江苏省中医药管理局科技项目(LZ11041)
- 作品数：4 被引量：24H指数：4
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- 相关机构：南京中医药大学江苏省中医院江西省中医院更多>>
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- 枸杞提取物及其成分叶黄素/玉米黄质在体内外对年龄相关性黄斑变性防治的影响被引量：11
- 2013年
- 目的研究枸杞提取物在体内对高脂饮食及氢醌诱发的年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)模型小鼠的半胱氨酸组织蛋白酶B(cathepsin B,Cat B)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)表达的抑制作用,并探讨叶黄素和玉米黄质在体外对过氧化氢(H2O2)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞的基质金属蛋白激酶(MMP)2、金属蛋白激酶组织抑制因子(TIMP)2表达的影响。方法 8个月龄的雌性C57BL/6小鼠50只。10只正常饮食作为年龄对照组;40只高脂饮食6个月后,在饮水中加入氢醌(0.8%)继续3个月,随机分为模型对照组(10只)、高、中、低剂量治疗组(每组10只)分别以3.75、2.50、1.25g/(kg·d)枸杞浸膏灌胃,每日1次,持续3个月。观察期满处死动物,摘取眼球。免疫组化观察Cat B、Cys C的表达,RT-PCR、Western blot检测Cat B、Cys C mRNA及蛋白表达;细胞增殖活性的检测筛选H2O2、叶黄素和玉米黄质的药物浓度,Western blot检测细胞中MMP-2、TIMP-2蛋白表达。结果在体内模型对照组的Cat B、Cys C mRNA及蛋白的表达显著强于年龄对照组(P<0.05,P<0.01),而治疗各组Cat B、Cys C mRNA弱于模型对照组(P<0.01),中、高剂量组Cat B及各剂量组CysC蛋白表达弱于模型对照组(P<0.05,P<0.01)。在体外细胞中叶黄素和玉米黄质能够下调受H2O2诱导的ARPE-19细胞的MMP-2、TIMP-2的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论枸杞提取物能下调高脂饮食及氢醌诱发的模型小鼠Cat B、Cys C的高表达,叶黄素和玉米黄质对H2O2诱导的ARPE-19细胞MMP-2、TIMP-2的蛋白表达有下调作用。
- 黄冰林丁淑华杭丽郑仕中李伟徐新荣
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂C叶黄素玉米黄质
- 柚皮素β-环糊精包合物的制备及对模型大鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用被引量：5
- 2014年
- 目的:制备柚皮素β-环糊精(β-CD)包合物,研究其对模型大鼠脉络膜新生血管(CNV)形成的抑制作用。方法:采用饱和溶液法制备柚皮素β-CD包合物;利用红外光谱、X射线衍射法对包合物进行表征分析,测定柚皮素的含量与水溶解度;通过氪激光复制大鼠CNV模型,15只BN大鼠随机均分为溶媒对照(等容溶媒)组、柚皮素(20 mg/kg)组与柚皮素β-CD包合物(97.4 mg/kg)组,腹腔注射给药,每天1次,连续4周。以脉络膜铺片法测量大鼠CNV面积。结果:柚皮素和β-CD形成了稳定的包合物,柚皮素β-CD包合物中柚皮素质量分数为20.53%,柚皮素在水中的溶解度为单体的11.8倍。与溶媒对照组比较,柚皮素组、柚皮素β-CD包合物组大鼠CNV面积减小,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与柚皮素组比较,柚皮素β-CD包合物组大鼠CNV面积减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:柚皮素和β-CD包合后,水溶性增加;柚皮素β-CD包合物抑制模型大鼠CNV形成的作用优于柚皮素。
