulfatase-modifying factor 2,SUMF2)参与硫酸酯酶的激活且与发热密切相关。脂多糖刺激人体后,SUMF2的表达明显降低。SUMF2已被证实与白细胞介素-13(Interleukin-13,IL-13)之间存在相互作用,且能在体外水平抑制IL-13的分泌,IL-13可以通过抑制炎性因子的产生发挥抗炎作用。本文将就硫酸酯酶、SUMF2及其对炎症之间的影响进行综述。
- 刘胜楠刘洋吴传安罗裕旋高菊逸梁红艳刘家仁姜晓峰
- 关键词:硫酸酯酶炎症
- 白介素-13基因多态性与儿童哮喘治疗的研究进展被引量:1
- 2015年
- 哮喘是一种由遗传因素和一些环境因素相互作用导致的具有遗传倾向的复杂疾病,是儿童时期的常见病和多发病。近年来,随着哮喘遗传药理学的发展,遗传异质性对哮喘治疗的影响得到大家的关注。
- 岳冬梅刘丽晓
- 关键词:支气管哮喘白细胞介素-13基因多态性
- SUMF2在支气管哮喘中的作用
- 2017年
- 支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性炎症引起的以气道炎症、气道高反应性和气道重塑为特点的呼吸系统疾病,近些年其发病率呈现明显地上升趋势。随着对哮喘发病机制的深入研究,研究者们发现IL-13在哮喘的发病中作为始动因子起到中轴的作用。有研究表明硫酸酯酶修饰因子2(简称SUMF2)不仅可以与IL-13相结合,且可以抑制IL-13的分泌,可以推测SUMF2在哮喘的发病中起到一定的作用可能为哮喘的治疗提供新的思路,对于改善哮喘患者的生活质量同样具有很高的临床价值。
- 李秀丽徐文龙梁红艳刘家仁姜晓峰
- 关键词:支气管哮喘IL-13相互作用