国家科技攻关计划(2001BA901A32)
- 作品数：31 被引量：312H指数：12
- 相关作者：张富春李金耀曾幼玲马纪王艳更多>>
- 相关机构：新疆大学新疆农业科学院浙江大学更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 提高农杆菌基因转化率方法的研究被引量：11
- 2005年
- 通过甘蓝型油菜带柄子叶转化过程中转化受体是否进行预培处理、转化前菌液的对数浓度确定以及合适的再生筛选体系的摸索,研究了提高农杆菌基因转化效率的方法.试验结果表明:转化受体经过MD培养基3d的预培处理,用处于对数生长期OD600为0.6～0.8的菌液稀释至所需浸染浓度,浸染所需时间共培后,转入降低卡那霉素浓度的初筛分化培养基中,再经过后期较高浓度的卡那霉素继代筛选培养,大大提高了转化后卡那霉素抗性绿苗的得率.此研究不仅优化了油菜的转化体系和提高了油菜的转化效率,而且为农杆菌转化其它不同物种的受体材料提供了可指导的借鉴.
- 王艳贺宾李金耀曾幼玲秦丽蒋刚强张富春
- 关键词：带柄子叶预培养
- 新疆甘蓝型油菜下胚轴的组织培养和植株再生研究被引量：26
- 2005年
- 以新疆甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)1khp11品系下胚轴为外植体,不同浓度6-BA与NAA激素组合的分化培养基诱导芽苗的分化,研究发现下胚轴在不同激素及浓度的6-BA与NAA组合中再生频率、分化率存在显著差异。通过种子实生无菌苗苗龄、诱导分化前2,4-D的预培养、添加AgNO3等因素的系统分析:五日无菌种子实生苗的下胚轴通过3d短时间的预培养,在最适分化培养基MS0+3.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+3.5mg/LAgNO3中,再生频率和分化率分别为35%和122.5%,初步建立了甘蓝型油菜1khp11品系下胚轴的高频率再生植株体系,为开展优良性状甘蓝型油菜的生物技术育种工作提供了条件保证。
- 王艳曾幼玲张富春贺宾高燕
- 关键词：下胚轴6-BA分化培养预培养分化率
- 大肠杆菌nhaB基因的克隆及序列分析
- 2003年
- 采用PCR扩增的方法 ,从大肠杆菌DH5α中克隆获得了 1 5kb的Na+ H+ 反向运输体DNA片段 ,经过测序和序列分析 ,发现该基因片段包含了nhaB基因完整的读码框架。采用DNA序列同源性分析方法 ,结果显示大肠杆菌DH5αnhaB基因与E coliK12nhaB基因同源性高达 99% ,与E coli 0 15 7:H7和Shigellaflexneri的同源性均为 98% ,与Salmonellaenterica的同源性为79 % ,表明nhaB基因在细菌中是普遍存在的一种Na+ H+ 反向运输体基因。nhaB基因与大肠杆菌的耐盐性有着密切的关系 。
- 李金耀马纪单文娟王宾张富春
- 关键词：大肠杆菌基因克隆PCR扩增耐盐性基因改良
- 植物中microRNA的合成及在发育和抗逆中的作用被引量：12
- 2006年
- 介绍了植物microRNA(miRNA)的结构、合成、作用机制及其在植物生长发育和逆境胁迫中作用的研究进展。
- 王波冯晓黎张富春
- 关键词：MIRNA植物发育逆境胁迫
- 农杆菌介导NHX基因转化甘蓝型油菜的研究被引量：24
- 2006年
- 以甘蓝型油菜带柄子叶为转化受体，通过根癌农杆菌EHA105（Agrobacterium tumefaciens）介导将盐地碱蓬（Suaeda heteroptera）的Na^＋／H^＋反向运输体基因NHX导入新疆主栽油菜1khp11品系中，获得了抗卡那霉素的再生植株，并对影响遗传转化的一些关键因素进行了研究。结果表明，带柄子叶在含有2，4-D的培养基上经过3d预培养后于浓度OD600为0．3，0．4的菌液中浸染7min，卡那抗性绿苗率可达8％-9％，经过对抗性植株的PCR检测、点杂交及PCR-Southern杂交证明外源基因已整合到油菜基因组中，为新疆盐碱土上油菜产量的提高提供了新的途径。
