厦门市科技计划项目(3502Z20110001)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 相关作者:石磊李琳吴少云沈会平闫鹤更多>>
- 相关机构:华南理工大学广州迪澳生物科技有限公司更多>>
- 发文基金:厦门市科技计划项目广州市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程更多>>
- 实时浊度LAMP法检测豆制品中转基因成分被引量:4
- 2012年
- 通过设计转基因大豆内源基因(Lectin)、外源基因NOS和2个转基因大豆品系(GTS 40-3-2,MON89788)特异性LAMP引物,建立快速检测转基因大豆以及鉴定转基因大豆品系的LAMP体系,并选取国内豆制品利用CTAB法进行DNA提取,并针对上述基因进行PCR和LAMP扩增的对比,建立起了检测大豆制品中转基因成分的定性的LAMP方法。结果表明:4个LAMP方法均有较好的特异性,除了NOS、GTS 40-3-2的检测限为0.1%外,其他LAMP方法的灵敏度为0.01%,均能满足实际检测要求;在实时浊度LAMP法检测大豆制品转基因成分的鉴定中,传统的CTAB法能成功提取大豆粗加工制品的DNA,且DNA纯度能够进行核酸扩增反应。利用转基因外引物进行的普通PCR结果与实时浊度LAMP结果是一致的,说明建立的转基因实时浊度LAMP检测方法有很好的准确性。
- 叶蕾沈会平闫鹤李琳石磊
- 关键词:LAMP豆制品转基因
- LAMP实时浊度法检测转基因水稻Bt63品系被引量:9
- 2012年
- 采用环介导等温扩增技术(LAMP),针对转基因水稻Bt63品系外源基因与内源基因结合处序列设计4条特异性引物,利用浊度仪实时监测扩增过程,建立Bt63品系的快速检测技术体系,并对反应温度、灵敏度、特异性、稳定性和实际样品检测能力进行初步探索。结果表明,LAMP实时浊度法能够特异性检测转基因水稻Bt63品系,其最低检出限为0.01%,是普通PCR方法的10倍,具有广泛的应用价值。
- 吴少云唐大运李琳石磊
- 关键词:环介导等温扩增技术转基因水稻外源基因
- 多重PCR快速检测猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型方法的建立
- 2013年
- 根据GenBank上猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的已知序列,利用Primer Premier 5.0及DNAstar软件对上述病毒基因保守区进行引物设计,选出扩增序列为PRV gB基因373 bp、PCV2 ORF2基因430 bp两对引物。在优化单项PCR反应条件基础上,建立了PRV-PCV2两重PCR检测方法。敏感性及特异性试验结果显示,该mPCR对2种病毒的核酸检测可至1.47×10-6~1.62×10-6 ng,而对灭菌双蒸水、猪细小病毒(PPV)猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)多重PCR的扩增结果均为阴性,作为临床上猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型感染的病原学快速诊断方法具有可行性。
- 谢燕婷
- 关键词:多重PCR方法猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型