国家自然科学基金(30360082)
- 作品数:6 被引量:7H指数:2
- 相关作者:阮风雷王文龙呼和巴特尔刘春霞哈斯阿古拉更多>>
- 相关机构:内蒙古农业大学内蒙古大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛皮蝇HypoderminA基因在大肠杆菌中的表达被引量:2
- 2008年
- 从牛皮蝇Ⅱ期幼虫中提取总RNA,进行RT-PCR扩增牛皮蝇Hypodermin A基因。将扩增基因进行克隆测序,构建原核表达载体pET30-HA,转化大肠杆菌BL21(DE3)。用IPTG诱导表达,得到表达量达到全菌蛋白35%以上的特异性蛋白。SDS-PAGE分析表明,表达产物大部分以包涵体形式存在。Western-blot检测结果表明,获得的重组蛋白为重组Hypodermin A,具有较好的免疫活性。
- 王文龙哈斯阿古拉阮风雷呼和巴特尔赵云刚
- 关键词:牛皮蝇HYPODERMIN原核表达WESTERN-BLOT
- 纹皮蝇Hypodermin B基因在大肠杆菌中的表达
- 2007年
- 从纹皮蝇期幼虫中提取总RNA,RT-PCR扩增纹皮蝇Hypodermin B(HB)基因.将扩增基因进行克隆测序,构建原核表达载体pET30-HB,转化大肠杆菌BL21(DE3).用IPTG诱导表达后,得到表达量达全菌蛋白30%以上的特异性蛋白.SDS-PAGE分析表明表达产物主要以包涵体形式存在.Western blotting检测结果表明,获得的重组蛋白为重组Hypodermin B,具有较好的反应原性.
- 王文龙哈斯阿古拉阮风雷呼和巴特尔张海龙侯振宇
- 关键词:纹皮蝇HYPODERMIN原核表达WESTERNBLOTTING
- 呼和浩特地区奶牛牛皮蝇蛆病防治时机的研究被引量:2
- 2006年
- 王文龙巴开明阮风雷呼和巴特尔
- 关键词:牛皮蝇蛆病奶牛农牧交错区
- 牛皮蝇蛆病间接ELISA诊断方法的建立被引量:2
- 2011年
- 以纹皮蝇Ⅰ期幼虫粗提蛋白为包被抗原,通过方阵试验确定了血清最佳稀释倍数为80倍,抗原最佳包被浓度为26.64μg/mL,并对其特异性、敏感性和重复性进行了试验,建立了牛皮蝇蛆病间接ELSIA诊断方法。再以建立的ELISA诊断方法对采自内蒙古地区的233份牛血清进行了检测。结果表明,所建立的牛皮蝇蛆病间接ELISA诊断方法具有较好的特异性、敏感性和可重复性,可用于牛皮蝇蛆病的血清学检测。
- 王文龙阮风雷刘春霞初一鑫呼和巴特尔
- 关键词:牛皮蝇蛆病间接ELISA
- 纹皮蝇Hypodermin C基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立
- 2011年
- 为建立牛皮蝇蛆病的抗体检测方法,本研究从纹皮蝇Ⅰ期幼虫中提取总RNA,采用RT-PCR扩增了Hypodermin C(HC)基因。将该基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+)中进行原核表达。获得了31 ku以包涵体形式表达的重组HC蛋白。Western blot结果表明表达产物能够与阳性牛血清IgG特异性结合,具有良好的抗原活性。以纯化的重组HC作为包被抗原建立了牛皮蝇蛆病间接ELISA诊断方法,实验确定抗原最佳包被浓度为15.63μg/mL,血清最佳稀释度为1∶80,阳性标准判定为待检血清OD值>0.256。所建立的诊断方法具有较好的特异性、敏感性和可重复性。应用该检测方法对230份临床血清进行检测,阳性率为20.6%。研究结果表明该间接ELISA方法是一种有效的牛皮蝇蛆病血清学检测方法。
- 王文龙刘春霞阮风雷呼和巴特尔
- 关键词:纹皮蝇HYPODERMIN原核表达间接ELISA
- 奶牛牛皮蝇蛆病最佳防制时机的研究被引量:3
- 2006年
- 本课题组于2005年3月~2006年3月完成了对内蒙古东部奶牛带(以兴安盟地区为主)牛皮蝇蛆病的调查研究。结果表明牛皮蝇蛆病感染率、感染强度都已明显下降,但仍有本病病原——牛皮蝇存在,且为混合感染,纹皮蝇蛆与牛皮蝇蛆的感染比例为4.1:1,优势蝇种是纹皮蝇。2种病原(牛皮蝇和纹皮蝇)Ⅱ期幼虫12月末已基本全部离开食道。在该地区该病的最佳防制时机为7月末~9月初。
- 阮风雷王文龙呼和巴特尔
- 关键词:牛皮蝇蛆奶牛