吉林省自然科学基金(20030541-4)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：东北师范大学吉林大学第一医院长春市双阳区医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- s-lap/GFP融合蛋白在Hela细胞中的表达与定位被引量：2
- 2005年
- 目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s- lap/ GFP融合基因转入 Hela细胞中 ,用荧光显微镜观察其表达。结果 :s- lap/ GFP重组质粒序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜显示 ,在转染 GFP基因的 Hela细胞中 ,荧光呈网状均匀分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染 s- lap/ GFP融合基因的 Hela细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 :s- lap/ GFP融合蛋白可在人 Hela细胞中表达 ,并主要定位于细胞核。
- 宋忆淑宋志宇费向东贺冰李玉新
- 关键词：HELA细胞
- 新基因s-lap编码区的克隆及其重组表达质粒PHB/s-lap的构建被引量：2
- 2004年
- 目的 :克隆新基因 s- lap编码区序列并构建其重组表达质粒。方法 :利用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR )方法 ,以可见光损伤早期的培养的猪视网膜色素上皮 (RPE)细胞 ds c DNA为模板 ,扩增新基因 s- lap编码区序列 ;利用基因重组技术构建 PHB/ s- lap重组表达质粒。结果 :经测序证实获得了正确的新基因 s- lap编码区序列 ,酶切鉴定及 DNA序列分析表明已经将 s- lap基因编码区序列克隆到 PHB表达载体 ,成功地构建了 PHB/ s- lap重组表达质粒。结论 :成功地克隆了新基因 s- lap编码区序列 ,并构建了其重组表达质粒 PHB/ s- lap。
- 宋忆淑宋志宇费向东贺冰李玉新谭大鹏
- 关键词：克隆
- 猪RPE细胞原代培养及其透射电镜观察被引量：2
- 2006年
- 目的建立视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium RPE)细胞体外培养及其超微结构研究方法,为在细胞和分子水平上对RPE细胞进行研究奠定基础。方法采用酶消化法对RPE细胞进行取材和培养,利用光镜和透射电镜观察及分析培养的RPE细胞。结果建立了可获得大量RPE细胞的培养方法,对培养的细胞进行了系统的观察和分析培养的细胞贴壁生长,细胞内可见大量黑色素颗粒。结论成功的进行了RPE细胞培养,为各种损伤致RPE细胞形态学改变的研究奠定了基础。
- 张秋阳宋志宇宋忆淑闫敬军
- 关键词：色素上皮细胞培养透射电镜
