宁夏回族自治区卫生厅科研项目(2102005)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 相关作者：黄敏杨惠芳李宏辉刘贺荣张平更多>>
- 相关机构：宁夏医科大学复旦大学更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 百草枯中毒致肺纤维化大鼠细胞因子表达及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯的干预作用被引量：10
- 2012年
- 目的探讨百草枯中毒致肺纤维化的机制。方法 SD大鼠随机分为对照组6只、四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对照组36只、百草枯染毒组36只、PDTC干预组36只。染毒组和PDTC干预组给予百草枯80 mg/kg一次性灌胃后2 h,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC干预组给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射;对照组和PDTC对照组予生理盐水1 mL/kg灌胃后2 h,对照组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC对照组给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射。于不同处理后1、3、7、14、28、56 d观察大鼠中毒表现,并分别处死6只大鼠观察肺组织病理改变,测定肺组织羟脯氨酸含量,测定血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板源性生长因子(PDGF)水平及肺组织结缔组织生长因子(CTGF)的表达,分析它们与肺组织羟脯氨酸含量的关系。结果染毒早期(1～7 d)病理特征为急性肺泡炎,表现为肺充血、肺水肿及炎性细胞浸润。后期(14～56 d)炎性病变减轻,支气管周围、肺泡间隔及肺泡内大量成纤维细胞增殖、胶原纤维增生。干预组的肺部炎性改变及胶原纤维增生程度均明显减轻。与对照组比较,染毒组IGF-1含量3～56 d明显升高(P<0.01),TGF-β1含量各时段均明显升高(P<0.01),PDGF含量7～56 d显著升高(P<0.01)。经PDTC干预后,上述细胞因子水平明显降低,相应时点差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。免疫组化显示,染毒组3 d即有CTGF阳性表达,表达强度较弱,主要表达于炎症细胞;7、14 d表达进一步增强,28、56 d表达持续增强,主要表达于巨噬细胞和成纤维细胞。干预组CTGF阳性表达细胞与染毒组相同,但各时段表达强度均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论细胞因子IGF-1、TGF-β1、PDGF及CTGF的过度表达是参与百草枯致肺纤维化的重要机制。PDTC可能通过抑制NF-κB活化进而抑制上述细胞因子的表达,减轻百草枯中毒大鼠的肺损伤和肺�
- 黄敏杨惠芳李宏辉汪岭刘贺荣
- 关键词：百草枯肺纤维化血小板源性生长因子胰岛素样生长因子1结缔组织生长因子
- PDTC对百草枯致肺纤维化大鼠TGF/β1及CTGF表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达水平的变化,探讨四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的治疗机制。方法 SD大鼠144只随机分为对照组6只、PDTC对照组36只、PQ染毒组56只、PDTC干预组46只。染毒组和干预组给予生理盐水稀释PQ80mg·kg-1一次性灌胃后2h,干预组给予PDTC100mg·kg-1一次性腹腔注射,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射;对照组和PDTC对照组于生理盐水1mg·kg-1灌胃后2h,PDTC对照组给予PDTC100mg·kg-1一次性腹腔注射,对照组给予等量生理盐水腹腔注射。于不同处理后1、3、7、14、25、56d观察大鼠中毒表现及肺组织病理改变;测定肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量;ELISA测定血清TGF-β1水平;Western blot测定肺组织CTGF蛋白表达;分析TGF-β1、CTGF与Hyp含量的相关性。结果大鼠染毒后与对照组比较,血清TGF-β1含量各时段均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);肺组织CTGF蛋白表达随时间延长而逐渐升高,各时段明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);肺组织Hyp含量14、28、56d明显升高(P<0.01)。经PDTC治疗后,各时段TGF-β1、CTGF蛋白水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);Hyp含量在28、56d明显降低(P<0.01);TGF-β1、CTGF与Hyp含量均为正相关(P<0.05或P<0.01);病理检查PDTC干预组肺组织炎症及纤维化程度均较轻。结论 TGF-β1、CTGF表达增强是参与PQ致肺损伤的重要机制;PDTC可能通过抑制NF-κB活化,降低TGF-β1水平及其下游因子CTGF的蛋白表达,减轻PQ中毒大鼠的肺损伤。
- 黄敏刘贺荣李宏辉王静
- 关键词：百草枯肺纤维化CTGF
