首都医学发展科研基金(2002-3046)
- 作品数：9 被引量：51H指数：3
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- 相关机构：北京地坛医院山东大学北京大学第一医院更多>>
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- 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎HBV DNA阴转疗效影响因素研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者疗效的影响因素。方法对拉米夫定治疗的慢乙肝202例和乙型肝炎肝硬化（简称乙肝肝硬化）55例患者，采用聚合酶链反应及错配聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析的方法检测HBV DNA及乙型肝炎病毒（HBV）聚合酶YMDD变异，应用SPSS统计软件对基线ALT、AST、TBIL、白蛋白、球蛋白、HBeAg（高、中、低）、HBV DNA等共10个变量作为处理因素进行统计学检验。结果随治疗时间的延长，慢乙肝和肝硬化者HBV DNA的阴转率于3、6、12、18、24、30个月分另1为87．62％、95．04％、86．63％、82．65％、75．43％、77．27％和94．54％、98．18％、81-81％、74．35％、73．91％、63．63％，时序检验及Cox回归分析结果表明：联合干扰素、基线ALT水平较高、HBV DNA水平较低和基线白蛋白水平较低，与HBV DNA转阴率高相关。结论联合干扰素、基线ALT水平较高、HBV DNA水平较低和基线白蛋白水平较低可作为HBV DNA转阴的预测因素。
- 陈京龙王磊闰杰张璐于浩范小玲
- 关键词：拉米夫定肝炎病毒乙型
- 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者YMDD变异及影响因素的研究被引量：32
- 2004年
- 目的 探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(简称慢乙肝)患者过程中YMDD变异的发生率及影响因素。 方法 对采用拉米夫定治疗的249例慢乙肝和64例乙型肝炎肝硬化(简称乙肝肝硬化)患者采用错配聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析的方法检测了乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶YMDD变异,并应用SPSS统计软件对YMDD变异发生率和影响YMDD变异发生的因素进行统计学分析。 结果 随治疗时间的延长,YMDD变异的累计发生率逐渐升高;慢乙肝和乙肝肝硬化患者YMDD变异率于12、24、36、48个月分别达8.84％和17.19％、20.91％和32.40％、26.92％和39.56％、26.92％和58.79％。时序检验及Cox回归分折的结果均表明:未联台干扰素治疗,基线丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平较低、HBV DNA水平较高和治疗前诊断为肝硬化者均与YMDD变异的较早出现有关(P<0.05)。 结论 拉米夫定治疗慢乙肝患者,未联合干扰素治疗、基线ALT水平较它低、HBV DNA水平较高和乙肝肝硬化可作为YMDD变异发生的预测因子.
- 王磊闫杰张照华王晶波杜以真李晓迎王耀宗
- 关键词：YMDD变异拉米夫定慢乙肝乙肝肝硬化
- 乙型肝炎病毒核苷(酸)药物耐药变异检测技术研究进展
- 2010年
- 新型核苷(酸)药物的出现为抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗提供了新的手段。该类药物具有迅速抑制HBV复制,口服给药,服用方便,良好的耐受性,较干扰素α(IFN-α)
- 闫杰
- 关键词：变异株逆转录酶核苷拉米夫定
- 血清乙肝病毒DNA煮沸抽提法的建立和应用被引量：5
- 2003年
- 目的 建立一种简便的血清HBV DNA抽提方法一煮沸抽提法,并将其应用于巢式PCR扩增。方法 选取16份CHB血清,分别应用直接煮沸法和异硫氰酸胍-酚/氯仿法进行HBV DNA抽提后,进行荧光定量PCR测定;并以煮沸法抽提样品为模板,进行HBV DNA P区部分片段巢式PCR扩增。结果 将上述两种抽提方法的荧光定量PCR结果取对数后进行直线相关分析和配对样本t检验,结果显示:两种方法的定量PCR结果之间存在良好的相关性(r=0.696,P=0.003),且二者定量PCR结果无差异(P=0.663)。16份标本巢式PCR扩增均为阳性,PCR产物分子量大小与预期值相符。结论 直接煮沸法抽提HBV DNA,简便、快速、效果好,适用于HBV的科研和临床检测工作。
- 闫杰李鑫何忠平宋淑静戴旺苏
- 关键词：血清乙型肝炎病毒HBV聚合酶链反应乙型肝炎
- 拉米夫定治疗中HBV多聚酶M204V/M204I和L180M变异的检测及意义被引量：2
- 2005年
