国家自然科学基金(30672028)
- 作品数:6 被引量:14H指数:3
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- 慢性疼痛基因治疗载体的研究进展
- 2010年
- 目前用于慢性疼痛基因治疗的载体大致分为病毒载体和非病毒载体两类。前者优点是转染率高,靶向性好,缺点是免疫反应及突变性;非病毒载体种类繁多,安全性好,尤其是纳米技术的应用,转染率及靶向性有了很大提高。
- 马涛冯泽国
- 关键词:基因病毒脂质体
- 铬制肠线与丝线制作CCI模型效果比较被引量:7
- 2010年
- 目的比较利用铬制肠线和丝线制作CCI疼痛模型痛阈变化的区别。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分为铬制肠线组、丝线组和假手术组,每组10只。铬制肠线组和丝线组分别用铬制肠线和丝线对大鼠右侧坐骨神经进行松结扎,假手术组只暴露右侧坐骨神经但不进行任何处理。建模后测量各组大鼠热缩足反射阈值(TWT)和机械性缩足反射阈值(MWT)。结果铬制肠线组和丝线组均能引起大鼠痛阈的降低(与假手术组比较P<0.05),铬制肠线组和丝线组间MWT无明显区别(P>0.05),铬制肠线组TWT低于丝线组(P<0.05)。结论铬制肠线制作CCI模型较之丝线制作CCI模型能引起更为明显的热痛阈降低。
- 王维冯泽国马涛陈娜
- 关键词:坐骨神经痛觉过敏痛阈
- Cav2.2e37a基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量:3
- 2010年
- 目的构建针对Cav2.2e37a基因的RNAi慢病毒载体,为抑制Cav2.2e37a基因表达治疗神经痛的实验研究打下基础。方法针对已经筛选确定的Cav2.2e37a基因RNAi有效靶序列,构建pLL3.7-Cav2.2e37a干扰质粒,测序鉴定。pRsv-REV,pMDlg-pRRE,pMD2G,pLL3.7-Cav2.2e37a共转染293T细胞,Real-time PCR测定病毒转导滴度。结果成功构建Cav2.2e37a shRNA的慢病毒载体LVshCav2.2e37a。浓缩病毒悬液的滴度为1×109Tu/ml。结论成功构建了Cav2.2e37a基因的RNAi慢病毒载体。
- 王维冯泽国陈娜马涛周建平
- 关键词:RNA干扰慢病毒属
- RNA干扰用于疼痛治疗的离子通道靶点被引量:2
- 2009年
- 疼痛与许多离子通道有关,比如电压门控性钙离子通道,电压门控性钠离子通道,TRP家族,P2X受体等,这些离子通道可作为RNA干扰治疗疼痛重要靶标。本文就RNA干扰用于治疗疼痛的离子通道靶点做一综述。
- 王维冯泽国
- 关键词:离子通道RNA干扰
- 疼痛相关融合基因的构建及siRNA对其抑制作用的研究被引量:3
- 2009年
- 目的:通过构建用于RNAi筛选的模拟靶基因,筛选出起作用的siRNA,为进一步研究以Cav2.2e[37a]为靶标的基因治疗提供依据。方法:构建了EGFP-e37a/e37b融合基因,将其放入载体质粒中进行表达。按照siRNA的设计原则设计了四对siRNA(编码为I号、Ⅱ号、Ⅲ号、IV号),并将其放入质粒表达载体中,用siRNA表达载体与融合基因表达载体共转染BHK细胞进行了RNAi试验。用荧光显微镜、流式细胞仪等方法检测RNAi效果。结果:EGFP-e37a/e37b融合基因通过PCR、测序等方法鉴定为正确;在荧光显微镜下可见siRNAⅡ使细胞的荧光效率明显受到抑制,流式细胞术可见siRNAⅡ的RNAi效率在24h达到了90%左右,其余3条siRNA抑制作用不明显。结论:本研究将目的基因e37a与EGFP基因进行了融合构建,通过EGFP的绿色荧光效应显示目的靶基因在细胞内的表达,并观察到RNAi抑制效果,筛选出了有功能的siRNA。
- 陈娜冯泽国张砡李冠华王维
- 关键词:SIRNARNAI钙通道N型
- 一种适合膜片钳试验的新生大鼠背根神经节细胞的培养方法
- 2011年
- 目的建立一种适合膜片钳实验的大鼠乳鼠背根神经节细胞的培养方法。方法在显微镜及显微外科手术器械的辅助下,分离并培养新生大鼠的背根神经元(Dorsal Root Ganglion,DRG),观察培养细胞的形态,膜片钳记录细胞静息电位水平。结果 DRG神经元细胞形态结构完整,静息电位水平正常,可记录到动作电位及钠电流。结论培养的新生大鼠DRG细胞适合膜片钳试验。
- 马涛冯泽国张宏王维陶颖
- 关键词:背根神经节细胞培养膜片钳