- 徐新荣于海涛杭丽邵雁丁淑华杨学文
- 关键词：柚皮素Β-环糊精包合物脉络膜新生血管
- 柚皮素β-环糊精包合物对大鼠实验性脉络膜新生血管的抑制作用被引量：5
- 2015年
- 背景脉络膜新生血管（CNV）是导致多种眼底疾病致盲的主要原因，目前仍无有效的治疗方法。研究表明柚皮素能够抑制CNV的发生和发展，但由于其水溶性差而影响其生物利用度。β-环糊精（β-CD）可提高药物的水溶解度，但其与柚皮素包合后是否能改善柚皮素抑制CNV的作用尚不清楚。目的制备柚皮素β-CD包合物，比较其与柚皮素对大鼠CNV的抑制作用。方法采用饱和溶液法制备柚皮素β-CD包合物，依据标准曲线法测定包合物中柚皮素的水溶解度。采用随机数字表法将32只SPF级健康雄性Brown—Norway大鼠分为正常对照组、模型对照组、柚皮素组和柚皮素β-CD组，每组8只。采用氪激光法在模型对照组、柚皮素组及柚皮素β-CD组大鼠右眼制作CNV模型。于视网膜光凝当天起柚皮素组和柚皮素β-CD组大鼠腹腔内分别注射20mg／kg柚皮素和相同质量浓度柚皮素的β-CD包合物，每日1次，连续4周，模型对照组大鼠腹腔注射等容积的DMSO。给药后第4周经大鼠食下静脉注射荧光素异硫氰酸酯葡聚糖（FITC—D），制备脉络膜铺片，测量大鼠CNV面积；从各组大鼠实验眼分离出视网膜色素上皮（RPE）-脉络膜-巩膜复合体组织标本，分别采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测标本组织中血管内皮生长因子（VEGF）、环氧化酶-2（COX-2）、磷脂酰肌醇（-3）激酶（PI3K）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9 mRNA及其蛋白的相对表达量。结果柚皮素经β-CD包合后在水中的溶解度较原药提高了11．8倍。模型对照组、柚皮素组和柚皮素β-CD组CNV面积分别为（34．56±1．67）、（20．90±1．47）和（13．20±1．38）×10^3μm^2，柚皮素组、柚皮素β-CD组大鼠CNV面积明显小于模型对照组，差异均有统计学意义（t=3．973，P〈0.05；t=5．532，P〈0．01），柚皮素β-CD组大�
- 徐新荣于海涛杭丽邵雁丁淑华杨学文
- 关键词：柚皮素Β-环糊精包合物脉络膜新生血管
- 枸杞提取物对小鼠视网膜色素上皮细胞下沉积物形成的抑制作用被引量：4
- 2013年
- 目的研究枸杞提取物对高脂饮食及氢醌诱发的小鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞下沉积物形成的抑制作用。方法 8个月龄的雌性C57BL/6小鼠40只。8只予正常饮食,作为年龄对照组;32只高脂肪饮食喂养6个月后,饮水中加入氢醌(0.8%)继续饲养3个月,随机分为模型对照组(8只)、治疗组(分高剂量、中剂量、低剂量组,每组8只),治疗组以枸杞浸膏灌胃,高剂量3.75g/(kg.d)、中剂量2.50g/(kg.d)、低剂量1.25g/(kg.d),每日1次,持续3个月。观察期满处死动物,摘取眼球。电镜观察RPE细胞下沉积物及Bruch膜;real time-PCR、western blot检测半胱氨酸组织蛋白酶B(Cat B)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)mRNA转录及蛋白表达。结果造模后RPE细胞损害、RPE细胞下沉积物形成均较年龄对照组明显增加,模型对照组Bruch膜较年龄对照组明显增厚,枸杞提取物能减轻RPE细胞损害、减少沉积物的形成、抑制Bruch膜的增厚。Cat B、Cys C mRNA及蛋白表达模型对照组较年龄对照组增强,枸杞提取物能下调模型小鼠视网膜Cat B、Cys C的表达,随剂量的增加而作用加强,具剂量依赖关系,以Cys C表达下调更显著。结论枸杞提取物能减轻高脂饮食和氢醌引起的模型小鼠RPE细胞损害,抑制RPE细胞下沉积物形成及Bruch膜增厚,机制可能是减少活性氧介质的产生,下调Cat B、CysC的表达,并使这2种酶的综合作用向Cat B作用倾斜有关。
- 黄冰林杭丽郑仕中李伟朱长乐魏源华徐新荣
- 关键词：BRUCH膜CATHEPSINCYSTATIN
