国家自然科学基金(81171131)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：任卫东梁秋实李振刘丽波刘云会更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科学技术计划项目辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- EMAP-Ⅱ通过LKB1/AMPK/mTOR信号通路增加BTB的通透性被引量：2
- 2015年
- 目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对体外血肿瘤屏障(BTB)通透性的影响及可能机制。方法建立体外BTB模型,EMAP-Ⅱ处理后,millipore电阻测量系统检测跨内皮细胞阻抗(TEER)值,采用Western blot方法检测p LKB1/LKB1、p AMPK/MAPK和p-m TORC1/m TORC1的蛋白表达水平;分别应用LKB1抑制剂radicicol、AMPK抑制剂compound C和m TORC1激活剂IGF1进行预处理后再给予EMAPⅡ,检测体外BTB模型的TEER值,Western blot方法检测紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的蛋白表达水平。结果与EMAP-Ⅱ0 h组相比,EMAP-Ⅱ可明显降低体外BTB模型的TEER值,增加p-LKB1/LKB1和p-AMPK/AMPK的表达水平,降低p-m TORC1/m TORC1的表达水平,以上指标在EMAP-Ⅱ作用1 h时效果最明显;radicicol、compound C和IGF1预处理能够部分阻断EMAP-Ⅱ的作用,使体外BTB模型的TEER值及紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平明显增加。结论 EMAP-Ⅱ能明显增加体外BTB模型通透性,其机制可能与激活LKB1/AMPK/m TOR信号通路相关。
- 刘啸白刘丽波陈方周刘云会薛一雪李振李志清商秀丽
- 关键词：血肿瘤屏障LKB1AMPK
- PI3K信号通路抑制剂在人乳腺癌细胞侵袭的作用及可能机制被引量：1
- 2015年
- 目的研究磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路抑制剂在人乳腺癌细胞侵袭中的作用及可能机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞,利用Transwell小室建立体外侵袭模型。阴性对照组为24孔板下室加入不含细胞的空白无血清培养基,对照组和实验组为下室内加入含10%胎牛血清的培养基。然后在实验组Transwell上室加入抑制浓度为10μM的PI3K信号通路抑制剂LY294002,观察MDA-MB-231细胞侵袭能力的变化情况。同时利用Western blot方法检测ICAM-1的表达情况以及利用明胶酶谱分析基质金属铁蛋白酶-2及9(MMP-2/9)的活性改变。结果 LY294002处理后侵袭的MDA-MB-231细胞数量明显减少,同时ICAM-1的表达水平、MMP-2及MMP-9的活性受到显著抑制。结论 PI3K信号通路抑制剂抑制乳腺癌细胞侵袭可能与降低粘附分子ICAM-1表达及MMP-2和9活性相关。
- 梁秋实任卫东
- 关键词：乳腺癌ICAM-1磷脂酰肌醇-3-激酶
- 蒿甲醚对人乳腺癌细胞的增殖抑制作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究蒿甲醚对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖活性、凋亡的影响及其机制。方法利用浓度为0,2.5,5,10,20,40,80及160μmol/L的蒿甲醚孵育24h。利用CCK8法测定细胞增殖抑制率。然后用浓度为0、20、40及80μmol/L的蒿甲醚培养MDA-MB-231细胞24h,利用Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡及细胞周期。最后利用Western blot法检测MDA-MB-231细胞活化caspase-3及8的表达水平。结果蒿甲醚使MDA-MB-231细胞的增殖活性受到显著抑制,同时随着浓度升高抑制作用增强。与对照组相比,蒿甲醚显著促进MDAMB-231细胞的凋亡并使细胞周期维持在G+M期,显著上调caspase-3及8的活化水平。结论蒿甲醚对人乳腺癌2MDA-MB-231细胞有潜在的治疗作用。
- 梁秋实任卫东
- 关键词：蒿甲醚乳腺癌增殖凋亡
- 内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性的信号机制
- 2014年
- 目的探索内皮一单核细胞激活多肽-Ⅱ（endothelial monocyte activating polypeptide-II，EMAP-II）增强血肿瘤屏障（blood—tumor barrier，BTB）通透性的相关信号机制。方法采集出生3—5d的Wistar胎鼠的大脑皮质，应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后，接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells，BMECs）原代培养；将BMECs与C6脑胶质瘤细胞共培养，构建体外BTB模型；共培养后的BMEC被随机分成5组（每组6例）：对照组、EMAP-Ⅱ组、H7＋EMAP—11组、C3 exoenzyme＋EMAP-II组和C3exoenzyme＋H7＋EMAP—II组。测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量评估各组BTB通透性变化情况；Western blot法检测BMECs上紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的表达水平变化；免疫荧光法检测OC-cludin和ZO-1在BMECs上的分布与表达。Western blot法检测BMECs上肌球蛋白轻链（myosin light chain，MLC）和磷酸化肌球蛋白轻链（phosphomyosin light chain，pMLC）的表达水平变化。结果与对照组相比较，EMAP-II组BTB的通透性明显增高，BMECs上occludin和ZO-1的表达水平明显降低，pMLC的表达水平明显增高；EMAP—II的上述作用受到蛋白激酶c（protein kinaseC，PKC）抑制剂H7或（和）RhoA抑制剂C3exoenzyme预处理的明显抑制。结论信号分子PKC和RhoA在EMAP—II增强BTB通透性过程中发挥着重要的作用，信号通路PKC—pMLC和RhoA—pMLC参与调控该过程。
- 李振刘啸白刘云会薛一雪王萍刘丽波
- 关键词：血肿瘤屏障通透性信号机制
