中国临床肿瘤学科学基金(ICP05047300)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 沉默Dnmt1基因对结肠癌细胞株HT-29细胞增殖及细胞周期的影响被引量：1
- 2010年
- 目的利用RNA干扰技术研究沉默DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase1,Dnmt1)对结肠癌细胞株HT-29细胞增殖及细胞周期的影响,并探讨其可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM2000将Dnmt1 siRNA转染HT-29细胞,实验中将细胞分为3组:未处理组、对照siRNA组和Dnmt1siRNA组。利用CCK-8试剂盒和流式细胞术分别研究其对HT-29细胞增殖和细胞周期的影响,进一步通过Real-time PCR和Western blotting技术研究与增殖和周期相关基因表达的变化。结果与未处理组和对照siRNA组相比,Dnmt1siRNA组中HT-29细胞的增殖受到明显的抑制(P<0.05)。Dnmt1siRNA组中HT-29细胞在G0/G1期的比率高达66.93%,高于未处理组和对照siRNA组中HT-29细胞在G0/G1期的比率(分别为53.45%和54.71%)(P<0.05)。此外,与未处理组和对照siRNA组相比,Dnmt1siRNA组中HT-29细胞的cdk2,cyclin D1和cyclin E基因的mRNA和蛋白的表达明显下调(P<0.05)。结论干扰Dnmt1能明显诱导HT-29细胞周期静止,其可能的机制与cdk2,cyclins D1和cyclin E基因的表达下调密切相关,操纵该基因有可能成为新的结肠癌的分子治疗靶点。
- 王居峰刘莺刘文静何素英
- 关键词：结肠癌RNA干扰DNA甲基转移酶1细胞周期
- RNA干扰Nucleostemin基因对人结肠癌细胞株HT-29细胞增殖及细胞周期的影响被引量：1
- 2010年
- 将Nucleostemin(NS)siRNA利用脂质体2000转染人结肠癌细胞株HT 29,分别利用CCK-8试剂盒和流式细胞术检测NS siRNA对HT 29细胞增殖和细胞周期的影响,进一步利用Real-time PCR和Western blotting技术检测NS基因和细胞周期相关基因p21 mRNA和蛋白的表达.结果表明,NS siRNA的转入能有效下调NS mRNA和蛋白的表达(P<0.05),并能明显抑制人结肠癌细胞株HT 29的细胞增殖(P<0.05),并诱导细胞周期静止在G_0/G_1期,转染NS siRNA后,p21 mRNA和蛋白的表达均明显升高,提示细胞增殖抑制和细胞周期静止与p21基因表达的升高密切相关.
- 王居峰刘莺刘文静何素英
- 关键词：核干细胞因子结肠癌细胞周期
