国家自然科学基金(81271903)
- 作品数：7 被引量：72H指数：5
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- 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对肾小管上皮HK-2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制被引量：3
- 2016年
- 目的观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在HK-2肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤中的作用以及对自噬的调控作用。方法设计并合成3组NGAL基因的特异性短发夹RNA(shRNA)序列并转入HK-2细胞,实时定量PCR检测HK-2细胞中NGAL mRNA水平、Western blot法检测NGAL蛋白水平,筛选抑制效率最佳的一组用于后续实验。对NGAL敲减的HK-2细胞进行缺氧/复氧处理,检测微管相关蛋白1轻链3(LC-3)Ⅱ和beclin-1表达水平,并用Cell Titer-Blue细胞活性检测系统和CCK-8法检测细胞活力。结果成功构建3组NGAL基因沉默shRNA质粒,转染HK-2细胞后NGAL mRNA和蛋白水平表达均低于空白载体对照;缺氧/复氧处理后,NGAL敲减的HK-2细胞LC-3Ⅱ和beclin-1表达水平低于空白载体对照,而外加400 ng/m L NGAL的HK-2细胞LC-3Ⅱ及beclin-1水平高于缺氧/复氧对照;用Cell Titer-Blue和CCK-8法检测NGAL敲减组的细胞活力均低于空白载体对照组。结论 NGAL在HK-2肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤起一定保护作用,可能与增强自噬相关。
- 张吟眉张捷
- 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白
- CXCL5/CXCR2生物轴与肿瘤关系的研究进展被引量：9
- 2013年
- 趋化因子CXCL5是CXC类趋化因子家族中的一员,由多种细胞产生,具有很强的粒细胞趋化作用。CXCL5识别并与G蛋白耦联受体CXCR2结合通过细胞自分泌或非自分泌途径行使生物学效应。近年研究发现CXCL5/CXCR2生物轴作为肿瘤相关炎性环境的重要成分,具有强烈的促血管生成作用,从而影响肿瘤细胞的增殖、存活及运动,在肿瘤发生、侵袭、转移及进展中发挥重要作用。现将肿瘤中CXCL5/CXCR2的研究进展综述如下。
- 郑佳佳张捷
- 关键词：肿瘤CXCR2
- 4种估算肾小球滤过率公式在体检人群中的应用评价被引量：7
- 2016年
- 目的评价4种基于血清肌酐(Cr)或基于血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)的估算肾小球滤过率公式在体检人群中的适用性。方法随机取出2 032例体检健康者,分别检测血清Cr、Cys C、尿清蛋白和肌酐比值(ACR),通过4种公式,即同位素稀释质谱法-肾脏病膳食改善公式(IDMS-MDRD)、慢性肾脏病流行病合作组(CKD-EPI)公式(EPI-Cr、EPI-Cys C和EPI-CrCys C),分别计算其估算的肾小球滤过率(e GFR)并进行比较。结果 2 032例体检健康者血清Cr为(65.4±14.3)μmol/L,血清Cys C为(0.77±0.19)mg/L,ACR中位数为3.1 mg/g。将4种公式计算的e GFR值按照<60 m L/min/1.73 m^2、60~89m L/min/1.73 m^2、≥90 m L/min/1.73 m^2分为3组,3组分布差异均有统计学意义(P<0.05)。联合4种公式计算的e GFR和ACR对CKD预后分为低危、中危、高危和极高危4期,各期分布差异无统计学意义(P均>0.05)。在2 032例健康人群中,以EPI-Cr公式计算的e GFR值在45~60 m L/min/1.73 m^2之间的例数为44例(2.2%),以IDMS-MDRD公式计算的e GFR值在45~60 m L/min/1.73 m^2之间的例数为58例(2.9%),该58例人群的ACR结果有45例<30 mg/g,以EPI-Cr-Cys公式计算该45例人群的e GFR值,有40例>60 m L/min/1.73 m^2。结论联合e GFR和ACR对CKD预后进行分期,4种公式的一致性高。对于选用基于血清Cr的IDMS-MDRD公式计算的e GFR值,如果在45~60 m L/min/1.73 m^2之间,建议检测Cys C,并且采用血清Cr和Cys C联合公式计算e GFR,以减少对患者GFR的误判。
- 贾珂珂杨硕乔蕊崔丽艳张捷
- 关键词：肾小球滤过率肌酐胱抑素C慢性肾脏病
- 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在急性肾损伤中的保护作用被引量：25
- 2015年
