目的探讨在动态负荷压力对体外软骨前体干细胞(PSC)甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)的影响,寻找在细胞外基质呈差异性表达的蛋白质。方法体外培养大鼠软骨PSC,并用磁性细胞分选系统分离纯化,所得PSC行不同强度(30、60、90 mm Hg)和持续时间(2、6、24 h)的压力刺激,设未刺激组为对照组,采用逆转录PCR检测各组细胞的PTHrP水平;随机将软骨前体干细胞分成实验组与对照组,实验组以90 mm Hg强度的压力持续24 h处理软骨前体干细胞,对照组不予处理,提取两组蛋白质行双向电泳,以基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱仪鉴定2组细胞呈差异表达的蛋白质。结果 PSC在动态压力培养环境下,各时间点PTHrP表达水平均明显高于对照组(P<0.01);PTHrP mRNA的表达水平随时间增加而升高;同一时间点,压力越大,PTHrP mRNA表达水平越高。质谱鉴定在压力作用下的实验组与对照组呈差异表达共6种蛋白质,分别为脯氨酰羟化酶α亚单位、丙酮酸激酶、L-乳酸脱氢酶、脯氨酰羟化酶β亚单位、细胞骨架蛋白、烯醇酶。实验组的所有差异性蛋白表达均强于对照组。结论压力能促进体外培养的大鼠软骨前体干细胞PTHrP的表达,压力作用下软骨细胞外基质有6个关键蛋白呈差异表达,其在软骨改建中可能起重要作用。
