国家自然科学基金(31071923)
- 作品数：8 被引量：29H指数：3
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- 相关机构：河南中医药大学郑州大学河南中医学院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 复方丹参片通过LKB1-AMPK通路干预高脂血症大鼠的作用机制研究被引量：8
- 2022年
- 目的基于LKB1-AMPK通路探讨复方丹参片对高脂血症大鼠的保护作用及相关机制。方法采用腹腔注射75%蛋黄乳液+连续饲喂高脂饲料4周的方式制备高脂血症大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、辛伐他汀组(0.02 g·kg^(-1))和复方丹参低、中、高剂量组(复方丹参片,1.5、3、6 g·kg^(-1)),每组10只。各组大鼠每日1次给予相应剂量药物灌胃,连续干预4周。采用ELISA法检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;测定大鼠肝脏系数;采用HE染色法观察肝脏组织病理形态;采用免疫组织化学法检测肝脏组织中AMPK、p-AMPK、LKB1、HMGCR蛋白水平;采用Real-time PCR法检测肝脏组织中AMPK、LKB1、HMGCR mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠的肝脏系数及血清TG、T-CHO、LDL-C、ALT、AST水平明显升高(P<0.05),HDL-C水平明显降低(P<0.05);肝脏出现脂肪性病变;肝脏组织中AMPK、p-AMPK、LKB1蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05),HMGCR蛋白及mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,复方丹参片低、中、高剂量能明显降低高脂血症模型大鼠的肝脏系数及血清TG、T-CHO、LDL-C、ALT、AST水平(P<0.05),升高HDL-C水平(P<0.05);改善肝脏脂肪性病变;升高肝脏组织中AMPK、p-AMPK、LKB1蛋白及mRNA表达水平(P<0.05),降低HMGCR蛋白及mRNA表达水平(P<0.05)。结论复方丹参片可能通过激活LKB1-AMPK通路及抑制HMGCR表达水平来实现对高脂血症大鼠的保护作用。
- 张明昊张童郭申赵绅杜婧雯俎兆轩丁妍妍
- 关键词：复方丹参片高脂血症
- SD大鼠EGFR基因cDNA序列的分子克隆被引量：3
- 2011年
- 参考大鼠EGFR基因序列,用RT-PCR方法对SD大鼠EGFR基因cDNA序列进行克隆,获得了SD大鼠EGFR基因的全长4 127bp的cDNA序列(GenBank登录号HM801042),其中CDS长度为3 627bp,编码1 209个氨基酸。SD大鼠与国外报道的大鼠、小鼠、牛、猴、人等5个物种的EGFR基因cDNA序列的同源性分别为99.5%、92.9%、78.4%、83.4%、80.2%,其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为99.6%、95.9%、86.6%、89.0%、90.5%。这一结果表明了EGFR基因在进化过程中具有较高的保守性。通过比较SD大鼠EGFR基因与GenBank数据库中发布的EGFR基因的cDNA序列,本试验发现了10个SNP位点,其中5个没有改变氨基酸残基的性质,这一研究结果为EGFR基因的SNPs数据库提供了新的信息。
- 章金涛张明昊
- 关键词：EGFR基因分子克隆
- SD大鼠EGF基因cDNA序列的分子克隆被引量：1
- 2013年
- 参考大鼠EGF基因序列,用PCR方法对SD大鼠EGF基因cDNA序列进行了克隆,获得了SD大鼠EGF基因的3 522bp的cDNA序列(GenBank登录号:JX149564),其中CDS长度为3 186bp,编码了1 061个氨基酸。SD大鼠与国外报道的大鼠、小鼠、原鸡、猕猴、人等5个物种的EGF基因cDNA序列的同源性分别为97.6%、83.4%、59.7%、76.4%、73.5%,其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为99.2%、80.1%、52.6%、69.7%、69.4%。这一结果表明了EGF基因在进化过程中具有一定的保守性,但不同物种之间也具有特异性。通过比较SD大鼠EGF基因与GenBank数据库中发布的EGF基因的cDNA序列,本试验发现了22个SNP位点,其中9个没有改变氨基酸残基的性质,这一研究结果为EGF基因的SNPs数据库提供了新的信息。
