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S100A6通过PI3K/Akt信号通路促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移被引量：11: 2013年; 目的：研究PI3K/Akt信号通路在S100A6介导的人骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移中的作用.方法：首先制备重组的人S100A6蛋白（recombinant human S100A6,rhS100A6）;rhS100A6与PI3K抑制剂（LY294002和wortmannin）单独或同时处理143B细胞,其中rhS100A6的终浓度为30 mg/L,LY294002和wortmannin的终浓度分别为10 μmol/L和0.5 μmol/L;采用Western blotting分析143B细胞中PI3K/Akt信号通路相关分子总Akt（total Akt,t-Akt）及磷酸化Akt（phosphorylation of Akt,p-Akt）蛋白的表达变化,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移.结果：（1）成功制备rhS100A6蛋白,rhS100A6显著增强143B细胞的增殖和迁移能力（P〈0.05）;（2）rhS100A6上调143B细胞中Akt的磷酸化;（3）与rhS100A6组相比,rhS100A6与LY294002或wortmannin联合处理组143B细胞的p-Akt减少（P〈0.05）,细胞的增殖和迁移能力降低,在不同时点细胞的增殖率下降10.3%～69.7%,细胞迁移率下降37.9%～41.6%,差异均有统计学意义（P〈0.05）.结论：S100A6促进人骨肉瘤细胞143B增殖和迁移的作用至少部分是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的.; 王海燕邹正渝段亮陈娴李欢袁世梅何通川周兰; 关键词：S100A6 骨肉瘤 P13K AKT信号通路

二次聚焦超声辐射对小鼠宫颈癌U14肿瘤复发和转移的影响: 2012年; 目的观察二次聚焦超声辐射对小鼠腿部移植的宫颈癌U14肿瘤复发和转移的影响。方法将72只腿部移植成功的U14宫颈癌小鼠按随机数字表法随机分为一次辐射组、二次辐射组和手术切除组，每组小鼠24只。一次辐射组于移植肿瘤后第7天接受1次聚焦超声辐射治疗；二次辐射组于移植肿瘤后第7天接受1次聚焦超声辐射治疗，第8天接受第2次聚焦超声辐射治疗；手术切除组于移植肿瘤后第7天切除原发肿瘤。3组小鼠均于肿瘤移植后第23天检测其抑瘤率和抑制转移率。结果二次辐射组的抑瘤率和抑制转移率分别为61．70％和68．18％，显著高于一次辐射组的41．84％和31．82％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论一次聚焦超声辐射和二次聚焦超声辐射对肿瘤的局部复发和转移均有明显的抑制作用，且二次聚焦超声辐射较一次聚焦超声辐射的治疗作用更强。; 熊希彭斌林川郭宇翟蓓张家模李成志; 关键词：聚焦超声小鼠子宫肿瘤复发肿瘤转移

BMP9对体外模拟骨微环境中乳腺癌细胞迁移和凋亡的影响及其机制探讨被引量：5: 2013年; 目的:采用体外共培养技术模拟骨微环境,研究人骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)对人高骨转移性乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒AdBMP9导入MDA-MB-231细胞中,与骨髓基质细胞HS-5在Transwell共培养体系中培养3d。然后,采用划痕愈合实验、Transwell小室和FCM法检测MDA-MB-231细胞迁移和凋亡的变化;RT-PCR法检测共培养的2种细胞中基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)、白细胞介素-6(interleukin6,IL-6)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)等转移相关因子的水平;细胞免疫荧光法检测MDA-MB-231细胞中趋化因子受体CXCR4的表达;蛋白质印迹法检测2种细胞中SDF-1/CXCR4-PI3K信号通路关键分子的表达水平变化。结果:在模拟骨微环境的共培养体系中过表达BMP9后,乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移受到明显抑制(P<0.05),而肿瘤细胞凋亡增加(P<0.001)。过表达BMP9后,骨髓基质HS-5细胞中转移相关因子SDF-1、IL-6和MCP-1表达显著下调(P<0.05),但MDA-MB-231细胞中SDF-1表达水平无明显变化,IL-6和MCP-1的表达也明显下调。另外,MDA-MB-231细胞中本身CXCR4阳性,BMP9过表达对MDA-MB-231细胞中CXCR4表达无明显影响,但可以下调其配体SDF-1在HS-5细胞中的表达水平,且MDA-MB-231细胞中磷酸化的Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)水平也被下调(P<0.05)。结论:模拟骨微环境的共培养体系中,BMP9过表达可以调节乳腺癌细胞与骨髓基质细胞的相互作用,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移,并促进其凋亡,且该抑制作用可能与SDF-1/CXCR4-PI3K信号通路有关。; 王维陈莹莹刘月红万绍恒张志慧王婷张彦; 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移骨形态发生蛋白质类骨髓细胞

