国家自然科学基金(30901370)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- P.f多期多表位基因真核表达载体的构建和免疫学特性初步研究
- 2013年
- 目的构建恶性疟原虫多期多表位基因的真核表达载体及其免疫学特性的研究。方法在前期研究基础上,将测序正确的恶性疟原虫多期多表位基因克隆入真核表达载体VR1020内并大量制备。以VR1020重组质粒免疫HHD-2小鼠并进行细胞和体液免疫分析。结果成功获得重组真核表达载体,ELISA显示该重组质粒免疫小鼠后获得了较高效价的抗体,而且显示了较好的CTL杀伤活性,同时诱导了高水平的细胞因子。结论本研究为新型疟疾疫苗的研制奠定一定的理论和实践基础。
- 刘文文王军刘学武赵亚沈燕姜河李英辉
- 关键词：恶性疟原虫疫苗多表位基因
- 恶性疟原虫复合多表位基因的原核表达和多克隆抗体制备被引量：1
- 2012年
- 原核表达恶性疟原虫多期多表位基因并制备其多克隆抗体。在前期构建恶性疟原虫复合多期多表位重组真核表达载体的基础上,将测序正确的AMAMEG基因克隆入原核表达载体pGEX4T—1并诱导表达。采用包涵体洗涤的方式纯化目的蛋白,以AMA—1抗体对纯化蛋白进行Western—blot分析。将纯化的融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。通过PCR成功获得长度为1 000 bp的恶性疟原虫AMA—1胞外域基因片段,获得了与多表位基因连接后的AMAMEG基因。通过诱导表达,显示在相对分子量约95 000处有预计大小的特异性条带,表明成功表达出融合蛋白。经此纯化的融合蛋白免疫的小鼠能产生特异性抗体,其滴度达到1∶105。纯化的融合蛋白和多克隆抗体为研究新型疟疾疫苗奠定一定的理论和实践基础。
- 沈燕赵亚黄豫晓梁姣刘忠湘李英辉
- 关键词：恶性疟原虫疫苗多表位基因
