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活性污泥厌氧发酵产氢能力的研究: 氢气作为一种理想的可替代传统化石能源的新型能源物质,已受到世界的公认。利用厌氧微生物的产酸发酵过程进行氢气生产的生物技术,受到人们的充分重视。根据任南琪等人的报道,乙醇型发酵无论从产氢量和产甲烷相的底物方面,均有较高的优...; 吴薛明申宁何冰芳; 关键词：厌氧发酵产氢乙醇型发酵产氢能力厌氧活性污泥; 文献传递

质粒高通量快检方法的改进: 质粒作为基因工程的重要载体,对它的鉴定和分析方法的探索一直吸引着许多科学家的注意。其中琼脂糖凝胶电泳的方法己成为快速鉴定和分析质粒的基本方法。在此基础上,Wayne M.Barnes发明了牙签法小量制各和鉴定质粒DNA的...; 曹学松林涛李霜欧阳平凯何冰芳; 关键词：高通量基因工程菌; 文献传递

Burkholderic cepecia 1003产海因酶固定化条件被引量：6: 2005年; 海因酶是利用海因酶法制备手性氨基酸的关键酶。采用Eupergit C、Eupergit C250 L及其氨基化后的载体作为固定化介质,对酶液pH值、蛋白浓度、固定化时间以及EDC用量等参数对海因酶固定化过程的影响进行研究,并在实验范围内,得到了上述参数的最优值。研究表明,环氧基载体的最适固定化条件为:酶液pH值为7.0,酶液蛋白质量浓度为0.4 mg/mL,固定化时间为20 h;氨基载体最适固定化条件为:酶液pH值为8.0,酶液蛋白质量浓度为0.4 mg/mL,固定化时间为10 h,EDC用量:Eupergit C(NH2)为70μL,Eupergit C250 L(NH2)为120μL。其中以Eupergit C250 L为固定化载体,海因酶的活性回收率可高达87%,且固定化酶的稳定性也较好,酶活半衰期长达2 500 h左右,具有较好的稳定性。; 马哲姚忠竺凯徐晓滢韦萍; 关键词：海因酶固定化

氨基载体EAH sepharose 4B固定化D-海因酶的条件及固定化酶的酶学性质: EAH sepharose 4B是一种带有一段手臂链的凝胶型氨基载体,常用于亲和吸附。本研究采用自行筛选的海因酶高产菌株Burkholderia cepecia njut01发酵产酶,经过硫酸铵分级沉淀、phenyl s...; 徐晓滢马哲刘辉姚忠; 关键词：D-海因酶固定化; 文献传递

芽孢乳杆菌发酵葡萄糖制备D(-)-乳酸的研究被引量：12: 2004年; 在国内首次报道了发酵法制备D( ) 乳酸 ,采用芽孢乳杆菌 (Sporolactobacillussp )从葡萄糖发酵制备D 乳酸。该发酵为微需氧 ,发酵培养基组成 (g/L) :葡萄糖 6 0 ,酵母膏 6 ,玉米浆 5 ,NH4NO3 l,麸皮 2 ,NaH2 PO44,CaCO3 4 0 ,发酵液的初始pH为 7 0。在最佳条件下 ,37℃发酵 72h可产 4 0 7g/L的D 乳酸 ,葡萄糖转化率 6 7 83%。通过离子配位色谱分析 ,产物的D 乳酸光学纯度为 96 0 4 %e e 。; 丁子建柏中中孙志浩欧阳平凯何冰芳; 关键词：D-乳酸葡萄糖发酵