- 章金涛张明昊朱奎成杜春燕王君敏王纯耀
- 关键词：分子克隆
- SD大鼠转化生长因子α基因cDNA序列的分子克隆
- 2014年
- 试验参考了SD大鼠转化生长因子α(transforming growth factor alpha,TGFα)基因序列,用PCR方法对SD大鼠TGFα基因cDNA序列进行了克隆,获得了SD大鼠TGFα基因的970bp的cDNA序列,提交GenBank,登录号:KF366251,其中CDS长度为483bp,共编码了160个氨基酸。SD大鼠与BN大鼠、小家鼠、黄牛、野猪、猕猴、黑猩猩、人、原鸡、鹌鹑和斑马鱼的TGFα基因编码序列的同源性分别为98.6%、95.0%、85.5%、85.3%、85.5%、86.3%、86.3%、73.2%、73.2%和56.8%,其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为98.8%、96.9%、90.6%、90.6%、91.2%、91.9%、91.9%、72.6%、72.6%和38.8%。这一结果表明了TGFα基因在进化过程中具有一定的保守性,但不同物种之间也具有功能上的特异性。通过比较SD大鼠与BN大鼠的TGFα基因编码序列,发现了7个SNPs位点,这一结果为TGFα基因的SNPs数据库提供了新的信息。
- 张明昊章金涛李亚萍
- 关键词：分子克隆
- 豫医卷毛大鼠皮肤毛囊形态学及超微结构观察
- 2014年
- 为比较卷毛大鼠与SD大鼠皮肤毛囊形态学区别,探讨卷发机理,采用病理组织学和电镜技术观察突变大鼠皮肤毛囊结构。组织学结果显示卷毛大鼠皮肤毛囊弯曲,毛囊皮质内根鞘鞘小皮层排列不规则。扫描电镜下卷毛大鼠毛干弯曲,毛干横断面为扁平形,根鞘厚薄不均。透射电镜观察发现突变大鼠毛囊内根鞘细胞内见多量透明蛋白颗粒与角蛋白丝形成的均质状复合物,排列不规则。研究结果表明,突变基因可能引起毛囊内根鞘细胞角化过程不一致和中间丝的不规则排列而导致卷发。
- 朱奎成章金涛王君敏杜春燕王纯耀
- 关键词：毛囊组织学超微结构
- 桃核承气汤对肾纤维化大鼠的保护作用机制研究被引量：10
- 2021年
- 目的探讨桃核承气汤对肾纤维化大鼠的保护作用机制。方法按照体重将大鼠随机分为6组:正常组、模型组、对照组和低、中、高3个剂量实验组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠按250 mg·kg^(-1)灌胃腺嘌呤溶液建立肾纤维化模型。低、中、高3个剂量实验组大鼠分别按1.89,3.78,7.56 g·kg^(-1)灌胃桃核承气汤水煎液;对照组大鼠按9 mg·kg^(-1)灌胃氯沙坦溶液;正常组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水,1次/天,连续30 d。用酶联免疫吸附法检测血清肌酸酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量;用免疫组织化学法检测肾组织分泌型糖蛋白5a(Wnt5a)和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平;用蛋白质印迹法检测肾组织Notch信号受体1(Notch1)和Notch信号配体1(Jagged1)表达水平(灰度值)。结果正常组、模型组、对照组和低、中、高3个剂量实验组Cr含量分别为(0.11±0.01),(0.72±0.09),(0.16±0.03),(0.25±0.02),(0.19±0.02)和(0.17±0.01)mmol·L^(-1);这6组的BUN含量分别为(5.19±0.15),(8.93±0.59),(5.61±0.30),(7.35±0.20),(6.53±0.33)和(4.98±0.38)mmol·L^(-1);这6组的Wnt5a蛋白相对表达量分别为14.80±1.81,21.89±0.63,13.96±0.63,19.30±1.28,16.99±0.78和17.03±0.73;这6组的β-catenin蛋白相对表达量分别为19.16±0.93,22.19±0.88,17.45±0.53,20.06±1.09,18.60±0.52和15.37±0.79;这6组的Notch1蛋白相对表达量分别为82.82±2.46,88.53±1.26,77.06±3.13,68.68±3.83,59.12±2.91和63.20±0.84;这6组的Jagged1蛋白相对表达量分别为78.20±2.49,95.35±1.05,84.44±3.92,85.61±3.88,73.90±3.37和61.91±1.07。