- PDTC对百草枯致肺纤维化大鼠细胞外基质成分的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠a平滑肌动蛋白（a—SMA）、整合素仅5、纤维连接蛋白（Fn）的动态变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯（PDTC）的干预效果，探讨PQ致肺纤维化机制。方法SD大鼠随机分为对照组（6只）、PQ染毒组（36只）、PDTC干预组（36只）。染毒组和干预组给予生理盐水稀释PQ（80mg／kg）一次性灌胃后2h，染毒组给予等量生理盐水腹腔注射，PDTC干预组给予PDTC（100mg／kg）一次性腹腔注射；对照组给予生理盐水1ml／kg灌胃后2h，给予等量生理盐水腹腔注射。于不同处理后1、3、7、14、25、56d观察大鼠中毒表现；蛋白免疫印迹法（Westernblot）测定大鼠肺组织a-SMA蛋白表达；实时荧光定量多聚酶链式反应（realtimePCR）测定整合素a5、FnmRNA表达水平；同时观察中毒大鼠的肺组织病理变化。结果染毒组肺组织d—SMA蛋白表达随时间延长而逐渐升高，3、7、14d升高幅度缓慢，28～56d增幅较大，各时段均明湿高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。与对照组比较，染毒组染毒后1、3d时整合素a5mRNA表达无明显变化，7～56d时基因水平明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。Fn基因表达的变化规律与整合素cdmRNA类似，染毒组各时段的FnmRNA水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。经PDTC干预后，a-SMA蛋白表达、整合素55mRNA、FnmRNA表达水平明显低于染毒组，相应时点的差异有统计学意义（R0．05或R0．01）。Masson染色可见14～28d染毒组肺组织成纤维细胞大量增殖，胶原纤维数量逐渐增多；PDTC干预组上述病理改变明显减轻，各时段的病理评分明显低于染毒组，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论成纤维细胞的表型转化（仅-SMA）、细胞外基质成分整合素a5、Fn基因表达增强是PQ致肺纤维化的重要机制；PDTC
- 黄敏杨惠芳张平常秀丽周志俊
- 关键词：百草枯肺纤维化细胞外基质蛋白质类
- 百草枯诱导A549细胞间质转化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯的干预作用被引量：3
- 2013年
- 目的探讨体外培养的人肺腺癌细胞(A549)在百草枯(PQ)诱导下能否发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预作用和可能机制。方法体外培养A549细胞,实验分为对照A549细胞组(Control)、PQ诱导A549细胞组(PQ)、PDTC 3个浓度干预组(PQ+PDTC1,2,3;终浓度分别为10,20,40μmol/L)。用噻唑蓝(MTT)测定细胞毒性;活性氧荧光定量法(DCFH-DA)测定细胞内活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平;实时定量RCR(Real Time,RT-PCR)测定EMT相关标志物上皮细胞钙粘蛋白(Ecad)、紧密连接蛋白(ZO-1)、N-钙粘蛋白(N-cad)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达。结果与对照组比较,PQ(600μmol/L)作用A549细胞24h后,细胞存活率降低,细胞内ROS水平明显升高,TGF-β1表达水平明显升高,上皮细胞标志物E-cad、ZO-1基因表达下调,间质细胞标志物N-cad、α-SMA基因表达明显上调(P<0.05);PDTC干预组能够降低PQ诱导的A549细胞毒性,明显抑制上述作用,其中对TGF-β1表达、E-cad、N-cad基因表达的干预作用呈剂量依赖方式(P<0.05)。结论PQ诱导A549细胞过度表达TGF-β1,继而导致上皮细胞向间质细胞转化,这可能是PQ致肺纤维化的重要机制之一;PDTC的有效干预可能基于其抗氧化和核因子-kappaB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)抑制作用。
- 黄敏杨惠芳陈楠李宏辉
- 关键词：百草枯A549细胞上皮细胞间质转化
- PDTC对百草枯致肺纤维化大鼠结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺组织结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、Ⅲ型胶原（ColⅢ）的动态变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯（PDTC）的干预效果，探讨PQ致肺纤维化机制及PDTC干预作用。方法sD大鼠随机分为对照组（6只）、PQ染毒组（56只）、PDTC干预组（46只）。染毒组和干预组给予PO（80mg／kg）一次性灌胃后2h，染毒组给予等量生理盐水腹腔注射，PDTC干预组给予PDTC（100mg／kg）一次性腹腔注射；对照组给予生理盐水1ml／kg灌胃后2h，给予等量生理盐水腹腔注射。于不同处理后1、3、7、14、25、56d蛋白免疫印迹法（Westernblot）测定大鼠肺组织CTGF蛋白表达；实时荧光定量多聚酶链式反应（real-timePCR）测定CTGF、ColⅠ、ColⅢ mRNA表达水平；同时测定肺组织羟脯氨酸（hyp）含量，观察中毒大鼠的肺组织病理变化。结果染毒组大鼠肺组织CTGF蛋白表达随时间延长而逐渐升高，3～14d升高幅度缓慢，28～56d增幅较大，各时点均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。染毒组大鼠肺组织CTGFmRNA表达水平于染毒后1d即明显升高，3～14d表达迅速升高，28～56d维持在较高水平，各时点均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。染毒组染毒后1、3dColⅠmRNA表达无明显变化，7d表达略微增强，14～56d水平大幅度升高，与对照组比较，7～56dmRNA水平明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；染毒组ColⅢmRNA水平于染毒后1d即开始升高，7d达到高峰，之后呈下降趋势，各时点均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；Masson染色可见染毒后14～28d成纤维细胞大量增殖，胶原纤维数量逐渐增多。与染毒组比较，PDTC干预组大鼠肺组织CTGF蛋白表达降低、CTGF、ColⅠ、ColⅢmRNA表达下调，相应时点的差异
- 黄敏杨惠芳张平常秀丽周志俊
- 关键词：百草枯肺纤维化结缔组织生长因子