- 急性肾损伤(AKI)在临床上较为常见,且预后较差,需及早干预,但是目前临床上常用的诊断方法主要依赖于功能性指标,如血清肌酐(SCr)检测。然而由于检测技术的局限,SCr异常出现较晚,且其检测结果亦有可能出现一定的偏差,这对于临床上及时诊断及干预AKI非常不利。因此迫切需要一种能明确早期肾脏损伤的生物标志物。近年来,许多学者在寻找早期AKI的生物学标记物方面做了一定的探索,逐渐发现一些有潜在应用价值的指标,如中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)、白细胞介素-18(IL-18)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)等,其中NGAL作为早期AKI生物标志物的研究倍受关注。一些研究显示NGAL在肾脏保护、炎症反应、肿瘤发生等方面亦发挥重要作用,但其具体作用机制目前尚未完全阐明。文章仅就NGAL在AKI发生过程中所发挥的保护作用及其参与机制做相关综述。
- 张雅丽崔丽艳张捷
- 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白急性肾损伤凋亡自噬
- 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对缺氧/复氧肾小管上皮HK-2细胞自噬作用的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对缺氧/复氧肾小管上皮细胞HK-2自噬水平的影响,探讨NGAL在肾小管上皮细胞缺氧/复氧过程中发挥的作用。方法构建高表达NGAL的载体pcDNA3.1(-)/myc-His B-NGAL,并转染HK-2细胞。将HK-2细胞分为未转染组和转染组,每组再分为缺氧/复氧处理组和未处理组。用western blot法检测转染后NGAL蛋白表达水平和缺氧/复氧后细胞自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)表达水平,并用CellTiter-Blue细胞活性检测系统检测细胞活力。结果成功构建高表达NGAL的载体pcDNA3.1(-)/myc-His B-NGAL,转染HK-2细胞后,细胞NGAL蛋白表达水平高于未转染组(t=8.959,P<0.05)。缺氧1 h/复氧24 h后,转染组细胞LC3-Ⅱ表达水平高于未转染组(t=21.721,P<0.05),而细胞活力低于未转染组(t=-6.238,P<0.05)。结论在HK-2细胞缺氧/复氧状态下,NGAL能增强细胞自噬水平,导致细胞损伤加重甚至死亡。
- 张文静崔丽艳杨硕张捷
- 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白自噬缺氧复氧
- 自噬与缺血再灌注损伤被引量：13
- 2014年
- 自噬是存在于真核细胞生物中的一种细胞自我吞噬的现象。在生理状态下,可以维持机体内环境的稳定。在多种疾病的发生过程中,自噬也发挥重要作用。实验证明在缺血再灌注损伤的整个过程中,均有自噬的参与,但在缺血阶段和再灌注阶段,自噬有可能发挥不同的作用。在缺血阶段,自噬发挥保护细胞的作用,而在再灌注阶段,自噬可能会进一步加重细胞损伤甚至导致细胞死亡。
- 张文静崔丽艳张捷
- 关键词：自噬缺血再灌注损伤
- 自噬对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及机制被引量：14
- 2015年
- 目的观察大鼠肾脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤中肾小管上皮细胞的自噬激活情况,探讨其对肾脏I/R损伤发挥保护性作用的分子机制。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(Sham)、I/R组、氯喹干预组(I/R+CQ)和雷帕霉素干预组(I/R+Rap)。常规方法建立大鼠肾脏I/R损伤模型,再灌注24 h后留取各组大鼠血和肾脏标本。血标本用于尿素氮(BUN)和血肌酐(Scre)含量检测;肾组织标本行HE染色,观察病理学损伤情况;TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡的改变;采用免疫组化法检测Beclin-1和Caspase-3蛋白表达,透射电镜观察大鼠肾脏自噬泡的形成情况。结果与I/R组相比,I/R+CQ组BUN和Scre明显升高(P<0.05,P<0.01),肾组织损伤积分增加(P<0.01),TUNEL阳性细胞数增多(P<0.05),Beclin-1蛋白表达减弱(P<0.01),Caspase-3蛋白表达增强(P<0.01),电镜下自噬泡数量较少(P<0.05);I/R+Rap组BUN和Scre显著降低(P<0.01),肾组织损伤积分减低(P<0.05),TUNEL阳性细胞数减少(P<0.05),Beclin-1蛋白表达增强(P<0.01),Caspase-3蛋白表达减弱(P<0.01),自噬泡数量明显增多(P<0.01)。结论自噬激活在肾脏I/R损伤过程中可通过抑制凋亡而发挥的保护作用,其机制可能涉及Beclin-1及Caspase-3等蛋白的表达调控。
- 张雅丽崔丽艳杨硕周剑锁张文静张捷
- 关键词：自噬缺血再灌注免疫组织化学超微结构
