山东省自然科学基金(Y2008C08)
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL的构建及鉴定
- 2010年
- 目的:构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL并鉴定,为下一步利用纳米载体介导FL基因移植作用于结肠癌细胞的体内实验奠定基础。方法:应用基因合成和克隆技术构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL,并进行酶切鉴定及序列测定,以检测其核苷酸序列与设计是否完全一致。结果:重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL经酶切鉴定分析,琼脂糖凝胶电泳鉴定可见清晰地切出与TRAIL基因大小相符的片段并与DNA marker相符,同时进行序列测定,证实其核苷酸序列与设计完全一致。结论:成功构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL并得到正确鉴定,为下一步结肠癌的基因治疗打下实验基础。
- 孙念峰孟庆义田爱玲王瑞华刘兆轩李博
- 关键词：重组质粒TRAIL基因基因治疗
- 重组质粒pEGFP-c1-FLT3L的构建及鉴定
- 2011年
- 目的:构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L并鉴定,为下一步利用纳米载体介导FL基因移植作用于结肠癌细胞的体内实验奠定基础。方法:应用基因合成和克隆技术构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L,并进行酶切鉴定及序列测定,以检测其核苷酸序列与设计的是否完全一致。结果:重组质粒pEGFP-c1-FLT3L经酶切鉴定分析,琼脂糖凝胶电泳鉴定可见清晰地切出与FLT3L基因大小相符的片段并与DNAmarker相符,同时进行序列测定,证实其核苷酸序列与设计完全一致。结论:成功构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L并得到正确鉴定,为下一步结肠癌的基因治疗打下实验基础。
- 孙念峰孟庆义田爱玲王瑞华刘兆轩李博
- 关键词：重组质粒基因治疗
- 纳米脂质体介导酪氨酸激酶受体3配体基因转染树突状细胞对结肠癌细胞凋亡的作用
- 2011年
- 目的观察利用阳性纳米脂质体介导的基因治疗联合免疫治疗对结肠癌细胞的治疗作用。方法应用基因克隆技术分别构建含有绿色荧光蛋白报告基因的重组质粒（pEGFP），并依据静电吸附原理制备携带基因的阳离子纳米脂质体，再将转染阳性的树突状细胞（DC）移植作用于结肠癌细胞。结果成功构建含有绿色荧光蛋白报告基因的重组质粒，并得到酶切鉴定和序列测定证实。携带酪氨酸激酶受体3配体（FL）基因的阳离子纳米脂质体成功转染DC，发现基因在细胞内得到很好表达，且随着培养时间的增加，蛋白表达量有所增加，72h时表达量最高。基因移植后发现对照组肿瘤体积增长最快，FL基因组肿瘤体积增长较慢；FL基因组肿瘤细胞凋亡率和死亡率明显高于对照组（P〈0．05）；而pEGFP组和对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论阳离子纳米脂质体作为基因载体具有一定优越性。基因治疗联合免疫治疗在结肠癌治疗中具有重要意义。
- 孙念峰孟庆义田爱玲王瑞华刘兆轩胥莉
- 关键词：基因治疗结肠癌