上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);对照组和低、中、高3个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论桃核承气汤可以显著抑制肾纤维化大鼠肾组织中Wnt/β-catenin和Notch-Hes1信号通路,从而发挥对肾纤维化大鼠的保护作用。
- 张明昊高一盈赵盈盈赵丹萍徐一凡于凌爽姚文佳李婉辰王凯
- 关键词：肾纤维化桃核承气汤
- 丹参多酚酸盐对肝纤维化小鼠Notch-Hes1信号通路的影响被引量：8
- 2022年
- 目的 研究丹参多酚酸盐对四氯化碳(CCl_(4))致肝纤维化小鼠的保护作用及其对Notch-Hes1信号通路的影响。方法 50只小鼠按照体质量随机分为正常组、模型组、对照组和低、高剂量实验组,每组10只。模型组、对照组和低、高剂量实验组小鼠腹腔注射40%CCl_(4)橄榄油溶液3 mL·kg^(-1)建立肝纤维化模型,然后低、高剂量实验组小鼠分别按26和52 mg·kg^(-1)的剂量灌胃给予丹参多酚酸盐;对照组小鼠按0.4 mg·kg^(-1)的剂量灌胃给予秋水仙碱;正常组和模型组灌胃给予等量0.9%NaCl,每天1次,连续28 d。用酶联免疫吸附实验法检测血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)水平,用实时荧光聚合酶链反应法检测肝Notch1、Jagged1和Hes1基因的表达水平。结果 低、高剂量实验组和对照组、模型组、正常组的GPT含量(28.13±6.26),(27.40±6.25),(27.23±3.09),(78.22±12.16)和(27.08±3.40)U·L^(-1),GOT含量分别为(32.96±11.14),(29.08±9.34),(30.98±7.38),(59.47±8.26)和(35.16±3.43)U·L^(-1),Notch1基因相对表达水平分别为0.31±0.04,0.28±0.30,0.49±0.04,1.62±0.03和1.00±0.00,Jagged1基因相对表达水平分别为0.98±0.04,0.96±0.03,1.02±0.04,1.49±0.04和1.00±0.00,Hes1基因相对表达水平分别为1.59±0.04,1.32±0.03,1.67±0.04,1.82±0.03和1.00±0.00。低、高剂量实验组和对照组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 丹参多酚酸盐对CCl_(4)致肝纤维化小鼠具有保护作用,其机制可能与抑制Notch-Hes1信号通路有关。
- 张明昊高一盈董文霞赵丹萍赵盈盈徐一凡姚文佳于凌爽
- 关键词：丹参多酚酸盐肝纤维化肝功能
- SD大鼠Krt71基因序列的分子克隆
- 2015年
- 参考大鼠Krt71基因序列,用PCR方法对SD大鼠Krt71基因DNA和cDNA序列进行克隆,获得SD大鼠Krt71基因的8 206bp的DNA序列(GenBank登录号:KF311105)和1 575bp的cDNA序列(GenBank登录号:KF303589),编码524个氨基酸。SD大鼠与国外报道的BN大鼠、小家鼠、家猫、家绵羊、家牛、苏门答腊猩猩和人等7个物种的Krt71基因cDNA序列的同源性分别为99.9%,95.2%,88.5%,87.5%,88.0%,88.1%,88.1%;其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为100.0%,98.9%,92.5%,91.5%,91.3%,91.5%,92.1%。这一结果表明Krt71基因在进化过程中具有较高的保守性,但不同物种之间也具有功能上的特异性。通过比较SD大鼠Krt71基因与GenBank数据库中发布的Krt71基因的序列,本试验发现了6个SNP位点,这些位点位于该基因的内含子序列,没有改变氨基酸的性质,这一研究结果为Krt71基因的SNPs数据库提供了新的内容。
- 章金涛张明昊朱奎成王君敏杜春燕王纯耀
- 关键词：分子克隆