在体外模拟的骨微环境中下调BMP9对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响及其可能机制被引量：1: 2013年; 探讨在体外模拟的乳腺癌骨转移微环境中,采用RNAi技术下调骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)基因对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响及可能机制。用Transwell小室将空白组SK-BR-3细胞、感染腺病毒AdRFP的对照组SK-BR-3/RFP细胞、感染腺病毒AdsiBMP9的实验组SK-BR-3/siBMP9细胞分别与人骨髓基质HS-5细胞间接共培养后,MTT增殖实验、划痕愈合实验、Transwell迁移实验分别检测下调BMP9对SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响;RT-PCR和Western blot法检测相关因子的变化。结果显示,在共培养体系中,SK-BR-3/siBMP9组的BMP9显著低于对照组(P<0.05);下调BMP9可有效促进SK-BR-3/siBMP9细胞增殖(P<0.05),SK-BR-3/siBMP9细胞的划痕愈合率、穿膜细胞数也明显升高(P<0.05);SK-BR-3/siBMP9组血管内皮细胞生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达均显著上调(P<0.05),且Western blot结果显示p-AKT显著上调(P<0.05)。综上,在骨转移微环境中,干扰BMP9表达可促进人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖及迁移,其作用机制可能与上调VEGF、CTGF表达有关,且这个过程可能涉及PI3K/AKT通路的激活。; 陈莹莹王维刘月红万绍恒张志慧王婷王晋蜀张彦; 关键词：乳腺肿瘤共培养

聚焦超声消融不同MRI图像表现的子宫肌瘤的疗效被引量：21: 2011年; 目的:通过对MRI图像进行分析,探讨导致消融疗效产生差异的可能性因素。方法:选择经MRI确诊的症状性子宫肌瘤患者行超声引导下的聚焦超声消融,记录患者在消融中出现的不良反应。消融后用增强MRI评估肌瘤体积的消融范围,并比较子宫肌瘤在MRI图像上不同的位置、大小、类型及T2WI信号强度之间消融疗效的差异。结果:从2006年10月至2008年10月,65例患者共66个子宫肌瘤接受了聚焦超声消融,所有患者均顺利完成治疗,未出现显著并发症。消融前肌瘤中位体积98.22 cm3,消融后增强MRI中无增强剂灌注区域体积82.81 cm3,肌瘤体积消融率(76.88±16.28)%。肌瘤在MRI图像上不同位置、大小及类型之间的消融疗效比较差异无统计学意义(P>0.05),在MRI T2WI不同的信号强度上疗效差异有统计学意义(P<0.05),低信号强度的肌瘤体积消融率最高。结论:子宫肌瘤在MRI T2WI上呈低信号强度时易达到理想的消融疗效,可作为预测子宫肌瘤消融疗效的指标之一。; 王婷陈文直陈锦云胡亮刘映江唐良萏王智彪; 关键词：子宫肌瘤 MRI

