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一个家蝇抗菌肽的分离纯化被引量：4: 2007年; 以野生家蝇干燥幼虫为原料,在常规的生化提取基础上,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)法进一步纯化,并结合电洗脱技术,利用灵敏的杀菌活性检测手段,从家蝇抗菌肽总组分中分离纯化出1个20 ku的抗菌肽,对苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄葡萄球菌均有杀灭作用。; 钟雅付康陈正望陆婕; 关键词：抗菌肽抗菌活性反相高效液相色谱电洗脱

富甘氨酸果蝇抗菌肽SK_(66)对子宫颈癌细胞Hela增殖的研究被引量：1: 2012年; SK66是一个编码了N端为丝氨酸、C端为赖氨酸且含有66个氨基酸残基的富甘氨酸果蝇抗菌肽。SK66能杀灭宫颈癌细胞Hela,经SK66处理后子宫颈癌细胞Hela的贴壁性很快被破坏,大量细胞悬浮并死亡。通过MTT试验,发现SK66能够显著抑制子宫颈癌细胞Hela的增殖。采用膜片钳技术,研究表明SK66能在DRG细胞上形成阳离子通道。这说明SK66对癌细胞的杀灭机制可能为细胞膜出现大量穿孔、原生质泄漏,细胞破裂死亡。; 冯志国刘慧娟李涛李涛; 关键词：果蝇膜片钳阳离子通道

酪蛋白空肠灌注对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺外分泌的影响被引量：3: 2009年; 目的观察空肠内灌注酪蛋白对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠胰腺外分泌的影响，并初步探讨其神经机制。方法30只SD大鼠按随机数字法分为对照组、ANP组和肠内营养组。后2组以胰管内逆行注射牛磺胆酸钠法制作ANP模型。造模后24h空肠插管分别灌注酪蛋白溶液（肠内营养组）和生理盐水（对照组和ANP组），每15min收集胰液1次，共6次，记录胰液分泌量和检测胰液蛋白含量。取大鼠延髓孤束核，采用免疫组化法检测c—Fos蛋白表达。结果ANP组和肠内营养组组内各时间段之间胰液分泌量无显著差别，两组相应时间段之间胰液分泌量也无显著差别，但均显著低于对照组对应时间段的胰液分泌量（P〈0．05）。对照组、ANP组和肠内营养组空肠灌注过程中胰液蛋白含量水平稳定，不同时间段间无明显差异，但ANP组和肠内营养组空肠灌注后0～15min、15—30min、30～45min、75～90min时间段内胰液蛋白含量均低于对照组（P〈0．05）。肠内营养组灌注后延髓孤束核c-Fos蛋白表达阳性，而对照组和ANP组延髓孤束核c—Fos表达阴性。结论空肠内酪蛋白灌注可促进延髓孤束核c—Fos表达，但不增加胰液分泌量和胰液蛋白含量。; 赵航李兆申黄丹丹龚燕芳高峻吴洪玉满晓华许爱芳; 关键词：急性坏死性肠道营养孤束核

弱酸性家蝇蛆抗菌肽MD_(7095)的分离纯化及性质研究被引量：26: 2006年; 家蝇抗菌肽多是碱性蛋白,目前尚无弱酸性家蝇抗菌肽的报道。通过稀醋酸低温浸提,海藻酸吸附,稀盐酸低温洗脱、盐析、Sephadex G25凝胶过滤和CMC23弱阳离子交换柱层析等方法,利用灵敏的杀菌活性检测手段,从家蝇蛆(Musca domesticalarvae)中分离纯化出一组弱酸性抗菌肽,对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)等革兰氏阳性菌和几种革兰氏阴性菌有强烈的杀灭作用,有极强的耐热、耐冻融的特性。通过电洗脱方法进一步纯化出抗菌肽MD7095,质谱测定其分子量7095Da,IEF电泳测得其等电点5.59,经肽质量指纹谱(PMF)鉴定为一新肽。扫描电镜超微结构观察表明,弱酸性家蝇蛆抗菌肽对苏云金芽孢杆菌的杀菌机制主要是使细胞膜穿孔,内容物外泄,最终使细菌完全解体死亡。; 陆婕汪俊汉钟雅赵燕英陈正望柳林; 关键词：抗菌肽抗菌活性

硫氧还蛋白促使乳腺癌MCF-7细胞进入S期被引量：2: 2008年; 目的研究硫氧还蛋白1(thioredoxin-1,Trx-1)对细胞周期的影响。方法用维生素C刺激乳腺癌细胞MCF-7,或者用pcDNA-Trx转染MCF-7使细胞中的Trx-1表达升高,另外在细胞培养液中加入不同浓度的Trx-1;用流式细胞仪检测细胞中进入S期细胞的比例。结果维生素C的刺激使细胞内Trx-1表达上升,更多的细胞进入到S期。转染pcDNA-Trx的细胞Trx-1的表达上升,进入S期的细胞比例明显增加。将Trx-1蛋白加入到培养液中后,进入S期的细胞比例明显地随Trx-1浓度提高而升高。结论无论在细胞外还是细胞内,Trx-1水平的上升均会促使细胞进入S期。; 陈孝平陈正望; 关键词：硫氧还蛋白细胞周期 MCF-7细胞

