国家自然科学基金(81160260)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 硬脂酸修饰的聚乙烯亚胺作为siRNA载体的体外评价
- 2013年
- 目的:考察硬脂酸(SA)修饰的聚乙烯亚胺(PEI)的细胞毒性及转染siRNA的性能。方法:硬脂酸通过羧基与伯氨基脱水缩合嫁接到PEI分子上;激光粒度仪检测粒径及zeta电位;MTT法评价PEI被修饰后的细胞毒性;流式细胞仪、荧光显微镜、荧光酶标仪检测材料转染siRNA的性能。结果:修饰产物PEI-SA结合核酸分子前后粒径分别为(61.2±22.4)nm和(70.9±41.4)nm,zeta电位分别为(25.5±4.5)mV和(18.0±4.5)mV;PEI-SA浓度低于64μg/mL时没有细胞毒性,而修饰前的PEI浓度高于8μg/mL时就有明显的细胞毒性;PEI-SA对siRNA的转染效率最高可达(94.7±1.3)%,高于修饰前PEI组及脂质体组;转染进入细胞的siRNA量随siRNA的浓度升高及转染时间增长而增多。结论:硬脂酸对PEI的修饰,降低了PEI的细胞毒性,增高了转染效率。PEI-SA可以作为一种有效的非病毒基因载体。
- 金春阳潘彦鹏吴道澄郝新宝
- 关键词：基因载体聚乙烯亚胺细胞毒性转染效率SIRNA
- 壳寡糖作为基因载体的体外评价被引量：1
- 2013年
- 目的评价壳寡糖作为基因载体的理化性质及转染293T细胞的活性。方法选用相对分子质量小的壳寡糖,使用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度壳寡糖的细胞毒性,琼脂糖凝胶电泳检测壳寡糖结合及保护质粒DNA的作用,荧光显微镜观测转染结果。结果高浓度壳寡糖第2天时具有较低毒性,第4天时细胞存活率高于不做处理的对照细胞;质量比>20倍时,壳寡糖几乎完全结合DNA,并且具有一定保护的作用;转染293T细胞后,荧光显微镜能够观测到表达的绿色荧光蛋白。结论壳寡糖可以作为基因载体转染293T细胞。
- 金春阳赵天勤方良牟鸣薇郝新宝
- 关键词：壳寡糖非病毒基因载体基因转染细胞毒性
