广东省医学科学技术研究基金(B2010247)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：杨琰黄颢张凤兰李敏芳卢实更多>>
- 相关机构：广东医学院附属医院华中科技大学武汉工业学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 叶酸偶联率对叶酸-壳聚糖纳米粒靶向抗瘤性的影响被引量：4
- 2011年
- 目的研究在不同叶酸偶联率下,叶酸-壳聚糖纳米粒对宫颈癌细胞系HeLa凋亡的影响。方法还原胺法合成不同叶酸偶联率的叶酸-壳聚糖复合物,紫外分光光度仪测定叶酸偶联率。将复合物包裹绿色荧光蛋白表达基因,电子显微镜观察纳米粒形态及大小。转染HeLa细胞7d后流式细胞仪测定转染效率及凋亡率。结果通过改变叶酸及壳聚糖不同的反应比,共合成四种不同偶联率的叶酸-壳聚糖复合物,偶联率依次是3%、7.5%、11.2%和17%。透射电子显微镜显示叶酸-壳聚糖-DNA纳米粒为近似球型,表面光滑、均质的纳米粒。上述纳米粒粒径分别为(289.6±0.7)nm、(78.1±0.3)nm、(186.6±0.6)nm和(212.2±0.5)nm。转染7d后叶酸偶联率为7.5%的纳米粒转染效率最高,与未偶联纳米粒相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。凋亡率与未偶联纳米粒相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论经叶酸偶联后,可以提高叶酸-壳聚糖纳米粒的HeLa细胞摄取量,增强其促肿瘤细胞凋亡作用,叶酸偶联率对纳米粒粒径、转染效率及细胞凋亡有一定影响。
- 杨琰赵颖张凤兰黄颢张团英张红菱
- 关键词：叶酸壳聚糖靶向HELA细胞
- 壳聚糖-滔罗定纳米凝胶对CO_2气腹后HeLa细胞侵袭性的抑制作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨纳米载体壳聚糖(chitosan,CS)包裹新型抑癌剂滔罗定(taurolidine,TRO)所合成的纳米凝胶对CO2气腹后HeLa细胞侵袭性的抑制作用。方法以0.02%的壳聚糖为纳米载体,制备滔罗定凝胶,采用扫描电镜观察新鲜制备的纳米凝胶形态。以终浓度为0.2mg/mL的壳聚糖-滔罗定凝胶处理HeLa细胞24h后,Transwell小室法检测细胞处理前后侵袭及迁徙能力的改变。结果所制备的壳聚糖-滔罗定凝胶为匀质、透明的胶样液体,电镜下凝胶为大量纤维交织形成支架的匀质结构,支架间空隙直径为50～300μm。CO2气腹后HeLa细胞侵袭及迁徙的数目为(69.2±1.5)和(90.5±4.1),经壳聚糖-滔罗定凝胶处理后,数目分别减少到(20.8±2.5)和(61.3±2.8),差异有统计学意义(均P<0.05)。结论壳聚糖-滔罗定凝胶能很好抑制CO2气腹后HeLa细胞的侵袭及迁徙特性,有可能成为腹腔镜CO2气腹后减少肿瘤转移的较好的治疗方式。
- 杨琰黄颢严兆华吕炎张凤兰
- 关键词：二氧化碳气腹壳聚糖
- 叶酸受体-α在卵巢癌耐药细胞株中的表达及其介导的多药耐药的靶向逆转被引量：3
- 2011年
- 目的:研究叶酸受体-α(folic acid receptor-α,FR-α)在卵巢癌多药耐药细胞株中的表达水平,并探讨FR-α靶向的MDR1小干扰RNA(siRNA)纳米粒对卵巢癌多药耐药细胞的逆转效果。方法:采用体外浓度梯度递增法建立卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3-ts,应用激光共聚焦法检测FR-α的表达水平。复凝聚法将叶酸修饰壳聚糖载体包裹靶向MDR1的PGPU6/GFP/Neo/PshRNA真核表达质粒(PshRNA-MDR1),形成叶酸修饰壳聚糖PshRNA-MDR1纳米粒(FA-CS-PshRNA)。采用RT-PCR、Western blot检测叶酸修饰前后,纳米粒转染细胞后MDR1 mRNA及蛋白的表达,MTT法检测SKOV3-ts半数抑制浓度(IC50)的变化。结果:激光共聚焦法显示,耐药细胞株SKOV3-ts胞膜层有FR-α强表达,经叶酸修饰后,FA-CS-PshRNA纳米粒较CS-PshRNA能更有效降低靶细胞SK-OV3-ts的靶基因MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达(P<0.01),并逆转SKOV3-ts细胞针对紫杉醇的IC50(0.3830±0.0096 vs 0.0353±0.0006,P<0.01)。结论:经FR-α介导,FA-CS-PshRNA能更有效敲除MDR1的表达,靶向逆转卵巢癌多药耐药。
- 杨琰卢实钟俊李敏芳王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤多药耐药
- 叶酸受体介导的壳聚糖-pGPU6/GFP/Neo纳米粒靶向转染肿瘤细胞的特点被引量：2
- 2010年
- 目的:研究叶酸受体介导下的壳聚糖-pGPU6/GFP/Neo纳米粒在叶酸受体表达程度不同的肿瘤细胞中的靶向转染特点。方法:制备叶酸偶联壳聚糖pGPU6/GFP/Neo纳米粒(folate-chitosan-pGPU6/GFP/Neo,FA-CS-DNAnano)和壳聚糖pGPU6/GFP/Neo纳米粒(chitosan-pGPU6/GFP/Neo,CS-DNAnano),红外光谱扫描鉴定其合成,透射电镜观测纳米粒的形态特征及直径大小。纳米粒转染叶酸受体表达阳性的人类卵巢癌细胞系SKOV3、乳腺癌细胞系MCF-7和宫颈癌细胞系HeLa,流式细胞术检测细胞转染效率,MTT法检测纳米粒的细胞毒性。结果:成功制备FA-CS-DNAnano和CS-DNAnano,纳米粒接近球型、表面光滑、结构均匀;FA-CS-DNAnano直径为(78.1±0.3)nm,CS-DNAnano直径为(138.4±0.7)nm。FA-CS-DNAnano在SKOV3和MCF-7细胞的转染效率明显高于CS-DNAnano[(24.3±0.7)%vs(0.7±0.1)%,(16.8±1.2)%vs(0.3±0.1)%;均P<0.01],而在HeLa细胞中两者转染效率无明显差异(P>0.05)。FA-CS-DNAnano转染前后MCF-7、SKOV3和HeLa细胞的活力分别为(87.9±2.4)%、(91.4±1.0)%、(97.4±1.1)%和(63.0±2.5)%、(90.6±1.3)%、(99.3±1.6)%。结论:对于叶酸受体强阳性表达的SKOV3和MCF-7肿瘤细胞,叶酸偶联壳聚糖是良好的靶向基因转运载体。
- 杨琰卢实李敏芳王泽华
- 关键词：叶酸壳聚糖卵巢肿瘤宫颈肿瘤