- 王艳曾幼玲贺宾秦丽李金耀高燕张富春
- 关键词：根癌农杆菌带柄子叶预培养转基因油菜
- 中林美荷杨叶柄的组织培养及植株再生被引量：9
- 2004年
- 易丽娟曾幼玲吕艳梅新娣张富春
- 关键词：叶柄植株再生枝叶嫩枝植物
- 灰绿藜和碱蒿NHX基因3'-UTR序列的差异性分析被引量：17
- 2005年
- 采用3'末端快速扩增技术,分别从新疆野生盐生植物灰绿藜和碱蒿中克隆CgNHX和AaNHX cDNA3'末端。测序结果表明克隆获得的片段为CgNHX和AaNHX基因3'末端,并且CgNHX和AaNHX3'-UTR的不同拷贝之间存在很大的差异性。序列同源性分析结果显示,AaNHX基因3'-UTR与CgNHX基因3'-UTR同源性高达52%,两者与SsNHX(碱蓬NHX)同源性分别达到60%和54%,表明NHX基因的加工方式可能相同,同时说明该基因在野生盐生植物中的功能是很重要的。
- 李金耀马纪蔡伦王艳张富春
- 关键词：灰绿藜序列同源性扩增技术
- 家蚕天蚕素cDNA原核表达及抗菌活性检测被引量：18
- 2004年
- 采用RT PCR方法从家蚕Bombyxmori新疆品种新蚕三号组织中扩增天蚕素cDNA片段 ,回收并克隆至pMD18 T载体 ,进行序列分析。基因序列分析结果与已发表的天蚕素B的序列同源性为 98% ,表明所克隆的新疆家蚕天蚕素cDNA为独特的cDNA片段。将天蚕素基因与pGEX 4T 1融合表达载体中的谷胱甘肽转移酶基因融合 ,在大肠杆菌中表达 ,结果表明经IPTG诱导 30min后 ,pGEX 4T 1 天蚕素转化后的大肠杆菌生长明显受到抑制 ;当诱导 2 10min后 ,大肠杆菌数量又开始增加 ,逐渐恢复至正常水平。说明天蚕素与谷胱甘肽转移酶基因融合表达后 ,在IPTG存在的短时间内仍然对原核细胞有较强的抗菌抑杀作用。
- 李金耀张富春马正海
- 关键词：家蚕天蚕素基因分析抗菌活性
- 中林美荷杨不定芽分化的因素分析与植株再生被引量：3
- 2006年
- 对中林美荷杨进行组织培养,采用不同外植体为组织培养材料,以6-BA和NAA或IBA不同激素组合,比较1/2MS与MS不同盐浓度培养基诱导不定芽产生的情况。结果表明叶柄不定芽诱导优于茎段和叶片,茎段形成层不定芽诱导效果也较好。叶柄诱导不定芽的最佳培养基及激素组合是:1/2MS+6-BA0.5 mg.L-1+NAA0.05 mg.L-1,较MS基本培养基不定芽生长正常,芽诱导率高(76%),增殖倍数达4.7个/叶柄。通过不定芽的继代培养及壮苗、生根,形成完整植株,炼苗移栽成活率高。
- 曾幼玲易丽娟张富春
- 关键词：外植体激素盐浓度不定芽分化
- 大肠杆菌Na^+/H^+反向运输体A基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2004年
- 为研究细菌的耐盐机理 ,根据细菌中存在的Na+/H+反向运输体 (nhaA)的基因序列 ,采用PCR扩增的方法 ,从大肠杆菌 (Escherichiacoli)DH5α中克隆获得了 1 1kb的DNA片段 ,经过核酸序列分析 ,发现基因片段包含了nhaA基因完整的读码框架。采用序列同源性分析方法 ,结果显示nhaA基因在多种细菌中均存在 ,表明nhaA基因是细菌中普遍存在的一种能够反向运输Na+的基因 ,与细菌的耐盐性有着密切的关系 。
- 李金耀张富春马纪单文娟王宾
- 关键词：耐盐性DNA序列分析