海因酶法制备D-苯丙氨酸的酶催化过程动力学被引量：5: 2004年; 采用自行筛选的兼有海因酶和N 氨甲酰氨基酸水解酶活性的Burkholderiacepecia 10 0 3菌种 ,利用海因酶法大规模制备D 苯丙氨酸 ,对其中涉及的各过程的动力学参数进行了测定 .结果表明 :L 苄基海因的消旋速率常数为 3 975× 10 -3 min-1;海因酶的米氏常数为 16 7894mmol·L-1,最大反应速率为 0 6 12 7mmol·L-1·min-1;N 氨甲酰氨基酸水解酶的米氏常数为 0 82 6 88mmol·L-1,最大反应速率为 4 82 8× 10 -4mmol·L-1·min-1.对DL 5 苄基海因的溶解、L 苄基海因的消旋、D 海因的水解开环及其中间产物 (N 氨甲酰苯丙氨酸 )的水解脱酰氨过程建立了动力学模型 ,并在此基础上进行了动力学参数显著性分析和优化 .结果表明 :对于这一级联酶转化反应 ,D 海因酶的水解反应是快速反应 ,而N 氨甲酰氨基酸脱氨甲酰的反应速率极小 ,是该过程的控制步骤 .提高氨甲酰水解酶的活力将有助于提高总体的转化速率 ,而L 海因的消旋速率则是影响外消旋苄基海因转化率的主要因素 .; 韦萍姚忠李家璜欧阳平凯; 关键词：海因酶 D-苯丙氨酸酶催化动力学

Eupergit C_(250L)固定化D-海因酶及其催化性质被引量：2: 2006年; D-海因酶是海因酶法制备D-氨基酸的关键酶。利用Burkholderic cepecia1003菌发酵产酶,所得海因酶纯化后,以Eupergit C250L为载体进行共价固定化。分别考察了酶液蛋白浓度、固定化时间对蛋白固定量和酶活回收率的影响以及固定化前后海因酶催化性质的变化。结果表明:较高的酶液蛋白浓度和较长的固定化时间均有助于改善海因酶的固定化效果;固定化可显著提高海因酶的最适作用温度,但对其最适作用pH影响不大;固定化后海因酶对D,L-BH和MH的米氏常数均有较大幅度的降低。固定化酶反应器的实验表明:40℃下,底物(D,L-BH)1.0 g.L-1,体积流速1.0 mL.min-1,经21 h转化,产物N-Phe质量浓度可达0.47 g.L-1,转化率达43.21%。; 丁成勇徐晓滢马喆刘辉姚忠; 关键词：海因酶固定化

微波辐射下5-取代-2-硫代海因衍生物的合成被引量：1: 2008年; 微波辐射下,由硫氰酸铵与α-氨基酸通过两步反应合成了11种5-取代-2-硫代海因衍生物,并用1HNMR,IR和元素分析确证了中间产物和终产物的结构.对比常规加热方法,微波辐射具有反应时间短(4min),每步反应产率高(85%～93%)的优点.同时对合成化合物2h的反应历程进行了讨论.; 周佳栋曹飞武红丽韦萍; 关键词：硫氰酸铵 Α-氨基酸微波辐射

吲哚甲基海因的制备Ⅱ.低碱体系加氢过程被引量：2: 2004年; 通过对吲哚亚甲基海因碱性溶液的紫外光潜和溶解过程分析可知,吲哚亚甲基海因在碱溶液中溶解过程可分为成盐溶解和缔合析出两个阶段。析出物为吲哚亚甲基海因钠盐的水合物。在80℃,3.0Mpa条件下,采用吲哚亚甲基海因钠盐-水的低碱体系来替代碱水体系进行加氢反应,吲哚甲基海因的水解可降低50％。; 曹飞范伟平韦萍欧阳平凯; 关键词：海因低碱水体系盐溶缔合

海因酶法耦合原位分离技术制备N-氨甲酰-D-苯丙氨酸被引量：3: 2007年; The purified D-hydantoinase was immobilized on EAH sepharose 4B via the carbodiimide method with a yield of enzyme activity up to 79.44%.The immobilized hydantoinase showed remarkable stability at 4℃.An integrated process of N-carbamoyl-D-phenylalanine(N-D-Phe)synthesis from D,L-5-benzylhydantoin(D,L-BH)catalyzed by immobilized D-hydantoinase coupled with an ion-exchange unit for in situ product removal(ISPR)was established.The variation of pH and conversion in the fixed-bed reactor with or without ISPR was compared at different temperatures,initial substrate concentrations and volumes of adsorbent.Within 24 h,the pH value in the reactor with ISPR could be kept at the alkaline range,which was beneficial to the enzymatic conversion and racemization of L-5-benzyl hydantoinase.This led to a higher overall conversion of 62.725% under optimal operation conditions,an increase of 89.3% compared with the fixed-bed reactor without ISPR.; 徐晓滢姚忠马哲刘辉周华韦萍; 关键词：固定化 D-海因酶固定床反应器

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