高强度聚焦超声抑制小鼠黑色素瘤细胞B16-F10在体内的转移被引量：1: 2015年; 目的在黑色素瘤的小鼠模型上,探讨高强度聚焦超声（HIFU）处理对黑色素瘤细胞体内转移的影响。方法皮下注射小鼠黑色素瘤细胞B16-F10以构建小鼠黑色素瘤皮下移植瘤模型;待肿瘤最长径长至7~10 mm时进行HIFU处理,并设置实验对照组（荷瘤鼠辐照HIFU但保持治疗头功率源开关关闭,即假照组）;治疗后每3 d测量肿瘤长径和短径,共观察3周,绘制肿瘤曲线,统计生存率和转移率,并通过实时荧光定量PCR测定血液中黑色素瘤细胞3个标志物的相对表达量以监测血液中循环黑色素瘤细胞的数量,它们分别是黑色素瘤相关抗原A3（MAGE-A3）、T细胞1识别的黑色素瘤抗原（MART1）以及同源转化成对框基因转录因子PAX3）;在HIFU治疗后14 d,通过尾静脉注射再次移植B16-F10细胞,观测其肺转移率。结果（1）各自的中位生存时间及95%可信区间（CI）：假照组分别为19.00 d和17.14~20.86 d,HIFU组则分别为26.00d和24.76~27.25 d,生存率差异显著（P〈0.01）;从治疗后第20天起,两组小鼠的肿瘤体积差异明显,从HIFU处理后第20天开始,包括处理后第23、26天,辐照组小鼠肿瘤体积明显小于假照组（P〈0.05）;（2）实时荧光定量PCR结果显示HIFU组小鼠在治疗后第7天的MAGE-A3、MART1和PAX3三个指标都明显低于假照组（P〈0.05）,在治疗后第14天其MAGE-A3的表达量仍然明显低于假照组（P〈0.05）;（3）在HIFU治疗后14 d通过尾静脉再次移植相同肿瘤细胞,HIFU组肺转移灶的数量明显低于假照组（P〈0.05）,肿瘤转移抑制率为42.4%。结论 HIFU处理能够抑制黑色素瘤细胞在体内转移的发生,其机制可能涉及减少肿瘤细胞从原发灶的脱落和瘤细胞在肺部的定植能力。; 李欢袁世梅杨敏段亮王海燕查何李雪茹孙晖翁亚光罗进勇何通川李崇雁王嫣李发琪王志彪周兰; 关键词：高强度聚焦超声黑色素瘤

体外模拟乳腺脂肪微环境中过表达BMP9对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制探讨被引量：1: 2014年; 目的 :采用体外共培养技术模拟乳腺脂肪微环境,研究人骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和迁移的影响,并初步探讨其可能的机制。方法 :将重组腺病毒Ad-BMP9(以Ad-GFP作为对照)导入MDA-MB-231细胞中,构建MDA-MB-231/Ad-BMP9重组细胞,再与前体脂肪细胞3T3-L1在Transwell共培养体系中间接共培养3 d。荧光显微镜下观察共培养体系中重组腺病毒Ad-BMP9在MDA-MB-231细胞中的感染效率,并通过RT-PCR和蛋白质印迹法验证BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达。然后,分别采用MTT法、FCM法、划痕愈合实验和Transwell迁移实验检测MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的变化;蛋白质印迹法检测共培养的2种细胞中增殖和转移相关因子瘦素(leptin)的表达水平变化;细胞免疫荧光法和蛋白质印迹法分别检测MDA-MB-231细胞中leptin受体OB-R及leptin信号通路关键分子的表达水平变化。结果 :荧光显微镜下观察到重组腺病毒Ad-BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中感染效率为70%左右,且BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达(P<0.05)。在模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中过表达BMP9后,乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移受到明显抑制(P<0.05),并且细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.001)。过表达BMP9后,前体脂肪细胞3T3-L1中leptin表达显著下调(P<0.05),而MDA-MB-231细胞中磷酸化的STAT3(phosphorylated STAT3,p-STAT3)和磷酸化的ERK1/2(phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)水平均明显下调(均P<0.05)。结论 :模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中,BMP9过表达可以调节乳腺癌细胞与前体脂肪细胞的相互作用,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,且该抑制作用可能与leptin经典信号通路有关。; 张志慧王维陈莹莹王婷王晋蜀姜亚运张彦; 关键词：骨形态发生蛋白质类脂细胞细胞增殖

双氢青蒿素通过阻断Wnt/β-catenin信号抑制骨肉瘤细胞系体外增殖和侵袭被引量：6: 2014年; 目的研究双氢青蒿素(DHA)在体外对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用及其可能的分子机制。方法不同浓度的DHA处理骨肉瘤细胞,结晶紫染色检测细胞增殖。Western blot和荧光素酶报告基因实验检测Wnt/β-catenin信号通路的活化情况。结果 DHA在体外能明显浓度依赖性地抑制人骨肉瘤细胞的增殖和侵袭(P<0.05);DHA可降低骨肉瘤细胞β-catenin的蛋白水平和转录调控活性(P<0.01),过表达β-catenin可逆转DHA对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用(P<0.05),而β-catenin基因沉默则可进一步加强其抑制效果(P<0.01)。结论DHA可明显抑制人骨肉瘤细胞增殖和侵袭,这种作用可能与其阻断Wnt/β-catenin信号通路相关。; 王文娟赵丹徐静李丽董谦王玉凤冯巧灵王锦何娟文何通川罗进勇; 关键词：双氢青蒿素骨肉瘤 WNT

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国家重点基础研究发展计划(2011CB707906)

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