细胞因子Daintain/AIF-1的纯化及其单克隆抗体的制备与鉴定: 2007年; 由猪小肠中纯化鉴定Daintain/AIF-1,并以其为免疫原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术制备得到4株稳定分泌抗体的单克隆细胞株。对单抗效价、亚类、亲和常数进行分析,4株单抗都属于IgG1(κ)。又经West-ern blot证实,所制备的抗体能特异性与Daintain/AIF-1结合。; 赵燕英王建和付康陈正望陆婕; 关键词：单克隆抗体 ELISA

纳豆激酶纯化及性质研究被引量：4: 2005年; 以蒸煮后的大豆为原料通过纳豆菌发酵,生产纳豆激酶.改进纯化工艺以酸法提取和凝胶过滤纯化出比活性为160.8 IU/mg的酶制品.该酶制品不仅对纤维蛋白有很好的溶纤作用,而且对大鼠血纤维(拟血栓)也有很好的溶纤活性,实验还证明该酶制品对大鼠新鲜血液有很好的抗凝性能,尤其是该酶制品在pH值为2.45和经胃蛋白酶作用后仍保持较高的活力.同时,该方法制备工艺简便,有0.6%的高回收率,故本方法提取的纳豆激酶制品有望开发成为新型口服溶栓、防栓制剂,以供医疗和保健应用.; 陆婕付正纲陈正望; 关键词：纳豆激酶溶栓抗凝

狗小肠新生物活性肽的分离纯化及结构测定被引量：7: 2005年; 研究了一种新的胃肠肽的分离纯化及其部分氨基酸序列测定.沸水处理后的狗小肠经醋酸提取、海藻酸吸附、盐酸洗脱、氯化钠盐析和乙醇沉淀,再经SephadexG-25(fine)层析和两次RP-HPLC分离,从中纯化出一个热稳定多肽.用Tris-Tricine-SDS-PAGE鉴定其相对分子质量约为4kD.该肽经胰酶水解,产物片断经RP-HPLC分离后,取其中之一主峰经CapLC-ESI-MS-MS(Q-TOF2)质谱仪测定氨基酸顺序为:T-E-Y-T-A-L-N-V-L-A-T-T-E-E-N-G.蛋白质数据库(GenBank和SWISS-PROT)查寻证明:此肽为首次发现的新多肽,正在进一步研究其生物学功能.; 陈正望蔡小丽顿新鹏; 关键词：胃肠肽类激素氨基酸序列

Polypeptide Daintain as a New Biomarker for Detecting Breast Tumor被引量：1: 2008年; Daintain, a novel bioactive peptide produced and secreted by macrophages, was expressed in breast tumor tissues. The spatial distributions of daintain in 66 breast tumor specimens were investigated with immuno-histochemistry method. Reverse transcription polymerase chain reaction （RT-PCR） and in situ hybridization inspection system were also used to detect daintain in 45 cases of malignant breast tumors. The final results show that 93% high positive responses to daintain on breast cancer tumors. RT-PCR demonstrated that, no smear of daintain transcripted in benign tissues was found, and light smear in peri-cancer tissue was observed. Distribution of daintain was distinguishable among benign tissues, hyperplasia tissues, immature hyperplasia and invasive breast cancer, which can be used to mark the progression of the malignant lesion development. We conclude that the expression of daintain is up-regulated in breast cancers, which indicates that the peptide is closely associated with the disease progression. So daintain could be used as the biomarker for detecting breast cancer.; LI FafangXIA HeshunCHEN Zhengwang; 关键词：IMMUNO-HISTOCHEMISTRY

家蝇蛆抗菌肽提取工艺研究被引量：24: 2007年; 蝇蛆抗菌肽多有广谱抗菌、抗癌等功能，是很好的天然抗菌药物来源，但由于得率较低，目前对其产品开发的研究较少。以家蝇Musca domestica干蝇蛆为原料，利用加热．层析法和海藻酸吸附法2种工艺提取蝇蛆抗菌肽。结果表明：加热．层析法快速、简便，抗菌肽提取得率达0．26％，是海藻酸吸附法提取抗菌肽得率的5．2倍。提取的家蝇抗菌肽主要是分子量6．2—17．2kD、等电点5．59—5．91的弱酸性小分子多肽，其热稳定性高，能杀灭枯草杆菌Bacillus subtilis等多种革兰氏阳性菌。加热．层析法能有效去除外源性蛋白酶，保证肽类产品的稳定性，同时还能提取出非蛋白类的抗菌成分，提示其对开发具有高附加值的抗菌产品将会有良好的应用前景。; 陆婕钟雅柳林付康陈正望; 关键词：家蝇抗菌肽资源利用抗菌产品

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