国家自然科学基金(30871775)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：牟玉莲李奎冯书堂程文科阮楠更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所海南省畜牧技术推广站华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外培养模型的建立和TLR2介导炎症相关因子的表达被引量：3
- 2012年
- 【目的】探讨五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外分离培养和鉴定的方法,研究LPS对内皮细胞TLR2表达的影响及TLR2介导内皮细胞炎症因子的表达情况。【方法】以3—4月龄的五指山小型猪近交系为试验材料,取其胸腹主动脉,采用0.1%I型胶原酶消化分离主动脉内皮细胞。利用细胞吸收DiI-Ac-LDL试验和流式细胞仪检测CD31的特异表达两种方法进行内皮细胞的鉴定。1μg.mL-1LPS刺激内皮细胞0、6、8和12 h,实时荧光定量PCR检测TLR2和TLR4的表达量;1μg.mL-1LPS刺激内皮细胞12 h后,10μg.mL-1LTA孵育0、6和12 h,实时荧光定量PCR检测炎症因子IL-6、IL-8和黏附分子ICAM-1的表达量。【结果】分离得到的主动脉内皮细胞呈铺路石样整齐排列,且生长状态良好;细胞膜上表达CD31分子和Ac-LDL的受体,证实分离得到的细胞是血管内皮细胞。LPS刺激后细胞TLR2 mRNA水平的表达量明显升高(P<0.05),而TLR4 mRNA水平表达量无明显变化。添加LTA孵育后,细胞炎症因子IL-6、IL-8和黏附分子ICAM-1的mRNA水平表达量较对照明显升高(P<0.05)。【结论】成功建立了五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外培养模型,并检测到TLR2在LPS刺激内皮细胞后表达量升高,能够介导细胞炎症相关因子的表达。
- 王攀陶晓莉沈祖楠李和刚潘杰牟玉莲李奎
- 关键词：主动脉内皮细胞
- Characterization of Porcine APC13:Its Interaction with Transcription Factor Sp1 and Association with Immune Traits
- APC13,a subunit of the anaphase-promoting complex(APC),plays an important role in cell cycle. In this study,we...
- 何文波彭克美
- 关键词：PORCINEPOLYMORPHISM
- 文献传递
- 小鼠四倍体早期胚胎基因组甲基化模式被引量：1
- 2009年
- 利用小鼠抗5-甲基胞嘧啶(5MeC)单克隆抗体检测了体外培养小鼠四倍体早期胚胎的基因组甲基化模式。结果表明:利用电融合方法制备的小鼠四倍体胚胎在体外培养体系中经历细胞质融合、细胞核融合及细胞继续分裂发育直到囊胚期的过程,在细胞质融合的时候胚胎卵裂球同体内体外培养二倍体胚胎一样,呈现高度甲基化状态;在细胞核开始融合的时候,甲基化水平急速下降,在细胞核完全融合的时候甲基化水平达到最低点;随着胚胎继续分裂,胚胎甲基化水平逐渐增加,在桑葚胚期甲基化水平最高;但是囊胚期四倍体胚胎内细胞团同滋养层细胞甲基化荧光信号没有差别,这与体内体外培养二倍体囊胚内细胞团细胞甲基化荧光强度高于滋养层细胞甲基化荧光强度不同。因此,小鼠体外培养四倍体胚胎的甲基化模式是不正常的,这可能是四倍体小鼠难以发育到妊娠足月的原因之一。这是对小鼠四倍体早期胚胎基因组甲基化模式的首次报道。
- 员新旭冯书堂潘登科窦红伟牟玉莲李奎
- 关键词：小鼠四倍体胚胎甲基化
