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外源褪黑激素对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活胚胎体外发育的影响: 本研究探讨褪黑激素处理对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎体外发育的影响。本实验用放射免疫分析法检测了同一卵巢上不同大小卵泡内卵泡液中褪黑激素的浓度,结果发现,卵泡液内含有褪黑激素,浓度为10mol/L左右,且随着卵泡直径的增...; 史建民田秀芝王梁高超张璐周光斌史文清汪锋朱士恩曾申明田见晖张忠诚刘国世; 关键词：褪黑激素卵母细胞体外成熟孤雌激活胚胎

褪黑素对冷冻解冻的小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响: 褪黑素(melatonin,MT)是一种多功能性的调节分子,对胚胎的体外发育有促进作用,且已在羊、猪、牛和鼠等胚胎的体外成熟或发育上得到了初步验证。本研究主要探索了MT对小鼠冷冻-解冻的2-细胞胚胎体外发育的影响。将解冻...; 田秀芝高超王亮汪锋徐静卓志勇张璐朱士恩连正兴刘国世; 关键词：MT 小鼠玻璃化冷冻 ROS; 文献传递

绵羊sTLR4基因的克隆表达及定位被引量：2: 2011年; 采用RT-PCR方法克隆绵羊TLR4基因的一种新型剪接体形式sTLR4,将sTLR4与EGFP构建融合蛋白表达载体。用EcoR I和Sma I分别双酶切质粒pEGFP-N1和sTLR4基因的PCR产物,采用T4连接酶进行连接,将质粒转化TOP10菌株,挑取阳性克隆采用AgeI和VspI对质粒进行双酶切鉴定。经鉴定的质粒采用电击方法转染胎儿成纤维细胞,在激光共聚焦显微镜下观察sTLR4蛋白在成纤维细胞中的定位情况。结果表明:构建的融合蛋白pEGFP-N1-sTLR4能够在成纤维细胞中正常工作,且sTLR4-EGFP融合蛋白可以在细胞膜上表达。; 杜金苓韩红兵张宝路连正兴; 关键词：转染绵羊

体细胞核移植生产转TLR4基因绵羊: 本研究构建TLR4基因表达载体，优化绵羊体细胞克隆胚胎激活方式，在体内培养转基因绵羊克隆胚胎，利用转基因克隆技术生产转TLR4基因绵羊。; 邓守龙姚玉昌崔茂盛刘国世连正兴; 关键词：绵羊体细胞核移植转基因技术胚胎培养克隆技术

外源褪黑激素对牛卵母细胞体外成熟和体外受精早期胚胎体外发育的影响: 本研究旨在探索不同浓度褪黑素(melatonin,MT)处理对牛体外受精早期胚胎体外发育的影响。放射免疫分析法测得中、小卵泡内MT浓度高于大卵泡,与周围血清中的MT浓度相近,且中小卵泡中雌激素(E)浓度显著低于大卵泡。并...; 高超田秀芝王梁张璐徐静汪锋朱士恩曾申明田见晖张忠诚戴蕴平刘国世; 关键词：褪黑激素卵母细胞胚胎; 文献传递

血管生成素-2在小鼠子宫中的表达与调节: 胚胎着床是哺乳动物生殖过程中妊娠建立与维持的关键环节,血管正常发生对于哺乳动物胚胎着床过程的建立是必不可少的。本实验以小鼠为研究对象,利用原位杂交和RT-PCR方法研究血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang...; 郭斌张璐韩玉帅杜朋岳占碰; 关键词：血管生成素-2 小鼠子宫; 文献传递

转绵羊IRF-1基因牛胎儿成纤维细胞的BVDV抗性研究: 2012年; 为研究IRF-1基因在抗病毒方面的作用,将IRF-1基因转染牛胎儿成纤维细胞,制备了瞬时表达IRF-1基因的转基因细胞,再将携带单股正链RNA的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作用于上述转基因细胞,观察该病毒在转基因细胞和非转基因细胞上的滴度变化及2种细胞形态、增殖、凋亡和基因表达情况上的差异。结果显示:与非转基因细胞相比,病毒在转基因细胞上滴度显著提高,病毒作用48和72 h后转基因细胞病变程度明显低于非转基因细胞;流式细胞仪检测发现72 h时细胞凋亡率显著降低,荧光定量PCR检测结果显示,转基因细胞中IRF-1基因的表达水平显著提高。结论:IRF-1基因具有促进细胞抗BVDV感染的作用。; 齐巍巍唐泰山王子玉闫益波钟部帅吴勇聪张常印茆达干王锋; 关键词：转基因抗病毒

五个品种优质肉用绵羊的超数排卵与胚胎移植: 为进一步提高不同优质肉用品种绵羊的超数排卵与胚胎移植效果,本次试验采用了四种不同的超排方案(CIDR+FSH减量,CIDR+FSH+PMSG,CIDR+FSH+PG,CIDR+FSH等量)对17只绵羊(其中杜伯4只,白萨...; 张璐王梁史建民史文清高超田秀芝卓志勇朱士恩李树静富俊才朱化彬连正兴刘国世; 关键词：绵羊超数排卵胚胎移植; 文献传递

转基因山羊抑制口蹄疫病毒3D基因: 2013年; 利用shRNA与高效的"睡美人"(sleeping beauty,SB)转座子系统生产抑制口蹄疫病毒3D基因复制的山羊.对口蹄疫病毒基因(2B,3D)shRNA抑制靶点进行筛选,构建了3条含靶基因shRNA的pLL3.7表达载体,与含靶基因的psiCheck2载体(双荧光素标记)共转染293FT细胞,对合成的shRNA进行筛选.获得的抑制效果好的3D1shRNA(干扰3D基因)插入到SB转座子载体上,将含3D1shRNA的SB转座子与转座酶(2:1,5:1,10:1)通过原核显微注射生产转基因山羊.出生羔羊进行Southern blot与整合位点鉴定,对阳性个体耳成纤维细胞转染含3D基因的pisCheck2载体,观察其抑制率.结果共获得了7只阳性山羊.SB转座子与转座酶的比例为10:1时,生产转基因山羊的效率为21.05%.阳性个体耳成纤维细胞对口蹄疫病毒3D基因有显著抑制效果.; 邓守龙于坤李文婷姚玉昌鲁涛赵雅琳袁三平富俊才连正兴; 关键词：山羊 SHRNA

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转基因生物新品种培育专项(2008ZX08008-005)