- 目的:建立以PCR-RFLP检测HBV多聚酶M204V/M204I和L180M变异的方法,探寻上述位点变异之间的关系。方法:构建质粒pUCm-V+M/I+L,采用基因序列测定技术以确证PCR-RFLP检测HBV多聚酶M204V/M204I和L180M变异的方法。采用建立的方法对拉米夫定治疗过程中发生耐药变异的41例慢性HBV感染患者进行YMDD变异类型的检测。结果:①建立了检测HBV多聚酶M204V/M204I和L180M变异的PCR-RFLP方法,且与基因序列测定的结果一致;②HBV多聚酶M204V变异,占YMDD变异的31.7%(13/41),均伴有L180M变异;M204I变异占YMDD变异的68.3%(28/41),其中46.4%(13/28)伴有L180M变异。结论:①HBV多聚酶M204V/M204I和L180M变异的PCR-RFLP检测方法可靠;②M204V变异均伴有L180M变异,46.4%的M204I变异也伴有L180M变异。
- 王磊张璐闫杰
- 关键词：拉米夫定抗药性
- 应用巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异-rtN236T变异被引量：3
- 2006年
- 目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5′TTTAAA3′),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBVDNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、DraⅠ酶切、3%琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBVRT区基因序列分析。结果自4份血清标本中检测到1例rtN236T变异。所建立的ntPCR-RFLP方法灵敏度高,可以检测到103copies/L的HBVDNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致。结论应用ntPCR-RFLP方法检测rtN236T变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于ADV耐药变异的临床监测工作。
- 闫杰谢雯王磊冯鑫宋淑静王晶波刘顺爱魏红山
- 关键词：阿德福韦乙型肝炎病毒
- 应用ntPCR-RFLP技术检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异被引量：9
- 2008年
- 目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异及rtA181V变异的快速检测方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株rt236N PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5'-TTTAAA-3'),而变异株rt236T无此限制性酶切位点;使野生株rt181A PCR产物中含有BlpⅠ酶切位点(5'-GCTNAGC-3'),而变异株rt181V无此限制性酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、限制性内切酶酶切及凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBV RT区基因序列分析。结果建立的ntPCR-RFLP方法可以检测到102copies/L的HBV DNA;RFLP分析结果与DNA测序结果一致,4份血清标本中检测到1份rtN236T变异,2份rtA181V变异。结论应用ntPCR-RFLP方法检测HBV阿德福韦耐药变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于HBV耐药变异的监测。
- 闫杰谢雯王磊冯鑫宋淑静成军于岩岩
- 关键词：阿德福韦肝炎病毒乙型
- 慢性乙型肝炎患者拉米夫定停药后疗效持久性的观察被引量：1
- 2005年
- 为提高拉米夫定的治疗效果,减少停药后的病情复发,我国拉米夫定临床应用专家组修订发表了<2004年拉米夫定临床应用专家共识>[1],继续对拉米夫定的疗程进行了规定.我们对88例应用拉米夫定的慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者进行了停药后疗效持久性的初步观察,报告如下.
- 王磊李晓迎闫杰王晶波张照华马萍王耀宗
- 关键词：慢性乙型肝炎患者拉米夫定停药后病情复发慢乙肝
- 原因不明性肝炎血清蛋白结合蛋白的筛选和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的应用噬菌体表面展示技术寻找原因不明性肝炎血清蛋白成分在肝细胞表面的结合蛋白,探讨原因不明性肝炎发病机制。方法将原因不明性肝炎患者血清蛋白作为固相筛选分子,对噬菌体正常人肝细胞T7 cDNA文库进行4轮生物筛选,经噬斑PCR测序,获得原因不明性肝炎血清蛋白结合蛋白的cDNA序列,将其在GenBank中搜索,比对可能与原因不明性肝炎血清蛋白相结合的蛋白。结果筛选出已有功能研究的蛋白9个和未知功能蛋白3个。结论发现了12种可能与原因不明性肝炎血清蛋白结合的肝细胞表面蛋白,为进一步研究原因不明性肝炎的发病机制提供基础。
- 陈京龙刘霞魏红山孔德晓
- 关键词：血蛋白质类噬菌体表面展示技术
