江西省卫生厅科技计划项目(20061054)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- RNA干扰沉默Cyclin D1基因对胰腺癌AsPC-1细胞增殖和凋亡的影响
- 2011年
- 目的探讨以细胞周期蛋白(Cyclin)D1为靶基因的RNA干扰对胰腺癌AsPC-1细胞增殖和凋亡的影响,为胰腺癌的靶向治疗提供依据。方法用含有10%FBS的DMEM培养液在37℃、5%CO2培养箱中常规培养AsPC-1细胞,至对数生长期后接种于96孔培养板中,随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组,并采用Lipo-fectamineTM2000脂质体分别转染Cyclin D1-小干扰RNA(siRNA)、阴性对照siRNA、脂质体4,8 h时收集细胞。应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞体外增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率(AI)。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组Cyclin D1 mR-NA和蛋白表达均明显下调,细胞生长速度明显减慢,G0/G1细胞比例显著增大、S期细胞比例则明显降低、AI显著升高(P均<0.01)。结论 Cyclin D1-siRNA能通过沉默靶基因表达抑制AsPC-1细胞生长、改变细胞周期分布、诱导细胞凋亡,可作为胰腺癌基因治疗的一个有效靶点。
- 肖卫东李勇李学明蔡军邓君曾林山胡伟
- 关键词：CYCLINRNA干扰细胞增殖
